铁皮石斛‘明斛5号’一步成苗技术研究

doi:10.11924/j.issn.1000-6850.casb2024-0569

摘要/Abstract

摘要： 为简化铁皮石斛新品种‘明斛5号’工厂化育苗程序、缩短育苗时间，以茎段为外植体，采用L₉(3⁴)正交试验，探讨激素(6-BA、NAA)、添加物（香蕉泥、活性炭）对铁皮石斛‘明斛5号’一步成苗的影响。结果表明，适合‘明斛5号’一步成苗的培养基为1/2MS+ 6-BA 3 mg/L+ NAA 0.5 mg/L+香蕉泥50 g/L+活性炭1 g/L，接种120 d后，芽增殖系数达2.85，苗平均株高9.00 cm，茎粗6.10 mm，叶长4.50 cm，叶宽1.07 cm，叶数5.33片，根数6.00条，根长6.70 cm，单株重0.78 g。极差分析结果表明，4个因素对‘明斛5号’一步成苗影响的主次关系为6-BA>NAA>活性炭>香蕉泥。主体间效应检验表明，4个因素对一步成苗生长速度、茎段增殖系数、萌芽率和芽增殖系数的影响均达极显著水平(P<0.01)，6-BA是一步成苗芽增殖系数的主要影响因子，NAA是一步成苗生长速度、茎段增殖系数、萌芽率的主要影响因子。本研究可为铁皮石斛及其他石斛新品种工厂化育苗提供技术参考。

关键词: 铁皮石斛, ‘明斛5号’, 茎段培养, 一步成苗, 正交设计, 6-苄氨基嘌呤, 萘乙酸

Abstract:

The paper aims to simplify the factory seedling rearing procedure of a new variety of Dendrobium officinale ‘Minghu No.5’ and shorten the seedling rearing time. Using stem segment as explants, L₉(3⁴) orthogonal test was used to research the effects of hormones (6-BA, NAA), additives (banana puree, activated carbon AC) on the one-step seedling growth of D. officinale ‘Minghu No.5’. The results showed that the medium suitable for the one-step seedling growth of D. officinale ‘Minghu No.5’ was 1/2MS+ 6-BA 3 mg/L+ NAA 0.5 mg/L+ banana puree 50 g/L+ AC 1 g/L, after 120 days of inoculation, the proliferation coefficient of buds reached 2.85, and the average plant height of seedlings was 9.00 cm, stem diameter was 6.10 mm, leaf length was 4.50 cm, leaf width was 1.07 cm, leaf number was 5.33, root number was 6.00, root length was 6.70 cm, individual plant weight was 0.78 g. The range analysis results showed that the primary and secondary relationship of the four factors on the proliferation of ‘Minghu No.5’ was 6-BA> NAA> AC> banana puree. The inter-subject effect test showed that the four factors had extremely significant effects on the growth rate, stem segment proliferation coefficient, germination rate and bud proliferation coefficient of one-step seedlings (P<0.01). 6-BA was the main factor affecting the growth rate of one-step seedlings, and NAA was the main factor affecting the growth rate of one-step seedlings, stem proliferation coefficient and bud proliferation rate. This study could provide technical reference for factory seedling cultivation of D. officinale and other new varieties.

Key words: Dendrobium officinale, ‘Minghu No.5’, stem culture, one-step seedling, orthogonal design, 6-BA, NAA

江金兰. 铁皮石斛‘明斛5号’一步成苗技术研究[J]. 中国农学通报, 2025, 41(13): 65-70.

JIANG Jinlan. Study on One-Step Seedling Technology of Dendrobium officinale Variety ‘Minghu No.5’[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2025, 41(13): 65-70.

