中国农学通报 ›› 2012, Vol. 28 ›› Issue (12): 93-98.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.2011-3605
所属专题: 生物技术
宋美娜 仝其根
摘要:
为解决现行溶壁微球菌(比浊)法测定溶菌酶活性方法中存在的测定条件不统一、重复性不高等问题。本研究对该方法中4个主要影响因素——溶菌酶活性范围、底物悬浮液吸光度值范围、检测温度和菌体制备方法进行了研究,以得到最佳的检测条件及菌体制备方法。结果表明:(1)溶菌酶活性75~250 U/mL之间,底物悬浮液吸光度值0.45~0.77 (OD450)之间,酶活力曲线具有良好的线性关系,与国家药典中基本一致;(2)检测温度25~50℃之间,底物悬浮液的吸光度变化值△OD450随温度升高而增大,适当提高检测温度可提高检测的精度,有待进一步研究;(3)用于大规模样品检测时,冷冻菌体法为制备底物悬浮液的最佳方法,检测具有良好的线性关系、管间重复性及储存稳定性。
中图分类号: