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中国农学通报 ›› 2014, Vol. 30 ›› Issue (29): 15-21.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.2014-0271

所属专题： 生物技术； 畜牧兽医

• 畜牧 动物医学 蚕 蜂 • 上一篇    下一篇

猪源绿色气球菌的分离鉴定及16S rRNA基因序列测定与遗传进化分析

张乐宜,李艳,蔡汝健,刘燕玲,蒋智勇,宋长绪   

  1. 广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室,广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室,广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室,广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室,广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室
  • 收稿日期:2014-01-26 修回日期:2014-01-26 接受日期:2014-05-16 出版日期:2014-10-31 发布日期:2014-10-31
  • 通讯作者: 张乐宜
  • 基金资助:
    广东省科技厅项目“广东省主要猪重大疫病综合防控关键技术集成研究”(2012A020200014)；广州市科技计划项目“猪群中葡萄球菌及其毒素的调查及其对养猪生产和猪肉食品安全影响的评估和研究”(12C14071615)；广东省重点实验室建设支撑项目：畜禽疫病检测、诊断与新型疫苗关键技术创新”(2012A061100006)；广东省生猪产业体系项目“广东现代农业产业体系建设专项—生猪创新团队首席（岗位）专家及综合示范与培训站长建设任务”（粤农2009-380）；广东省农业科学院院长基金项目“猪葡萄球菌表皮脱落毒素ExhA蛋白对BALB/c小鼠免疫功能的影响”(201313)。

Isolation and Identification of Aerococcus viridans from Swine andPhylogenetic Analysis of 16S rRNA Gene Sequence

  • Received:2014-01-26 Revised:2014-01-26 Accepted:2014-05-16 Online:2014-10-31 Published:2014-10-31

摘要： 为研究引起广东部分地区猪场仔猪发生急性死亡的致病菌及其系统发育地位，本研究从广东英德、惠州龙门、翁源、汕头等地区猪场急性死亡病仔猪中分离到6 株呈α溶血的细菌。通过细菌形态学观察、生化特性鉴定、药敏试验、致病性试验以及16S rRNA 基因的序列分析，确定为猪源绿色气球菌，分别命名为HD、WY、ZQ、LM、YD 和ST。动物感染试验表明：6 株分离菌株均具有不同程度的致病性；药敏结果显示：6 株分离株均对头孢曲松、头孢唑啉、恩诺沙星、阿莫西林高度敏感，对新生霉素、利福平、阿米卡星、庆大霉素、多粘菌素B中度敏感，对其他抗生素均耐药；同源性及遗传进化分析结果显示：6 株分离株与12 株国内外参考菌株核苷酸同源性在93%以上，其中与澳大利亚分离自犬的15MS株同源性最高，为98.1%，与广西分离自猪的GXBL-1 株同源性最低，为83.6%；6 株分离株与广东分离株和澳大利亚分离株亲缘关系最近，暗示进化不存在明显的地域相关性。本研究确定了广东部分地区引起规模化猪场仔猪发生急性死亡的病原菌，为该菌引起的疾病的防治提供了依据。

关键词: 小波分析, 小波分析

Abstract: In order to investigate the pathogen of acute death occurred of piglets from pig farms in Guangdong province and the phylogenetic position, six strains of alpha hemolytic bacteria were isolated from sick piglets with acute death in pig-rearing farm in Yingde, Longmen, Wongyuan, Shantou regions of Guangdong province. Morphological observation, biochemical identification, drug sensitive test, pathogenicity test and sequence analysis of 16S rRNA genes confirmed the six stains of alpha hemolytic bacteria as porcine green gas aureus, designated HD, WY, ZQ, LM, YD and ST, independently. Pathogenicity test showed that, the six isolates had different degree of pathogenicity. The results of drug sensitive test indicated that, the six isolates were highly sensitive to ceftriaxone, cefazolin, enrofloxacin and amoxicillin, moderate sensitive to novobiocin, rifampin, amikacin gentamicin and polymyxin B, resistant to other antibiotics. Homologic and phylogenetic analyses indicated that, the six isolates shared identity above 93% with 12 reference strains at the nucleotide level, with the highest identity 98.1% to strain 15MS from dog in Australia, and the lowest identity 83.6% to strain GXBL- 1 from pig in Guangxi; The six isolates clustered with strains from Guangdong and Australia, suggesting that evolution did not exist obvious regional correlation. This study confirmed the pathogenic bacteria causing acute death of piglets in large scale pig farm, and provided the basis for prevention and cure of disease caused by the bacteria.