本研究旨在建立高效的不同品种花生胚小叶离体再生体系,为花生的遗传改良和生物技术应用提供有力的技术支持。本试验以‘莱阳四粒红’、‘83’(‘云花24号’)2个不同品种的花生胚小叶为外植体,采用组织培养法研究不同植物生长调节剂、开盖炼苗时间等对胚小叶再生体系建立的影响。结果表明:‘莱阳四粒红’胚小叶芽丛诱导最适宜的生长调节剂为3.25 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,芽丛抽芽为1.5 mg/L TDZ+3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L GA3,芽丛伸长为2.0 mg/L TDZ+4.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.5 mg/L GA3,生根培养为2.0 mg/L NAA+0.3 mg/L 2,4-D。‘83’(‘云花24号’)胚小叶芽丛诱导最适宜的生长调节剂为3.25 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,芽丛抽芽为1.5 mg/L TDZ+4.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L GA3,芽丛伸长为2.0 mg/L TDZ+3.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L GA3,生根培养为2.5 mg/L NAA+0.1 mg/L 2,4-D。2个花生品种炼苗移栽最佳开盖时间为7 d,‘莱阳四粒红’、‘83’(‘云花24号’)再生苗坐果率分别为57.63%、48.67%。本研究成功建立‘莱阳四粒红’和‘83’(‘云花24号’)2个花生品种的胚小叶离体再生体系,明确了各阶段关键调控因子与配比,显著提升再生效率与移栽成活率,成果不仅完善了花生组织培养技术体系,更为后续花生遗传改良研究及功能基因挖掘,提供了重要的转基因技术平台支持。