本期目录

• 2008年 第24卷 第1期 刊出日期：2008-01-05

  生物技术科学

  苜蓿下胚轴培养特性研究 任建宏　 贺学林　 亢福仁　 陈耀锋 2008, 24 (1):  0.  摘要 + ( 1526)   苜蓿无菌苗下胚轴在附加2mg/L 2,4-D和0.1～0.9mg/L KT的SH培养基中诱导出愈伤组织,愈伤组织再在附加1.0mg/L IAA和1.0-2mg/L 6BA的SH培养基中分化;其中诱导愈伤率为100%,阿尔刚金苜蓿分化率在35.4%～43.7%时,随着KT的浓度增加,愈伤组织的出愈率反而延迟;而在分化过程中发现分化时不宜采用浓度过高的激素组合.0.1%Hgcl2消毒时间对苜蓿种子萌发效果的影响较大,在考虑降低污染率和提高存活率时,阿尔刚金种子以消毒10min最佳,紫花苜蓿以20min最佳.

  畜牧 动物医学 蚕 蜂

  花生凝集素受体在兔子宫内的分布与激素调节 韩学敏；郭斌；冯海华；李光凤；赵丽红；张学明；岳占碰 2008, 24 (1):  1-4.  摘要 + ( 1365)   采用组织化学方法对花生凝集素(peanut aggutinin,PNA)受体在兔发情周期和早期妊娠子宫内的分布以及雌、孕激素对其表达的影响进行了研究.结果显示,PNA受体主要存在于兔子宫内膜腔上皮和腺上皮,其表达量随妊娠阶段的不同而发生变化,PNA受体在休情期、发情期及妊娠第1天的兔子宫内未见表达,在妊娠第2至第4天时表达量逐渐增加,且在妊娠第3至4天时表达量最高,此后,在妊娠第5至7天时表达量逐渐减少,妊娠第7天时,着床区子宫内PNA受体的表达量略高于非着床区.假孕兔子宫内PNA受体的表达与正常妊娠时相似.注射孕酮可促进卵巢切除后兔子宫内膜PNA受体的表达,而注射雌激素对其表达有明显抑制作用.结果表明,PNA受体在兔子宫内的分布与着床前胚胎与子宫内膜之间的黏附有关,PNA受体在兔子宫内的表达受母体分泌的孕酮和雌激素所调节.

  荆豆凝集素-1受体在兔子宫内的分布与激素调节 郭斌;冯海华;韩学敏; 张学明;岳占碰 2008, 24 (1):  5-8.  摘要 + ( 1288)   采用组织化学方法对荆豆凝集素-1(ulex europaeus agglutinin-1,UEA-1)受体在兔发情周期及早期妊娠子宫内的分布以及激素调节进行了研究.结果显示,UEA-1受体主要存在于兔子宫内膜腔上皮,其表达量随妊娠阶段的不同而发生动态性变化.UEA-1受体在休情期兔子宫内未见表达,而在发情期兔子宫内的表达量较高.在早期妊娠兔子宫内,在妊娠第1天子宫内膜腔上皮表面UEA-1受体的表达量较高,妊娠第2天和第3天时在子宫内膜腔上皮表面仅见有少量UEA-1受体的表达,妊娠第4天时,子宫内膜腔上皮表面UEA-1受体的表达量很高,此后其表达量又迅速下降,在妊娠第5至第7天时未见表达.在假孕兔子宫内UEA-1受体的表达方式与正常妊娠时相似.注射雌激素可明显促进卵巢切除后兔子宫内膜UEA-1受体的表达,而注射孕酮对其表达有明显抑制作用.结果表明,兔子宫内UEA-1受体的分布与着床前胚胎与子宫内膜之间的黏附和植入有关,UEA-1受体在兔子宫内的表达受母体分泌的激素所调控.

