FSH对性成熟后公鸡睾丸中NGF及其受体TrkA表达的影响

doi:10.11924/j.issn.1000-6850.casb2020-0258

中国农学通报 ›› 2020, Vol. 36 ›› Issue (36): 118-124.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb2020-0258

所属专题：畜牧兽医

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FSH对性成熟后公鸡睾丸中NGF及其受体TrkA表达的影响

王金凤(), 鲁怡, 戴天殊, 张洁慧, 王烁, 邹爽, 马巍, 王春强()

锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁锦州 121000

收稿日期:2020-07-06 修回日期:2020-08-06 出版日期:2020-12-25 发布日期:2020-12-23
通讯作者: 王春强
作者简介:王金凤,女,1996年出生,辽宁铁岭人,硕士研究生,研究方向：动物营养、动物繁殖。通信地址：121000 辽宁锦州锦州医科大学畜牧兽医学院,E-mail： 2292274765@qq.com。
基金资助:
国家自然科学基金项目“NGF活化转录因子CREB促进绒山羊次级毛囊外根鞘细胞增殖”(31601914);国家大学生创新创业训练计划项目“NGF-FSH协同调节ABP表达对睾丸支持细胞的作用的初步研究”(201910160012)

Effect of FSH on the Expression of NGF and Its Receptor TrkA in the Testicles of Males After Sexual Maturity

Wang Jinfeng(), Lu Yi, Dai Tianshu, Zhang Jiehui, Wang Shuo, Zou Shuang, Ma Wei, Wang Chunqiang()

College of Animal Science and Veterinary Medicine, Jinzhou Medical University, Jinzhou Liaoning 121000

Received:2020-07-06 Revised:2020-08-06 Online:2020-12-25 Published:2020-12-23
Contact: Wang Chunqiang

摘要/Abstract

摘要：

本试验通过对性成熟公鸡睾丸组织中神经生长因子(nerve growth factor, NGF)及其受体酪氨酸激酶(tyrosine kinase, TrkA)的表达定位,研究促卵泡素(FSH)对睾丸中NGF及TrkA mRNA表达的影响。选用28只20周龄的庄河大骨鸡公鸡,随机分为4组,分别是对照组和3个FSH处理组。处理组连续静脉注射FSH5天,第6天采集睾丸组织。结果显示：公鸡睾丸组织中存在NGF和TrkA的mRNA及蛋白,且二者主要表达于精原细胞、精母细胞和精子细胞;FSH处理组的TrkA mRNA水平显著高于对照组(P<0.05),且TrkA mRNA的表达水平随着FSH浓度的增加而增加,但NGF mRNA的表达水平无显著性差异(P>0.05)。总之,以上研究结果表明公鸡睾丸组织中存在NGF和TrkA,且FSH可能通过调节TrkA的表达影响NGF在精子生成过程中的作用。

关键词: 促卵泡素, 公鸡睾丸, 神经生长因子, 酪氨酸激酶受体A

Abstract:

In this experiment, we studied the expression of nerve growth factor (NGF) and its receptor tyrosine kinase (TrkA) in the testis of sexually mature roosters, and the influence of FSH in the testis on TrkA mRNA expression. Twenty-eight Zhuanghe Big Bone Chicken roosters aged twenty weeks were selected and randomly divided into 4 groups, namely the control group and three FSH treatment groups. In the treatment group, FSH was intravenously injected for five days, and testicular tissue was collected on the sixth day. The results showed that there were NGF and TrkA mRNA and protein in rooster testis tissue, and both of them were mainly expressed in spermatogonia, spermatocytes and sperm cells; TrkA mRNA levels in the FSH treatment group were significantly higher than those in the control group (P<0.05), and the expression level of TrkA mRNA increased with the increase of FSH concentration, but there was no significant difference in the expression level of NGF mRNA (P>0.05). In summary, the above results indicate that there are NGF and TrkA in rooster testis tissue, and FSH may affect the role of NGF in sperm production by regulating the expression of TrkA.

Key words: follicle stimulating hormone, cock testicle, nerve growth factor, tyrosine kinase receptor A

中图分类号:

S831.2

王金凤, 鲁怡, 戴天殊, 张洁慧, 王烁, 邹爽, 马巍, 王春强. FSH对性成熟后公鸡睾丸中NGF及其受体TrkA表达的影响[J]. 中国农学通报, 2020, 36(36): 118-124.

