中国农学通报 ›› 2023, Vol. 39 ›› Issue (2): 107-116.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb2022-0076
所属专题: 水产渔业
李谣1(), 杨智茹1, 程景颢1, 李杰1, 王涛1, 张凯1, 张国松2(), 尹绍武1()
收稿日期:
2022-02-15
修回日期:
2022-09-22
出版日期:
2023-01-15
发布日期:
2023-01-17
作者简介:
李谣,女,1997年出生,四川遂宁人,硕士研究生,主要从事鱼类种质资源与遗传育种研究。通信地址:210023 江苏省南京市学林路2号 南京师范大学海洋科学与工程学院,E-mail:2409509422@qq.com。
基金资助:
LI Yao1(), YANG Zhiru1, CHENG Jinghao1, LI Jie1, WANG Tao1, ZHANG Kai1, ZHANG Guosong2(), YIN Shaowu1()
Received:
2022-02-15
Revised:
2022-09-22
Online:
2023-01-15
Published:
2023-01-17
摘要:
为了研究低氧胁迫(0.8±0.1) mg/L和复氧(7.3±0.5) mg/L对长吻鮠(Leiocassis longirostris)鳃组织氧传感蛋白、呼吸代谢、氧化应激、组织结构和细胞凋亡的影响。本研究对长吻鮠进行了低氧胁迫(0、2、4、6 h)和复氧(2、4、6 h)试验,采用qRT-PCR、酶活性测定、H&E染色和TUNEL切片检测等方法,比较和分析了该鱼鳃组织低氧应答基因、生理生化指标的变化。结果表明:在低氧胁迫下,长吻鮠鳃组织氧传感蛋白相关基因(HIF-1α、HIF-2α、PHDs和Vhl)表达量显著升高,复氧后较对照组仍有显著差异(P<0.05);糖酵解相关酶(PFK、HK和PK)、无氧呼吸酶(LDH)、抗氧化酶(GSH-Px、CAT和SOD)和氧化应激指标(MDA和LPO)活性和含量显著升高,TCA循环相关酶(SDH和MDH)活性显著降低,复氧后多数生理指标均逐渐恢复至对照水平。H&E染色显示低氧胁迫下长吻鮠鳃组织上皮出现了抬升,部分血细胞大量聚集使鳃小片顶端呈棒状,发生线粒体丰富细胞肿胀和增生等变化,在恢复溶氧后低氧引起的这些组织形态变化并未得到改善;TUNEL切片结果显示长吻鮠鳃组织凋亡细胞数量随低氧时间延长不断增加,凋亡相关基因(Bax、Caspase 3、p53和Apaf-1)表达量显著升高,Bcl-2表达量显著降低,恢复溶氧后细胞凋亡现象仍然存在。低氧胁迫和复氧对长吻鮠鳃组织氧传感蛋白、呼吸代谢、氧化应激、组织结构、细胞凋亡等具有明显的影响,该结果为探究鱼类低氧胁迫下分子调控机制奠定一定的理论基础,为今后开展长吻鮠耐低氧新品种选育提供基础资料。
李谣, 杨智茹, 程景颢, 李杰, 王涛, 张凯, 张国松, 尹绍武. 低氧胁迫和复氧对长吻鮠鳃组织低氧应答基因和生理生化指标的影响[J]. 中国农学通报, 2023, 39(2): 107-116.
LI Yao, YANG Zhiru, CHENG Jinghao, LI Jie, WANG Tao, ZHANG Kai, ZHANG Guosong, YIN Shaowu. Effects of Hypoxic Stress and Reoxygenation on Hypoxic Response Genes and Physiological and Biochemical Indexes in the Gill Tissue of Leiocassis longirostris[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2023, 39(2): 107-116.