图/表 6

参考文献 28

[1]	江金兰. 激素和有机质对铁皮石斛×重唇石斛F₁代增殖的影响[J]. 亚热带农业研究, 2022, 18(4):252-258.
[2]	中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志第19卷[M]. 北京: 科学出版社, 1999:67,117.
[3]	国家药典委员会. 中华人民共和国药典(2020年版)(一部)[M]. 北京: 中国医药科技出版社, 2020:295.
[4]	福建省中药材产业协会, 厦门塔斯曼生物工程有限公司, 厦门大学, 等. DBS35/001—2020,食品安全地方标准铁皮石斛花[S]. 福州: 福建省卫生健康委员会, 2020:1-4.
[5]	福建省中药材产业协会, 厦门塔斯曼生物工程有限公司, 厦门大学, 等. DBS35/002—2020,食品安全地方标准铁皮石斛叶[S]. 福州: 福建省卫生健康委员会, 2020:1-4.
[6]	江金兰. 铁皮石斛新品种“泰斛1号”[J]. 园艺学报, 2023, 50(5):1169-1170. doi: 10.16420/j.issn.0513-353x.2021-0033
[7]	江金兰, 叶炜, 李永清, 等. 福建泰宁野生铁皮石斛种群的ISSR亲缘关系分析[J]. 热带亚热带植物学报, 2016, 24(3):259-266.
[8]	江金兰, 叶炜, 李永清, 等. 福建泰宁野生铁皮石斛ISSR亲缘关系分析[J]. 浙江农业科学, 2016, 57(2):208-210.
[9]	曹奕鸯, 江金兰, 李永清, 等. 基于叶绿体DNA rps16序列的福建泰宁野生铁皮石斛多样性分析[J]. 福建农业学报, 2016, 31(8):833-838.
[10]	李永清, 叶炜, 江金兰, 等. 铁皮石斛种质亲缘关系的ISSR分析[J]. 西南农业学报, 2015, 28(4):1530-1534.
[11]	颜沛沛, 叶炜, 江金兰, 等. 不同仿生栽培模式下铁皮石斛的品质与安全性分析[J]. 中国农学通报, 2023, 39(25):64-68. doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb2022-0749
[12]	张子璇, 张成才, 向增旭, 等. 金钗石斛工厂化高效育苗技术研究[J]. 中药材, 2021, 44(6):1299-1304.
[13]	琚淑明, 朱伟玲, 王伟亮, 等. 铁皮石斛茎段离体培养一次成苗技术研究[J]. 甘肃农业大学学报, 2016, 51(1):45-48.
[14]	胡佳丽. 铁皮石斛种子组织培养条件的优化研究[D]. 杭州: 浙江农林大学, 2017.
[15]	周晨, 谷巍, 顾正国, 等. 金线兰一次性成苗及设施栽培关键技术研究[J]. 植物生理学报, 2019, 55(11):1695-1704.
[16]	邹晖, 李海明, 王伟英, 等. 白芨无菌小苗一步成苗培养基优化[J]. 黑龙江农业科学, 2018(7):130-132.
[17]	卢金东, 王波, 厉广辉, 等. 芦笋腋芽一步成苗组培技术研究[J]. 山东农业科学, 2023, 55(6):42-46.
[18]	闫学彤, 郑珂媛, 王可佳, 等. 八仙花一步成苗离体培养方法[J]. 植物生理学报, 2022, 58(6):1153-1160.
[19]	王将, 张子璇, 张成才, 等. 金钗石斛工厂化高效育苗技术研究[J]. 中药材, 2021, 44(6):1299-1304.
[20]	梁晖辉, 张成才, 高真, 等. 响应面法探究铁皮石斛种子一步成苗[J]. 中药材, 2019, 42(11):2473-2479.
[21]	成丹, 聂天骄, 李成慧. 铁皮石斛一次成苗技术初探[J]. 现代园艺, 2018(9):16-17.
[22]	江金兰. 不同添加物对文心兰原球茎增殖及试管苗生长的影响[J]. 亚热带植物科学, 2012, 41(4):8-14.
[23]	江金兰. 石斛新品种粉佳人增殖及生根条件优化[J]. 热带作物学报, 2024, 45(6):1184-1193. doi: 10.3969/j.issn.1000-2561.2024.06.010
[24]	蔡正旺. 铁皮石斛组织培养研究[J]. 湖北农业科学, 2022, 61(13):161-164.
[25]	高培元, 陈建妙, 甘铨. 金钗石斛的茎段培养与植株再生[J]. 中草药, 2002, 33(11):1031-1033.
[26]	朱庆竖, 陈勇, 余花, 等. 铁皮石斛组织培养与快繁技术研究[J]. 中国农学通报, 2015, 31(31):23-24.
[27]	汤久杨, 陈卿然, 马喆, 等. 铁皮石斛茎段快繁技术研究[J]. 北京农业职业学院学报, 2020, 34(4):33-40.
[28]	刘雪兰, 孙长生, 朱虹, 等. 温度对铁皮石斛组培苗质量的影响[J]. 中国实验方剂学杂志, 2015, 21(8):89-92.

