摘要: 将血清10型APP接种于含0.02%NAD、5%犊牛血清、1mM CaCl2的LB液体培养基中培养,经硫酸铵盐析、葡聚糖凝胶分子筛层析,从培养的上清液中分离纯化ApxⅠ。将分离纯化的ApxⅠ进行半数致死量的测定,同时对小鼠剖解后进行病理变化观察,之后将纯化的ApxⅠ与弗氏佐剂按1:1的比例混合制备亚单位油乳剂苗,免疫小鼠,初免2周后加强免疫1次,二免2周后用血清10型APP攻毒,测定最佳免疫剂量。根据最佳免疫剂量在30日龄和45日龄免疫小鼠,60日龄时分别用血清1、3、5、7型APP攻毒,进行ApxⅠ亚单位疫苗免疫效果的检测。结果该毒素对小鼠的LD50为80.9mg/kg,LD50的95%平均可信限为63.2 mg/kg~103.5mg/kg;ApxⅠ亚单位疫苗的最佳免疫剂量为40μg/mL,并且对血清1、3、5、7型的APP感染具有一定的保护效果。