獐茅AlHAK1 Real-time PCR定量方法的建立

中国农学通报 ›› 2009, Vol. 25 ›› Issue (12): 20-24.

獐茅AlHAK1 Real-time PCR定量方法的建立

王兰,苏乔

收稿日期:2009-02-20 修回日期:2009-03-22 出版日期:2009-06-20 发布日期:2009-06-20

Establishment of real-time PCR assay for quantitative analysis of AlHAK1

Wang Lan, Su Qiao

Received:2009-02-20 Revised:2009-03-22 Online:2009-06-20 Published:2009-06-20

摘要/Abstract

摘要： 本研究以β-actin为内参基因，根据本实验室克隆的AlHAK1及β-actin 碱基序列，分别设计了实时定量特异性引物，优化了反应的退火温度与引物浓度，并以优化的条件建立了相对定量标准曲线，同时对该方法的稳定性进行了评价。结果表明AlHAK1及β-actin基因的real-time PCR扩增效率分别为1.09和1.04，线性相关系数分别为0.996和0.997，批内及批间变异系数< 5 %。所建立的AlHAK1 real-time PCR定量方法操作简便、定量准确、重复性好，为进一步探索AlHAK1的功能、mRNA表达水平的变化及转AlHAK1农作物的检测奠定了方法学基础。

关键词: 甘薯, 甘薯, 花青素, 提取剂, 含量, 品种

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