牛抑制素α亚基基因克隆及表达载体的构建

doi:10.11924/j.issn.1000-6850.casb15070057

中国农学通报 ›› 2015, Vol. 31 ›› Issue (35): 8-12.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb15070057

所属专题：生物技术；畜牧兽医

牛抑制素α亚基基因克隆及表达载体的构建

吴迪,邢书涵,齐晓龙,刘云海,郭勇,倪和民

北京农学院动物科学技术学院,北京农学院动物科学技术学院,北京农学院动物科学技术学院,北京农学院动物科学技术学院,北京农学院动物科学技术学院,北京农学院动物科学技术学院

收稿日期:2015-07-09 修回日期:2015-11-17 接受日期:2015-09-25 出版日期:2015-12-18 发布日期:2015-12-18
通讯作者: 倪和民
基金资助:
2013 年度北京市教委北京市属高等学校创新团队建设与教师职业发展计划项目“体细胞转基因克隆肉牛新品系培育与利用”(PXM2013_014207_000067)；2015 年度北京市奶牛产业技术体系北京市创新团队(5075237007/002)；2013 年国家863 科技支撑计划“奶牛养殖业节能减排关键技术研究与示范(2013BAD21B01)。

Cloning and Construction of Expressive Vectors of Bovine Inhibin α Subunit Gene

Received:2015-07-09 Revised:2015-11-17 Accepted:2015-09-25 Online:2015-12-18 Published:2015-12-18

摘要/Abstract

摘要： 为克隆牛抑制素α亚基基因，构建抑制素pET32a-成熟肽表达载体，从河北大厂县屠宰场采集卵巢，提取总RNA并反转录成cDNA，根据GenBank NM_174094.4 设计一对引物扩增出成熟肽cDNA，将所扩增基因插入到pET32a 表达载体BamHⅠ与HindⅢ酶切位点之间，构建重组质粒抑制素pET32a-成熟肽。结果成功构建出抑制素α亚基基因。笔者初步得到了抑制素重组质粒，为今后重组蛋白原核表达的研究奠定了基础。

关键词: 行距, 行距, 冬小麦, 产量, 产量构成

Abstract: The research aimed to clone the bovine inhibin α subunit gene and construct inhibin pET32a-mat peptide expression vector. The bovine ovaries were collected from slaughterhouses of Dachang County in Hebei Province. The total RNA was extracted and reverse transcribed into cDNA. A pair of primers was designed by Primer 5.0 according to the known bovine inhibin α-subunit sequence (Genbank No.NM174094.4). Inhibin α subunit mat peptide gene was amplified by RT- PCR. Finally, cDNA of this matured peptide was further amplified and cloned into the BamH Ⅰ and Hind Ⅲ sites of pET32a expressing vector to generate the recombinant inhibin pET32a-mat peptide plasmid. The results showed that the inhibin α subunit gene was successfully constructed. The authors preliminarily obtained the recombinant plasmid of inhibin and laid foundation for the further study of prokaryotic expression of recombinant proteins.

吴迪,邢书涵,齐晓龙,刘云海,郭勇,倪和民. 牛抑制素α亚基基因克隆及表达载体的构建[J]. 中国农学通报, 2015, 31(35): 8-12.

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牛抑制素α亚基基因克隆及表达载体的构建

Cloning and Construction of Expressive Vectors of Bovine Inhibin α Subunit Gene

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