菜豆(Phaseolus vulgaris)为重要豆科蔬菜,离体再生困难限制了其遗传转化与分子育种效率。为建立高效、稳定的菜豆离体再生体系,以‘双丰一号’菜豆为材料,以子叶节、下胚轴、真叶、子叶为外植体,采用直接再生(愈伤途径)与间接再生(子叶节直接出芽)2种方式优化植物生长调节剂配比、低温及高渗逆境条件,系统筛选愈伤诱导、胚性愈伤分化、不定芽发生及生根移栽的最佳参数,建立菜豆离体再生体系。结果显示:(1)松散型愈伤诱导最佳外植体为下胚轴、子叶节,最佳培养基为MS+ 1 mg/L 2,4-D,诱导率分别达93.33%、90.00%。(2)菜豆胚性愈伤最佳诱导培养基为MS+ 0.5 mg/L 2,4-D+ 0.25 mg/L 6-BA,4℃低温预处理2~5 d可显著促进胚性化,但未能实现稳定增殖与植株再生。(3)间接再生以子叶节为最佳外植体,最佳诱导培养基为MS+ 2 mg/L 6-BA,不定芽诱导率93.33%,单外植体平均出芽6.45个;TDZ虽诱导率100%,但易产生畸形芽与玻璃化苗。(4)最优生根培养基为1/2 MS+ 1 mg/L IBA,生根率96.67%,炼苗移栽成活率84.16%,再生植株可正常开花结荚。本研究成功建立了‘双丰1号’菜豆高效离体再生体系,可为菜豆离体快繁、种质创新及遗传转化体系构建提供技术支撑,后续可进一步优化胚性愈伤增殖与体胚发生条件,完善全流程再生系统。