大花绣球‘无尽夏’组培苗叶片再生植株的研究

doi:10.11924/j.issn.1000-6850.casb20190400010

摘要/Abstract

摘要：

为建立大花绣球‘无尽夏’规模化无性繁殖和高效遗传转化体系,以‘无尽夏’组培苗叶片为外植体,研究叶位、暗培养时间及不同激素组合等因素对叶片诱导形成愈伤及分化不定芽的影响。结果表明,‘无尽夏’组培苗植株中上部叶片的愈伤诱导效果好,适宜的外植体取样叶位为第3~6位叶片。初始暗培养有利于叶片形成愈伤,暗培养15~25天的效果最佳。诱导‘无尽夏’组培苗叶片形成愈伤的适宜培养基为MS+CPPU 3.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L,其愈伤诱导率达到98%以上;愈伤增殖与不定芽分化培养基为MS+6-BA 1.0~2.25 mg/L+IBA 0.1 mg/L。

关键词: 大花绣球, 组培苗叶片, 愈伤, 植株再生

Abstract:

The paper aims to establish a large-scale asexual reproduction system and efficient genetic transformation system of Hydrangea macrophylla ‘Endless Summer’. The effects of leaf position, dark culture time and different hormone combinations on callus induction of leaves from ‘Endless Summer’ tissue culture seedlings and adventitious bud differentiation were studied. The results showed that the callus induction effect of the upper and middle leaves of a plantlet was good, and the 3 ^rd to 6^th leaves were suitable for explant sampling. Initial dark culture was beneficial to leaf callus formation and the best effect of dark culture was 15-25 days. The optimum medium for inducing callus formation in leaves of ‘Endless Summer’ tissue-culture seedlings was MS+CPPU 3.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L, the callus induction rate was over 98%. The medium for callus proliferation and adventitious bud differentiation was MS+6-BA 1.0-2.25 mg/L+IBA 0.1 mg/L.

Key words: Hydrangea macrophylla, leaves of tissue culture plantlets, callus, plantlet regeneration

中图分类号:

S685.21

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图/表 5

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叶位	出愈率/%	愈伤长势	愈伤状态
3~4	100a	+++	切面处逐渐形成绿色颗粒状愈伤组织,致密
5~6	99.8±2.3a	+++	切面处逐渐形成绿色颗粒状愈伤组织,致密
7~8	82.5±6.2b	++	切面处逐渐形成绿色颗粒状愈伤组织,偶有黄褐色颗粒,致密
9~10	55.3±4.9c	+	切面处逐渐形成浅绿色颗粒状愈伤组织,偶有红褐色颗粒,致密

叶位	出愈率/%	愈伤长势	愈伤状态
3~4	100a	+++	切面处逐渐形成绿色颗粒状愈伤组织,致密
5~6	99.8±2.3a	+++	切面处逐渐形成绿色颗粒状愈伤组织,致密
7~8	82.5±6.2b	++	切面处逐渐形成绿色颗粒状愈伤组织,偶有黄褐色颗粒,致密
9~10	55.3±4.9c	+	切面处逐渐形成浅绿色颗粒状愈伤组织,偶有红褐色颗粒,致密

暗培养时间/d	出愈率/%	愈伤组织长势	愈伤组织形态
0	70.1±13.8c	+	深绿颗粒状,致密,偶见丛生芽
5	98.7±4.6a	++	深绿颗粒状,致密,部分丛生芽
10	97.3±8.2a	++	绿色颗粒状,致密,部分丛生芽
15	98.1±5.1a	+++	绿色颗粒状,致密,少见丛生芽
20	99.5±2.9a	+++	绿色颗粒状,致密,少见丛生芽
25	100a	+++	绿色颗粒状,偶有黄色颗粒,致密,偶见丛生芽
30	91.1±3.5b	++	浅绿颗粒状,偶有黄色颗粒,致密,偶见丛生芽

暗培养时间/d	出愈率/%	愈伤组织长势	愈伤组织形态
0	70.1±13.8c	+	深绿颗粒状,致密,偶见丛生芽
5	98.7±4.6a	++	深绿颗粒状,致密,部分丛生芽
10	97.3±8.2a	++	绿色颗粒状,致密,部分丛生芽
15	98.1±5.1a	+++	绿色颗粒状,致密,少见丛生芽
20	99.5±2.9a	+++	绿色颗粒状,致密,少见丛生芽
25	100a	+++	绿色颗粒状,偶有黄色颗粒,致密,偶见丛生芽
30	91.1±3.5b	++	浅绿颗粒状,偶有黄色颗粒,致密,偶见丛生芽

序号	ZT/(mg/L)	KT/(mg/L)	6-BA/(mg/L)	CPPU/(mg/L)	IBA/(mg/L)	不定芽诱导率/%	愈伤诱导率/%
1	2.25	0	0	0	0.1	0	0
2	0	2.25	0	0	0.1	0	0
3	0	0	2.25	0	0.1	15.6±6.9	0
4	0	0	0	3.0	0.1	0	99.5±2.3