ProDH基因反义表达载体的遗传转化

doi:10.11924/j.issn.1000-6850.casb15050016

中国农学通报 ›› 2015, Vol. 31 ›› Issue (26): 78-83.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb15050016

所属专题：生物技术

ProDH基因反义表达载体的遗传转化

赵敬一,罗丹,张喜春

北京农学院植物科学技术学院,北京 102206

收稿日期:2015-05-05 修回日期:2015-06-16 接受日期:2015-06-25 出版日期:2015-09-23 发布日期:2015-09-23
通讯作者: 张喜春
基金资助:
科技部“中俄主要蔬菜基因资源多样化比较研究”(2011DFR31180-3)。

Genetic Transformation of ProDH Antisense Gene Expression Vector

Zhao Jingyi, Luo Dan, Zhang Xichun

(College of Plant Science and Technology, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206)

Received:2015-05-05 Revised:2015-06-16 Accepted:2015-06-25 Online:2015-09-23 Published:2015-09-23

摘要/Abstract

摘要： 利用农杆菌介导的叶盘法将ProDH基因反义表达载体分别导入番茄品种‘耐运2000’和烟草中，建立并优化了番茄子叶再生体系。同时采用操作简单、再生周期短、转化效率较高的烟草进行了遗传转化体系的建立。试验获得49个烟草抗性芽和177个番茄抗性芽，用特异性引物对其做PCR扩增验证，共获得9个PCR呈阳性的抗性芽，其中7个烟草抗性芽、2个番茄抗性芽，因此证明外源基因已成功转入番茄的基因组中，为进一步番茄转基因工程的研究奠定基础。

关键词: 铁核桃, 铁核桃, 水分, 干燥, 散失率, 规律

Abstract: Proline dehydrogenase (ProDH) antisense gene expression vectors were imported to ‘Naiyun 2000’ and tobacco by agrobacterium mediated leaf disc method. The tomato leaf regeneration system was established and optimized. Tobacco genetic transformation system was established at the same time which had simple operation, short regeneration cycle and high conversion efficiency. The experiment got 49 tobacco resistant buds and 177 tomato resistant buds. Specific primer PCR amplification was done in the validation, and 9 PCR positive resistant buds were obtained, including 7 tobacco resistant buds and 2 tomato resistant buds. It proved that the exogenous gene was successfully integrated into the genome of tomato. The experiment could lay the foundation for further tomato transgenic engineer.

赵敬一,罗丹,张喜春. ProDH基因反义表达载体的遗传转化[J]. 中国农学通报, 2015, 31(26): 78-83.

Zhao Jingyi,Luo Dan and Zhang Xichun. Genetic Transformation of ProDH Antisense Gene Expression Vector[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2015, 31(26): 78-83.

参考文献

[1] 张春奇,查素娥,李红波.番茄育种研究概况及展望[J].农业科技通讯,2011(3):29-32.
[2] 曹慧颖,夏润玺,吕淑霞,等.提高农杆菌介导番茄遗传转化效率的研究[J].北方园艺,2008(1):178-180.
[3] 焦蓉,刘好宝,刘贯山,等.论脯氨酸累积与植物抗渗透胁迫[J].中国农学通报,2011,27(7):216-221.
[4] 马杰,邱栋梁.番茄组培再生体系优化研究[J].中国农学通报,2011,27(8):185-189.
[5] 任春梅,高必达,张学文,等.细菌几丁质酶基因转化番茄的研究[J].湖南农业大学学报:自然科学版,2002,28(4):298-301.
[6] 王全华,葛晨辉,曹守军,等.番茄组织再生及其遗传转化体系的优化[J].青岛农业大学学报:自然科学版,2007,24(1):24-27.
[7] 陈火英,翁新华.番茄子叶离体培养的植株再生[J].上海蔬菜,1993,(2):22-22.
[8] 彭细桥,戴良英,刘红艳.番茄离体再生体系优化研究[J].湖南农业大学学报:自然科学版,2004,30(6):506-509.
[9] 苏彩霞,霍秀文.番茄子叶、下胚轴植株再生体系的建立[J].内蒙古农业大学学报:自然科学版,2006,27(4):91-95.
[10] 张录霞,郝青南.加工番茄遗传转化再生体系的建立[J].西北农业学报,2008,17(3):236-241.
[11] 张艳芳,霍秀文.番茄遗传转化体系的建立[J].中国农学通报,2008,24(3):58-61.
[12] 于惠敏,石竹,杨俊杰,番茄的不同基因型对组培植株再生能力的影响 [J].山东师范大学学报:自然科学版,2007,22(4):120-121,130.
[13] 姜国勇,金德敏.番茄高效植株再生体系及基因转化体系的建立[J].青岛农业大学学报:自然科学版,1998,15(2):84-88.
[14] 罗素兰,田嘉珺,长孙东亭.番茄高效再生体系的建立[J].海南大学学报:自然科学版,2002,20(4):314-318,323.
[15] 李继平,徐春波,王勇,等.紫花苜蓿转基因技术研究进展[J].安徽农学通报,2008,14(15):51-54.
[16] 王志华,夏英武.水稻农杆菌介导转化关键因子研究进展[J].生物技术,1998,8(3):5-8.
[17] Gelvi N S B. A grobacterium-mediated plant transformation the biology behind the gene- jockeying tool[J].Microbiology and Molecular Biology Reviews,2003,67:16-37.
[18] Hiei Y, Komari T, Kabo T. Transformation of rice mediated by Agrobacterium tumefaciens[J].Plant Mol Biol,1997,35(1-2):205-218.
[19] Ishida Y, Saito H, Ohta S. High efficiency transformation of maize (Zea mays L) mediated by Agrobacterium tumefaciens[J].Nat Biotech,1996,14:745-750.
[20] Tingay S, McElroy D, Kalla R. Agrobacterium tumefaciens mediated barely transformation[J].Plant J,1997,11:1369-1376.
[21] 袁琳,刘红海,王吟,等.纳豆激酶基因导入番茄的研究[J].湖北大学学报:自然科学版,2006,28(2):181-182,186.
[22] 吴纯清,张兴国,梁国鲁,等.拟南芥AtRD29a启动子在烟草中的表达特性[J].西南农业学报,2008,21(4):1045-1047.
[23] 王根平,杜文明,夏兰琴.植物安全转基因技术研究现状与展望[J].中国农业科学,2014,47(5):823-843.
[24] 薛仁镐.农杆菌介导大豆萌动种子遗传转化的影响因素研究[J].安徽农业科学,2008,36(7):2666-2667.
[25] 邓汉超,尹长城,刘国振,等.转基因植物核酸成分检测技术研究进展[J].中国生物工程杂志,2011,31(1):86-95.
[26] 宫雪超,于丽杰,高金秋.转基因植物的检测与鉴定[J].牡丹江师范学院学报:自然科学版,2007,57(1):15-17.
[27] Wanner L A, Li G Q. The phenylalanine ammonia-lyase gene family in Arabidopsis thaliana[J].Plant Mol Bio,1995,27(2):327-338.