Wang Jinfeng, Lu Yi, Dai Tianshu, Zhang Jiehui, Wang Shuo, Zou Shuang, Ma Wei, Wang Chunqiang. Effect of FSH on the Expression of NGF and Its Receptor TrkA in the Testicles of Males After Sexual Maturity[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2020, 36(36): 118-124.

图/表 5

基因	引物	引物序列(5＇-3＇)	扩增长度/bp	参考
NGF	Forward	AGAGTAACGGACAGCACATT	146	NM_001293108
NGF	Reverse	CAGGACCCGAGAAGACC	146	NM_001293108
TrkA	Forward	CGTGTCCCTCCGAGGTGTATG	226	NM_205378
TrkA	Reverse	AGCGTCAGGGCATCAGTCC	226	NM_205378
Beta-actin	Forward	CTGTGCCCATCTATGAAGGCTA	139	NM_205518
Beta-actin	Reverse	ATTTCTCTCTCGGCTGTGGTG	139	NM_205518

表1. 试验所用引物序列

图1. RT-PCR检测公鸡睾丸中NGF (B), TrkA (A) and beta-actin (C) mRNA表达 A公鸡睾丸中TrkA mRNA;B公鸡睾丸中NGF mRNA;C为β-actin的mRNA;M为 DL2000标记;N为阴性对照

图2. NGF和TrkA蛋白水平的western印迹分析

图3. NGF和TrkA在公鸡睾丸中的免疫组织化学定位阳性染色显示为棕色。放大倍数40倍。Sc：支持细胞;L：间质细胞;Sg：精原细胞;Sp：精母细胞;Sd：精子细胞;S：精子

