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中国农学通报 ›› 2012, Vol. 28 ›› Issue (31): 153-156.

所属专题： 生物技术； 园艺

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叶用莴苣幼苗幼叶总蛋白SDS-PAGE和Western-blot方法的优化

李洋 韩莹琰 范双喜 陈曙红   

  • 收稿日期:2012-01-17 修回日期:2012-03-06 出版日期:2012-11-05 发布日期:2012-11-05
  • 基金资助:

    北京市自然科学基金项目-北京市教育委员会科技计划重点项目;北京市自然科学基金项目;北京市科技新星计划项目;北京市属高等学校人才强教计划资助项目

Optimization of SDS-PAGE and Western-blot for Total Protein in Seedling Young Leaves of Lactuca sative L.

  • Received:2012-01-17 Revised:2012-03-06 Online:2012-11-05 Published:2012-11-05

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摘要：

为建立一套适合叶用莴苣(Lactuca sative L.)热激蛋白研究的SDS-PAGE和Western-blot方法。以叶用莴苣W7为材料，采用改进的TCA/Acetone法提取叶片蛋白，比较了两种电压下SDS凝胶分离蛋白质的效果，使用4℃保存两周的抗体稀释液并且得到了较清晰的热激蛋白70和内参蛋白Rubisco条带，初步确定了叶用莴苣叶片热激蛋白的western-blot实验条件。

关键词: QTL, QTL

Abstract:

In order to establish a method SDS-PAGE and Western-blot suitable for heat shock protein study of Lactuca sative L., with leaves of Lactuca sative L. (W7) as material, we used improved TCA/Acetone method extracted leaf protein, compared protein separating effect in SDS gel in two different volt, obtained clear bands of HSP70 and rubisco using anti-body diluent stored 2 weeks at 4℃, optimized and preliminary established Western-blot experiment condition of heat shock protein of Lactuca sative L. young leaves.