  塔里木马鹿单核细胞增多性李氏杆菌的分离与鉴定 乔军　 孟庆玲　 陈创夫　 才学鹏　 贾桂珍 2008, 24 (1):  9-12.  摘要 + ( 1131)   对马鹿流产胎儿的肝脏中的细菌进行分离和鉴定.用亚碲酸钾培养基分离流产胎儿的肝脏中的细菌,并用生化试验、人工感染试验、PCR和测序方法对分离的细菌进行鉴定.该分离株在生化试验、培养特性、溶血性等方面与单核细胞增多性李氏杆菌特性完全相符,能使接种小鼠在24～96h内100%死亡.测序结果表明,扩增P60基因片段与GenBank中报道的单核细胞增多性李氏杆菌强毒株EGD株P60基因核苷酸的同源性分别为99.1%,推导的氨基酸序列的同源性为99.6%.从塔里木马鹿成功分离的细菌为单核细胞增多性李氏杆菌强毒株.

  家畜的性别选择方式 施巧婷　 徐照学　 周梦蛟 2008, 24 (1):  13-17.  摘要 + ( 1097)   性别控制是按照人们的意愿生产特定性别后代的动物繁殖新技术.随着科学技术的发展和各种新的研究工具在性别控制中的应用,性别控制技术的发展已越来越成熟.此就家畜胚胎性别控制技术的研究现状进行了概述,分析了存在的问题并对发展前景作了展望,以期能为家畜早期胚胎性别控制的研究提供借鉴和参考.

  H9N2亚型AIV HA基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达 詹爱军　 王新卫　 谭婉明　 马静云　 毕英佐　 于康振　 曹永长 2008, 24 (1):  18-22.  摘要 + ( 1776)   [研究目的]利用杆状病毒表达系统表达AIV H9N2亚型HA基因以获得可以利用的HA蛋白;[方法]应用DNAStar软件,参照Genbank中注册的AIV H9N2亚型HA基因序列,设计了一对引物,用RT-PCR方法成功地扩增出带双酶切位点的H9亚型AIV的HA基因,通过BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切位点将H9HA基因插入转移质粒载体pFastbacHTa中,获得重组转移载体pFastbacHTa-H9HA并将其转化DH10 Bac细胞,与Bacmid发生位点特异性转座作用,得到重组穿梭载体Bacmid-H9HA,再将其转染昆虫细胞High Five,进行PCR鉴定、SDS-PAGE和Westem Blot检测;[结果]HA基因正确地插入到病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下游,HA基因在High Five细胞中得到了表达,H9HA大小约为67 KD,而且表达的产物具有特异免疫学反应性;[结论]HA基因在昆虫细胞获得表达,为进一步生产检测H9N2亚型流感病毒的检测试剂或者构建亚单位疫苗奠定了基础.

  笼养蛋鸡健康养殖技术研究的现状与发展趋势 刘世荣　 刘雁征　 李云开 2008, 24 (1):  23-28.  摘要 + ( 1661)   蛋鸡笼养因其突出的优点必将仍是中国以及许多国家主要的养殖模式,笼养蛋鸡健康养殖是目前急需解决的问题.在对畜禽健康养殖发展的重要性和基本概念进行界定的基础上,从优良品种选育、饲养方式完善与替代、饲养环境优化、优质饲料生产与配制、动物疫病防控、健康养殖管理6个方面对国内外笼养蛋鸡健康养殖调控技术研究现状进行了综述,最后探索性地提出了中国笼养蛋鸡健康养殖技术研究的发展趋势.

  生物技术科学

  特油作物蓖麻组织培养关键技术研究初报 谭德云　 陈祥梅　 王光明　 岳霆　 李敬忠　 孙丽娟　 刘宏光　 陈军 2008, 24 (1):  29-32.  摘要 + ( 1573)   以蓖麻成熟种子为材料建立无菌系,研究了不同播种方式、不同培养基、不同外植体、不同激素配比对愈伤组织诱导的影响.结果表明:蓖麻种子剥去种皮在以纱布为支持物的培养基上出芽,污染率低,出芽时间提前了27d,幼苗长势也均好于其它培养基;愈伤组织的诱导以叶片为外植体最佳,最适培养基为:MS+2,4D1.0+6-BA0.5+NAA0.02,愈伤组织诱导率达93%,愈伤长势正常.

