菲牛蛭抗凝血活性物质提取方法研究

doi:10.11924/j.issn.1000-6850.casb15010183

中国农学通报 ›› 2015, Vol. 31 ›› Issue (20): 51-54.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb15010183

菲牛蛭抗凝血活性物质提取方法研究

汪波,杨思毅,周子华,陈鑫,颜亨梅

(北京师范大学珠海分校,广东珠海 519087）

收稿日期:2015-01-26 修回日期:2015-05-03 接受日期:2015-05-05 出版日期:2015-07-28 发布日期:2015-07-28
通讯作者: 汪波
基金资助:
广东省大学生创新训练项目“水蛭抗凝血活性物质提取方法研究”(201413177029)。

Optimization of Anticoagulant Substance Extraction Methods of Poecilobdella manillensis

Wang Bo, Yang Siyi, Zhou Zihua, Chen Xin, Yan Hengmei

(Beijing Normal University, Zhuhai Campus, Zhuhai Guangdong 519087)

Received:2015-01-26 Revised:2015-05-03 Accepted:2015-05-05 Online:2015-07-28 Published:2015-07-28

摘要/Abstract

摘要： 为对菲牛蛭抗凝血活性物质的提取进行优化，通过采取不同方法对菲牛蛭活体（6种）、干体（6种）及唾液腺分泌物（3种）进行提取得出最适提取方法。结果表明对于菲牛蛭活体和干体均是采取80%预冷丙酮提取得到的抗凝血物质含量高，最高分别达至(61.20±1.13) AT-U/g和(89.19±1.13) AT-U/g；对于菲牛蛭唾液腺分泌物则是采取10%的三氯乙酸提取得到的抗凝血物质含量高，最高达(24.41± 0.98) AT-U/g。研究结果得出了适合菲牛蛭活体、干体和唾液腺分泌物中提取抗凝血活性物质的最适方法，有利于推动水蛭素的大规模生产和广泛的临床应用。

关键词: 石斛, 石斛, ISSR标记, 建立与优化

Abstract: In order to select the optimal extraction method of anticoagulant substance of Poecilobdella manillensis, 12 kinds of extraction methods were used to extract anticoagulant substance from living (6 kinds) and dry (6 kinds) body of P. manillensis, respectively, and three kinds of extraction methods were used to extract anticoagulant substance from salivary gland secretions of P. manillensis. The results showed that 80% pre-cooled acetone were the best for extracting anticoagulant substance from living and dry body of P. manillensis, and the amount of extraction was up to (61.20±1.13) AT-U/g and (89.19±1.13) AT-U/g, respectively. As to salivary gland secretions of P. manillensis, the amount of anti-coagulant substance was up to (24.41±0.98) AT-U/g using 10% trichloroacetic acid. The research provided optimal extraction method, which was simple and practicable, of anticoagulant substance from living and dry body and salivary gland secretions of P. manillensis, and would contribute to large-scale production of hirudin.

汪波,杨思毅,周子华,陈鑫,颜亨梅. 菲牛蛭抗凝血活性物质提取方法研究[J]. 中国农学通报, 2015, 31(20): 51-54.

Wang Bo,Yang Siyi,Zhou Zihua,Chen Xin and Yan Hengmei. Optimization of Anticoagulant Substance Extraction Methods of Poecilobdella manillensis[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2015, 31(20): 51-54.