基因 | 引物 | 引物序列(5’-3’) | 长度/bp |
---|---|---|---|
IF-1α | HIF-1α-F | CTGGAAAGAGGGCTAAGGTG | 20 |
HIF-1α-R | AGTGACGGTCCTGAATAGGG | 20 | |
HIF-2α | HIF-2α-F | AAAAGCCCAGTGGATGAC | 18 |
HIF-2α-R | TGGCGATGTTGCTGAAGT | 18 | |
PHD1 | PHD1-F | AGCAATGGTGGCTTGTTAC | 19 |
PHD1-R | TCAAATAAGGGCTCAATGTC | 20 | |
PHD2 | PHD2-F | AGCCTGGATGTGAGAAGATAGC | 22 |
PHD2-R | CCGTCTCCGTTAGGGTTGT | 19 | |
PHD3 | PHD3-F | CTGTTTGATCGACTCCTGCTT | 21 |
PHD3-R | TGTGGTGCTGCTTTGTGAA | 19 | |
Vhl | Vhl-F | AGACGGATGACCCGATGTTG | 20 |
Vhl-R | GCACACTAGCTTCCTCACCA | 20 | |
Bax | Bax-F | TGACCGTGGCAAAGAGCA | 18 |
Bax-R | GATCCAGGCGGAAATGTG | 18 | |
Caspase 3 | Caspase 3-F | GGGAAACTGGGCTACAAA | 18 |
Caspase 3-R | CTCAGCAACACGCAAACA | 18 | |
Bcl-2 | Bcl-2-F | CGTAGCCTCGCTTCAAAA | 18 |
Bcl-2-R | CGCGTCAGATCAATTCACA | 19 | |
p53 | p53-F | CGTCGTAGCAGTGTCTAAAGT | 21 |
p53-R | GACCCTCTTGTCCATTGTG | 19 | |
Apaf-1 | Apaf-1-F Apaf-1-R | TCGCCTCTGAACCCTGCTC CTGATGGAGTCCACTGGCTGTC | 19 22 |
β-actin | β-actin-F | TGCTGCCTCTTCCTCCTCTC | 20 |
β-actin-R | GGACACCTGAACCTCTCATTGC | 22 |
基因 | 引物 | 引物序列(5’-3’) | 长度/bp |
---|---|---|---|
IF-1α | HIF-1α-F | CTGGAAAGAGGGCTAAGGTG | 20 |
HIF-1α-R | AGTGACGGTCCTGAATAGGG | 20 | |
HIF-2α | HIF-2α-F | AAAAGCCCAGTGGATGAC | 18 |
HIF-2α-R | TGGCGATGTTGCTGAAGT | 18 | |
PHD1 | PHD1-F | AGCAATGGTGGCTTGTTAC | 19 |
PHD1-R | TCAAATAAGGGCTCAATGTC | 20 | |
PHD2 | PHD2-F | AGCCTGGATGTGAGAAGATAGC | 22 |
PHD2-R | CCGTCTCCGTTAGGGTTGT | 19 | |
PHD3 | PHD3-F | CTGTTTGATCGACTCCTGCTT | 21 |
PHD3-R | TGTGGTGCTGCTTTGTGAA | 19 | |
Vhl | Vhl-F | AGACGGATGACCCGATGTTG | 20 |
Vhl-R | GCACACTAGCTTCCTCACCA | 20 | |
Bax | Bax-F | TGACCGTGGCAAAGAGCA | 18 |
Bax-R | GATCCAGGCGGAAATGTG | 18 | |
Caspase 3 | Caspase 3-F | GGGAAACTGGGCTACAAA | 18 |
Caspase 3-R | CTCAGCAACACGCAAACA | 18 | |
Bcl-2 | Bcl-2-F | CGTAGCCTCGCTTCAAAA | 18 |
Bcl-2-R | CGCGTCAGATCAATTCACA | 19 | |
p53 | p53-F | CGTCGTAGCAGTGTCTAAAGT | 21 |
p53-R | GACCCTCTTGTCCATTGTG | 19 | |
Apaf-1 | Apaf-1-F Apaf-1-R | TCGCCTCTGAACCCTGCTC CTGATGGAGTCCACTGGCTGTC | 19 22 |
β-actin | β-actin-F | TGCTGCCTCTTCCTCCTCTC | 20 |
β-actin-R | GGACACCTGAACCTCTCATTGC | 22 |
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