  棉花EST-SSRs在香蕉中的通用性 郑丽珊　 石玉真　 王静毅　 黄秉智　 冀小蕊　 张保才　 袁有禄　 武耀 2008, 24 (1):  33-37.  摘要 + ( 1607)   香蕉SSR分子标记开发和应用有限,通过对棉花SSR分子标记在香蕉中的通用性研究.用1343对棉花EST-SSR引物对贡蕉(AA)和野蕉(BB)两个材料进行转移扩增,得到226对有效扩增的引物.进一步用该226对引物对20个香蕉品种和4个野蕉材料扩增,得到了157对多态性引物.157对多态性引物共扩增到1188个条带,平均7.6个;引物的多态信息含量范围在0.58～0.91之间.依据获得的SSR数据,应用非加权类平均聚类方法,在相似系数0.60水平上,将24个品种分为两大类群,类群Ⅰ是以A基因组为主的品种群,类群Ⅱ是以B基因组和A基因组与B基因组杂交的品种群,证明了棉花EST-SSR分子标记在香蕉中具有通用性.

  水曲柳苗木根系和叶片氮的分配及对生物量影响 范志强　 王政权　 吴楚　 孙海龙　 徐文静　 霍常富 2008, 24 (1):  45-51.  摘要 + ( 1475)   为研究氮素浓度对水曲柳(Fraxinus mandshurica)苗木根系和叶片内氮的分配以及对苗木生物量的影响,采用温室砂培实验对4个不同氮素浓度处理(1、4、8、16 mmol/L)下的一年生水曲柳幼苗在不同生长时期根系、茎干和叶片中氮素浓度及其关系进行测定分析.研究结果显示:氮素供给浓度显著影响苗木根系氮浓度和叶片氮浓度.随供氮水平提高,苗木体内根系和叶片氮浓度都明显提高.在生长初期(6月)和中期(7月和8月),叶片中氮浓度分别高于根系9.40、9.55和4.21mg/g,而在生长末期(9月)叶片中氮浓度低于根系;根系中氮浓度与叶片中氮浓度有密切线性关系,在生长初期和中期,根系氮浓度增加1个单位,叶片氮浓度平均增加1.6个单位,在生长末期相关性减弱;氮有效性增加能够促进根系和地上部分生物量增长,其中根系生物量增加明显高于地上部分.当氮供应不足(氮浓度为1和4 mmol/L)时,分配到根系生物量1个单位,则分配到地上部分生物量约为0.28个单位.氮供应充足条件下,线性关系也较弱.说明水曲柳是一个对氮素比较敏感的树种,苗木根系和叶片中的氮浓度与其生物量存在显著的关系.

  农杆枪法基因遗传转化技术初报 于丽霞　 鄢波　 晏慧君　 张婷　 李涵 2008, 24 (1):  52-55.  摘要 + ( 1965)   为提高遗传转化的效率,克服受体范围的限制,采用农杆枪法进行基因的遗传转化.根据已报导的VirD1和VirD2基因的序列设计特异引物,以农杆菌C58菌株的质粒为模板进行PCR扩增,对VirD1和VirD2基因进行克隆.将序列正确的VirD1和VirD2基因连接到植物表达栽体PBI121启动子CaMV 35S和终止子nos之间,构建VirD1和VirD2基因的表达载体pB-VirD1及pB-VirD2.经PCR及酶切鉴定,基因已成功构建到表达载体上,为农杆枪法进行目的基因转化的研究奠定了基础.

  顽拗植物龙眼果皮中总RNA的提取方法研究 王芳　 董乐　 林娈 2008, 24 (1):  56-59.  摘要 + ( 1910)   [研究目的]为建立适于富含多糖和多酚等物质的龙眼果皮总RNA提取的方法;[方法]采用TRIZOL法、Tris-硼酸法和改良CTAB法提取龙眼果皮的总RNA,并通过凝胶电泳、紫外分光光度法检测提取的RNA样品的品质;[结果]改良CTAB法、Tris-硼酸法所提取的RNA经电泳检测,28SrRNA和18S rRNA条带清晰,RT-PCR得到的条带与目的片断大小一致,说明所提取的RNA纯度高、质量好;TRIZOL法所得到的RNA降解严重,没有得到完整的电泳条带;[结论]改良CTAB法和Tris-硼酸法适于富含多糖和多酚等物质的龙眼果皮总RNA的提取.