参考文献

[1] Marciniak E. Coagulation inhibit or elicited by thrombi[J]. Science,1970,170(956):452-453.
[2] Chang J Y. The functional domain of hirudin, a thrombin-specific inhibit[J]. FEBS Letters,1983,164(2):307-313.
[3] Leadley R J, Bostwick J S, Bostwick J S, et al. Comparison of enoxaparin, hirulog, and heparin as adjunctive anti thrombotic therapy during thrombolysis with rtPA in the stenosed canine coronary artery[J]. Thromb Haemost,1997,78(4):1278-1285.
[4] Markwardt F. Hirudin as an inhibitor of thrombin[J]. Methods Enzymol,1970(19):924-932.
[5] 张汉贞,聂诗明,张丽萍,等.不同食性的水蛭抗凝血酶活性的比较[J].中药材,1998,21(12):599-600.
[6] 汪文茉,张秋海,欧兴长,等.水蛭头、尾抗凝活性的比较及晾干后对活性的影响[J].中国中药杂志,1998,23(3):176.
[7] 吴志军,张灵霞,于立华.四种不同品种水蛭生物活性的研究与比较[J].中成药,2006,28(2):232-234.
[8] 李濯冰,张玉杰,赵韶华,等.水蛭不同提取工艺抗凝血活性比较及酶提物组成分析[A].全国中药创新与研究论坛论文集[C].2009:157-162.
[9] 李宝红,邓妙丽,程怡,等.宽体金线蛭不同工艺提取物抗凝血活性的比较[J].中国医药导报,2012,9(12):140-141.
[10] 汪蜜,刘义梅,陈科力.水蛭抗凝血活性物质提取工艺研究概况[J].亚太传统医药,2013,9(3):56-58.
[11] 陈华友,邢自力,李媛媛,等.凝血酶滴定法测定水蛭素活性的改进[J].生物技术,2002,12(6):24-25.
[12] 朱深银,周远大.新的抗凝抗栓剂—水蛭素[J].中国处方药,2003(3):80.
[13] 张维强,朴钟泽,张旭,等.尖细金线蛭蛋白水解酶抑制剂的分离纯化[J].西北农业学报,1998,7(2):91-93.
[14] 谢阳姣,谢冬养,何志鹏,等.油茶籽饼多酚丙酮提取工艺研究[J].南方农业学报,2012,43(3):376-379.
[15] 杨潼,李建秋,尹平.我国产日本医蛭水蛭素的分离和纯化[J].水生生物学报,1997,21(2):169-173.
[16] 王德斌,徐幼虹,杨黎江,等.四种蛭体内抗凝血活性物含量的比较研究初探[J].昆明师范高等专科学校学报,1999,21(4):52-53.
[17] 胡艳妮.杨桃果实多酚氧化酶的研究[D].广西:广西大学,2008.
[18] 谭雯文,刘亭君.丙酮提取菠萝皮抑菌物的条件研究[J].化工技术与开发,2014,43(11):4-7.
[19] 黄仁槐,舒芹,梁宋平.抗凝血药物水蛭素的纯化与鉴定[J].湖南师范大学自然科学学报,1998,21(1):56-59.
[20] 余兰,于香安.三氯乙酸沉淀法结合双缩脲比色法测定水蛭提取液中总蛋白含量[J].中国药物与临床,2004,4(9):685-686.

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Optimization of Anticoagulant Substance Extraction Methods of Poecilobdella manillensis

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[1]	陈慧玲, 张新叶, 彭婵, 刘宗坤, 庞宏东, 刘炼, 杨彦伶. 13个药用石斛种质生物学特性比较研究[J]. 中国农学通报, 2022, 38(3): 94-101.
[2]	彭婵, 张新叶, 刘宗坤, 马林江, 陈慧玲. 石斛属植物SSR分子标记的研究进展[J]. 中国农学通报, 2022, 38(13): 36-40.
[3]	曹桦, 许凤, 陆琳, 姬语潞, 陈翔, 张宝琼, 李涵. 4种香花型石斛花朵挥发性成分GC-MS分析[J]. 中国农学通报, 2021, 37(13): 56-62.
[4]	洪克前, 夏维丽, 李佩玲, 徐函兵, 谷会, 陈丽. 霍山石斛叶转录组中SSR位点信息分析[J]. 中国农学通报, 2020, 36(27): 106-110.
[5]	黄颖颖,黄燕翔,王红梅,吴志锋,陈金英. 铁皮石斛栽培基质及有机液肥的创制应用[J]. 中国农学通报, 2019, 35(2): 74-78.
[6]	张爱丽,何苗,黄衡宇,王元忠,李继祥. 以核桃壳为主要基质的铁皮石斛栽培研究[J]. 中国农学通报, 2018, 34(26): 76-82.
[7]	张东雪,廖易,陆顺教,李崇晖,杨光穗,尹俊梅. 石斛兰花期调控研究进展[J]. 中国农学通报, 2017, 33(1): 72-77.
[8]	任羽,潘丙成,陆顺教,张志群,孔霞. 60Co-γ辐射石斛兰组培苗的SRAP分析[J]. 中国农学通报, 2016, 32(31): 85-89.
[9]	李杰,王再花. 人工栽培铁皮石斛与其相似种的SRAP分子标记分析[J]. 中国农学通报, 2016, 32(25): 79-83.
[10]	朱庆竖,陈勇,余花,朱碧岩. 铁皮石斛组织培养及快繁技术研究[J]. 中国农学通报, 2015, 31(31): 19-24.
[11]	王再花,李杰,章金辉,朱根发,梁翠玲,叶庆生. 石斛属植物多糖与生物碱含量的比较研究[J]. 中国农学通报, 2015, 31(24): 242-246.
[12]	崔波,蒋素华,王洁琼,康莹莹,梁芳. 鼓槌石斛组织培养及快繁技术研究[J]. 中国农学通报, 2015, 31(19): 111-116.
[13]	陈庆飞,石岩,刘玉学,吕豪豪,张俊林,王耀锋,杨生茂. 生物炭替代泥炭栽培基质对铁皮石斛生长的影响[J]. 中国农学通报, 2015, 31(13): 30-35.
[14]	肖强,杨丛,张峥,周大寨. 不同仿生态栽培方式对铁皮石斛多糖积累影响[J]. 中国农学通报, 2015, 31(10): 142-147.
[15]	程华,李志,李琳玲,陈小玲,程水源. 罗田迟熟板栗品种ISSR遗传分析[J]. 中国农学通报, 2015, 31(1): 110-115.