ProDH基因反义表达载体的遗传转化

Genetic Transformation of ProDH Antisense Gene Expression Vector

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价

关于本刊

作者中心

审者中心

在线期刊

联系我们

[1]	贾也纯, 陈润仪, 贺泽霖, 倪洪涛. 甜菜抗非生物胁迫研究进展[J]. 中国农学通报, 2022, 38(9): 33-40.
[2]	武志斌, 黄超, 雷媛, 敬峰, 刘战东. 不同产量水平下冬小麦水肥利用特性研究[J]. 中国农学通报, 2022, 38(8): 64-71.
[3]	刘颖, 耿丹丹, 韩永胜, 魏敏, 刘柳. 环保型农林保水剂研制、性能与应用[J]. 中国农学通报, 2022, 38(7): 86-90.
[4]	付焱焱, 李云峰, 韩冬, 马树庆. 吉林省粮食主产区玉米生长季水分盈亏及其对产量的影响[J]. 中国农学通报, 2022, 38(7): 99-105.
[5]	赵越, 张晓艳, 曹焜, 韩承伟, 姜颖, 边境, 王晓楠, 孙宇峰. 工业大麻抗逆生理及分子机制研究进展[J]. 中国农学通报, 2022, 38(6): 102-106.
[6]	邵雪花, 赖多, 肖维强, 贺涵, 刘传和, 匡石滋. 不同干燥方法对番石榴果实品质及抗氧化活性的影响[J]. 中国农学通报, 2022, 38(6): 134-140.
[7]	沈菊, 辛萍萍, 杨起楠, 乌云珠拉. 柴达木盆地东部浅层土壤水分增量对降水的响应[J]. 中国农学通报, 2022, 38(35): 54-61.
[8]	李云峰, 姚志平, 付焱焱, 韩冬, 马树庆. 基于有效雨量亏缺的吉林省玉米各级干旱发生频率地域变化[J]. 中国农学通报, 2022, 38(35): 62-69.
[9]	杨可鑫, 赵鑫, 葛红, 杨树华, 贾瑞冬, 寇亚平. 切花菊营养与肥料高效利用技术研究进展[J]. 中国农学通报, 2022, 38(34): 52-58.
[10]	马艳芝, 齐珂佳, 王向东. 干燥方法对‘墨红’玫瑰品质的影响[J]. 中国农学通报, 2022, 38(31): 142-146.
[11]	宋云连, 罗心平, 章勇, 郑健, 王跃全, 高贤玉, 张惠云. 云南荔枝主要病虫害发生规律[J]. 中国农学通报, 2022, 38(28): 114-122.
[12]	朱文杰, 郑鸣洁, 康瑜国. 不同光照强度对三种藤本植物光合作用的影响[J]. 中国农学通报, 2022, 38(26): 27-31.
[13]	史芮林, 张庆芬, 李铭, 李全起, 张明明. 植物碳同位素分馏在水分利用效率研究中的应用[J]. 中国农学通报, 2022, 38(23): 15-20.
[14]	姚志龙, 韩萍, 王军锋, 王嘉倩. 庆阳苹果树需水规律分析[J]. 中国农学通报, 2022, 38(23): 27-31.
[15]	刘斌, 魏慧, 寇燕燕, 陈年来, 颉建明. 灌溉制度对甜瓜/向日葵间作系统叶片水分状况和水分利用效率的影响[J]. 中国农学通报, 2022, 38(2): 19-25.