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中国农学通报 ›› 2012, Vol. 28 ›› Issue (27): 213-217.

所属专题： 生物技术

• 生物技术科学 • 上一篇    下一篇

海马齿Spmet基因表达产物的亚细胞定位

申龙斌 李瑞梅 段瑞军 符少萍 郭建春   

  • 收稿日期:2012-02-23 修回日期:2012-05-11 出版日期:2012-09-25 发布日期:2012-09-25
  • 基金资助:

    中央级公益性科研院所基本科研项目

Sub-Cellular Localization and Expression Analysis of Sesuvium portulacastrum Genes Spmet

  • Received:2012-02-23 Revised:2012-05-11 Online:2012-09-25 Published:2012-09-25

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摘要：

为研究从海马齿(Sesuvium portulacastrumand L.)中克隆的Spmet基因在植株体内亚细胞水平上的分布情况及组织表达的特异性，将Spmet基因的编码区定向克隆至植物表达载体pCAMBIA-1304上，使其与mgfp（绿色荧光蛋白）基因融合，构建Spmet基因植物瞬时表达载体，使用基因枪法将该表达载体导入洋葱表皮细胞，通过荧光激发，在荧光显微镜下观察洋葱表皮细胞中的绿色荧光部位，确定其在细胞中的表达部位。同时利用半定量PCR的方法对其在根、茎、叶中的表达特性进行分析。结果表明，该基因在海马齿植物的根、茎、叶中均有表达，表达量为叶>茎>根，融合蛋白主要分布在洋葱表皮细胞的细胞核上，细胞膜上也有微量表达。说明海马齿2型金属硫蛋白基因在海马齿植物中属于组成型表达，同时是一个核表达的基因，该结果为进一步研究Spmet基因在抗重金属方面发挥的作用打下了基础。

关键词: 基因型差异, 基因型差异

Abstract:

为研究从海马齿(Sesuvium portulacastrumand L.)中克隆的Spmet基因在植株体内亚细胞水平上的分布情况及组织表达的特异性，将Spmet基因的编码区定向克隆至植物表达载体pCAMBIA-1304上，使其与mgfp（绿色荧光蛋白）基因融合，构建Spmet基因植物瞬时表达载体，使用基因枪法将该表达载体导入洋葱表皮细胞，通过荧光激发，在荧光显微镜下观察洋葱表皮细胞中的绿色荧光部位，确定其在细胞中的表达部位。同时利用半定量PCR的方法对其在根、茎、叶中的表达特性进行分析。结果表明，该基因在海马齿植物的根、茎、叶中均有表达，表达量为叶>茎>根，融合蛋白主要分布在洋葱表皮细胞的细胞核上，细胞膜上也有微量表达。说明海马齿2型金属硫蛋白基因在海马齿植物中属于组成型表达，同时是一个核表达的基因，该结果为进一步研究Spmet基因在抗重金属方面发挥的作用打下了基础。