  水培花卉水生根系诱导研究初报 汪强　 苏菊　 孙合金　 段增强　 谭金芳　 韩燕来　 王慧荣 2008, 24 (1):  60-63.  摘要 + ( 1864)   水生诱导根系是陆生植物水培条件下良好生长的基础,以鸡冠花(Celosia cristata L.)和凤凰草(Myriophyllum aquaticum(Vell.)Verdc)为材料对花卉水生诱导根系做了初步的研究.把鸡冠花和凤凰草水培、旱种和旱种改水种进行了对比试验,并与水稻根系进行了比较.结果表明:水培条件下诱导的根系有较高的根活性;旱生植物在水生条件下中柱部分并没有什么大的变化,但皮层薄壁组织细胞产生裂缝,生成结构类似水稻根系的通气组织.水生诱导根系在部分淹水条件下形态结构和生理活性都发生了相应变化,以适应水培条件下正常生长.

  辽东楤木愈伤组织诱导及增殖技术研究 赵恒田　 宋晓宏　 沈云霞 2008, 24 (1):  64-67.  摘要 + ( 1702)   以辽东楤木茎尖、幼叶、嫩茎、休眠芽为外植体,以MS为基本培养基,附加不同种类和浓度的植物生长调节物质诱导丛生芽及再生植株,筛选出适合于辽东楤木组织培养的系列培养基配方.结果表明,愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L(或IAA0.2mg/L),幼叶为愈伤组织诱导的理想外植体,30d继代一次分化效率较高,达到73%;不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA1.0～1.5mg/L十IAA0.1～0.15mg/L+NAA0.1～0.15mg/L;不定芽生根的最佳培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L;按1∶1混配的蛭石与草炭为试管苗移栽最适基质.

  春兰基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化 单丽丽　 陆瑞菊　 王亦菲　 陆惠丽　 黄剑华 2008, 24 (1):  68-73.  摘要 + ( 1675)   以春兰为研究材料,对春兰基因组DNA的提取以及RAPD-PCR反应体系进行了优化.结果表明,在提取液中加入PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质,采用高盐沉淀DNA和多次洗涤去除糖类,可以得到高质量春兰基因组DNA.电泳检测表明,所获得的DNA完整,无降解,完全可以满足RAPD等分子标记分析的需要.同时对春兰RAPD-PCR反应体系中各个影响因素进行了优化,建立了适合春兰RAPD分子标记的最佳反应体系,即20μl反应体系中含1UTaqDNA聚合酶,60μmol/L dNTPs,2.25mmol/L Mg2+,1.0μmol/L引物,1.5ng/μl模板DNA.

  山东省不同年代栽培大豆SSR标记遗传多样性分析 韩雪芹　 林延慧　 张礼凤　 蒿燕　 张丽娟 2008, 24 (1):  74-77.  摘要 + ( 1765)   从分子水平探讨山东省大豆种质资源遗传多样性,为山东大豆今后的大豆育种和遗传改良奠定基础;对山东省36份不同年代材料进行SSR标记,计算遗传相似系数,并对供试品种进行UPGMA聚类分析;20对SSR引物共扩增出138个等位变异,平均每对引物扩增出6.9个等位变异.遗传相似系数的变化范围为0.66～0.97,总体平均值为0.78;相似系数大,品种间遗传差异较小.利用SSR标记的数据结果,对供试品种进行聚类分析,东解1号单独聚为一类,其他品种聚成2个类群,聚类结果表明其多样性与地理来源及系谱关系相关联,但从年代上并没有很好的划分.对山东大豆的多样性分析也有必要采取多种方法对其进行综合有效的鉴定.