图4. 实时PCR分析外源性FSH对公鸡睾丸中NGF和TrkA mRNA水平影响

参考文献 35

[1]	丁允闽, 叶世隽. 大鼠支持细胞生后发育过程中卵泡刺激素受体mRNA水平的动态观察[J]. 中国医学科学院学报, 1996,18(2):99-103.
[2]	江黎明. 神经生长因子的神经营养作用[J]. 广东医学院学报:自然科学版, 1995,13(2):113-118.
[3]	梁鸿雁, 周虚, 李纯锦, 等. 成年公猪睾丸及附睾中促卵泡素受体mRNA的表达[J]. 中国畜牧兽医, 2008,35(12):47-52.
[4]	梁鸿雁, 周虚, 李纯锦, 等. 促卵泡素受体和促黄体素受体在猪子宫中的定位研究[J]. 中国畜牧兽医, 2009(4):125-128.
[5]	王旭川, 籍晓敏. 不同浓度的FSH对猪卵巢卵泡颗粒细胞体外培养的影响[J]. 农业技术与装备, 2015(6):78-80.
[6]	赖露菊, 梁浩勤, 邓盈盈, 等. 促卵泡激素受体结合抑制剂抑制小鼠卵巢发育[J]. 基础医学与临床, 2019,39(3):309-313.
[7]	陈杰, 王燕蓉, 常青, 等. 促卵泡刺激素对小鼠卵巢玻璃化冻存的抗凋亡作用[J]. 中国应用生理学杂志, 2018(6):540-542.
[8]	何晶, 耿仁德, 计红, 等. 海兰褐蛋鸡卵巢与输卵管FSHR及LHR基因定量的研究[J]. 黑龙江八一农垦大学学报, 2015,27(2):27-31.
[9]	慈光新, 葛楚天, 金艳梅, 等. 促卵泡素对鸡等级前卵泡细胞发育的影响[J]. 中国畜牧杂志, 2009(9):13-16.
[10]	俞诗源, 刘忠虎, 王子仁. 神经生长因子[J]. 西北师范大学学报:自然科学版, 2002,38(3):106-111.
[11]	付璐璐, 郑连文, 徐耀宏, 等. 神经生长因子对小鼠睾丸支持细胞生理状态影响初探[J]. 中国实验诊断学, 2014,18(3):374-376.
[12]	咸华, 丁斐, 张锡庆. 生后发育过程中睾丸神经生长因子基因的表达[J]. 神经解剖学杂志, 2002,18(4):311-314.
[13]	李丽芳, 张映, 郝玉娟, 等. 神经生长因子在雄鸡睾丸组织中的定量表达[J]. 激光生物学报, 2012,21(6):517-522.
[14]	李丽芳, 贾球锋, 乔琳, 等. NGF及其受体在雄鸡睾丸组织中的定位及表达[J]. 山西农业科学, 2018,46(10):1718-1721.
[15]	Li C, Zhou X. Gene transcripts in spermatozoa:markers of male infertility[J]. Clin.Chim.Acta, 2012,413:1035-1038.
[16]	Fok K L, Chen H, Ruan Y C, et al. Novel regulators of spermatogenesis[J]. Semin.Cell Dev.Biol., 2014,29:31-42.
[17]	李犇, 李秀雯, 宋默识, 等. 神经生长因子及其受体在雌性哺乳动物生殖系统中的作用[J]. 科技资讯, 2009(3):9-10.
[18]	卜舒扬, 杨建成, 闪爱婷, 等. 神经生长因子及其受体在雌性动物生殖器官中的表达[J]. 动物医学进展, 2016,37(006):113-115.
[19]	朱晓玲, 李成娇, 侯晓峰, 等. 神经生长因子NGF及其受体TrkA在雌性水牛生殖器官的表达定位[J]. 吉林农业大学学报, 2011(03):83-86.
[20]	马永和, 孙永峰, 李纯锦, 等. 神经生长因子受体TrkA在母牛性腺及性腺外生殖器官中的表达研究[J]. 吉林农业大学学报, 2010(03):330-334.
[21]	乔琳, 范瑞文, 李桂兰, 等. 神经生长因子及其受体在雄鸡睾丸中的定位及表达研究[J]. 畜牧与兽医, 2012,44(S1):225.
[22]	汪克建. NGF及NGFR对雄性生殖系统的作用[J]. 现代医药卫生, 2002(08):21-22.
[23]	韩永利, 张建海. 氟对雄性大鼠附睾组织形态学的影响[J]. 山西农业科学, 2017,45(5):743-745.
[24]	Li C, Zhou X. The potential roles of neurotrophins in male reproduction[J]. Reproduction, 2013,145:R89-R95. doi: 10.1530/REP-12-0466 URL
[25]	吴建云, 王鲜忠, 王剑等. 神经生长因子在大鼠睾丸中的表达研究[J]. 核农学报, 2007,21(4):421-423.
[26]	Russo, Giustizierla, Favalea, et al. Spatiotemporal patterns of expression of neurotrophins and neurotrophin receptors in mice suggest functional roles in testicular and epididymal morphogenesis[J]. Biology of Reproduction. 1999,61(4):1123-1132. doi: 10.1095/biolreprod61.4.1123 URL pmid: 10491653
[27]	Li C, Watanaee G, Weng Q, et al. Expression of nerve growth factor(NGF), and its receptors trkA and p75 in the reproductive or gans of the adult male rats[J]. Zoolog Sci, 2005,22(8):933-937. doi: 10.2108/zsj.22.933 URL pmid: 16141707
[28]	Cupp A S, Kimg H. Expression and action of Neurotropin-3 and nerve growth factor in embryonic and early postnatal rat testis development[J]. Biol Reprod, 2000,63(6):1617-1628. doi: 10.1095/biolreprod63.6.1617 URL pmid: 11090428
[29]	李四通, 陈玲丽, 安东, 等. NGF mRNA在来航鸡体内主要器官中的表达[J]. 黑龙江畜牧兽医, 2015,000(007):27-30.
[30]	瞿长伟, 普少瑕, 李春梅. 神经生长因子及其受体在蛋鸡卵巢上的表达[J]. 南京农业大学学报, 2014,37(2):121-126.
[31]	陈玲丽. NGF在鸡体内的分布及EDS-76病毒感染对其表达的影响[D]. 新乡:河南科技学院, 2014.
[32]	Levanti M B, Germana A, Carlos F, et al. Effects of increased nerve growth factor plasma levels on the expression of TrkAand p75 in rat testicles[J]. Anat, 2006,208, 373-379. doi: 10.1111/joa.2006.208.issue-3 URL
[33]	Li C, Ma Y, Yi K, et al. The interactions between nerve growth factor and gonadotrophins in bovine oviduct[J]. Anim,Reprod.Sci, 2014,149:117-123.
[34]	刘璐璐, 隋玉健, 朱海洋, 等. 神经生长因子mRNA在鹅等级前卵泡中的表达[J]. 吉林农业大学学报, 2016,38(01):87-91.
[35]	Vizcarra J A, Kirby J D, Kreider D L. Testis development and gonadotropin secretion in broiler breeder males[J]. Poult.Sci, 2010,89:28-334.

FSH对性成熟后公鸡睾丸中NGF及其受体TrkA表达的影响

Effect of FSH on the Expression of NGF and Its Receptor TrkA in the Testicles of Males After Sexual Maturity

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