处理	因素
处理	A.6-BA/(mg/L)	B.NAA/(mg/L)	C.香蕉泥/(g/L)	D.活性炭/(g/L)
T1	1	0.1	50	0.5
T2	1	0.3	75	1
T3	1	0.5	100	1.5
T4	2	0.1	100	1
T5	2	0.3	50	1.5
T6	2	0.5	75	0.5
T7	3	0.1	75	1.5
T8	3	0.3	100	0.5
T9	3	0.5	50	1

处理	因素
处理	A.6-BA/(mg/L)	B.NAA/(mg/L)	C.香蕉泥/(g/L)	D.活性炭/(g/L)
T1	1	0.1	50	0.5
T2	1	0.3	75	1
T3	1	0.5	100	1.5
T4	2	0.1	100	1
T5	2	0.3	50	1.5
T6	2	0.5	75	0.5
T7	3	0.1	75	1.5
T8	3	0.3	100	0.5
T9	3	0.5	50	1

处理	6-BA/(mg/L)	NAA/(mg/L)	香蕉泥/(g/L)	活性炭/(g/L)	生长速度	茎段增殖系数	萌芽率/%	芽增殖系数
T1	1	0.1	50	0.5	1.92±0.27ab	1.52±0.17ab	38.87±2.61ab	1.70±0.24ab
T2	1	0.3	75	1	2.40±0.23abc	1.97±0.19bc	45.47±4.96ab	1.98±0.16abc
T3	1	0.5	100	1.5	3.69±0.72cd	2.02±0.27bc	54.24±10.81b	2.15±0.20abcd
T4	2	0.1	100	1	1.31±0.13a	1.39±0.07a	33.97±2.79a	1.67±0.06a
T5	2	0.3	50	1.5	2.08±0.14ab	1.72±0.13ab	34.62±1.87ab	2.35±0.08bcde
T6	2	0.5	75	0.5	4.56±0.46d	1.83±0.12ab	48.32±6.00ab	2.59±0.06cde
T7	3	0.1	75	1.5	2.58±0.38abc	1.57±0.10abc	36.78±3.31ab	2.49±0.14cde
T8	3	0.3	100	0.5	2.85±0.43abc	1.93±0.20abc	37.37±4.76ab	2.71±0.44de
T9	3	0.5	50	1	3.46±0.56cd	2.56±0.17c	47.87±8.13ab	2.85±0.22e
K_a1	8.01	6.08	7.46	9.06
K_a2	7.95	7.06	9.81	7.17
K_a3	8.89	11.71	7.58	8.62
R_a	0.31	1.88	0.78	0.63
K_b1	5.51	5.42	5.81	5.67
K_b2	4.94	4.84	4.81	5.75
K_b3	5.9	6.09	5.73	4.93
R_b	0.32	0.42	0.33	0.27
K_c1	138.58	139.93	136.08	125.64
K_c2	116.91	109.62	110.86	135.06
K_c3	122.02	127.96	130.57	116.81
R_c	7.22	10.1	8.41	6.08
K_d1	5.83	5.86	6.76	7.14
K_d2	6.61	7.18	7.06	6.36
K_d3	8.05	7.45	6.67	6.99
R_d	0.74	0.53	0.13	0.26

处理	6-BA/(mg/L)	NAA/(mg/L)	香蕉泥/(g/L)	活性炭/(g/L)	生长速度	茎段增殖系数	萌芽率/%	芽增殖系数
T1	1	0.1	50	0.5	1.92±0.27ab	1.52±0.17ab	38.87±2.61ab	1.70±0.24ab
T2	1	0.3	75	1	2.40±0.23abc	1.97±0.19bc	45.47±4.96ab	1.98±0.16abc
T3	1	0.5	100	1.5	3.69±0.72cd	2.02±0.27bc	54.24±10.81b	2.15±0.20abcd
T4	2	0.1	100	1	1.31±0.13a	1.39±0.07a	33.97±2.79a	1.67±0.06a
T5	2	0.3	50	1.5	2.08±0.14ab	1.72±0.13ab	34.62±1.87ab	2.35±0.08bcde
T6	2	0.5	75	0.5	4.56±0.46d	1.83±0.12ab	48.32±6.00ab	2.59±0.06cde
T7	3	0.1	75	1.5	2.58±0.38abc	1.57±0.10abc	36.78±3.31ab	2.49±0.14cde
T8	3	0.3	100	0.5	2.85±0.43abc	1.93±0.20abc	37.37±4.76ab	2.71±0.44de
T9	3	0.5	50	1	3.46±0.56cd	2.56±0.17c	47.87±8.13ab	2.85±0.22e
K_a1	8.01	6.08	7.46	9.06
K_a2	7.95	7.06	9.81	7.17
K_a3	8.89	11.71	7.58	8.62
R_a	0.31	1.88	0.78	0.63
K_b1	5.51	5.42	5.81	5.67
K_b2	4.94	4.84	4.81	5.75
K_b3	5.9	6.09	5.73	4.93
R_b	0.32	0.42	0.33	0.27
K_c1	138.58	139.93	136.08	125.64
K_c2	116.91	109.62	110.86	135.06
K_c3	122.02	127.96	130.57	116.81
R_c	7.22	10.1	8.41	6.08
K_d1	5.83	5.86	6.76	7.14
K_d2	6.61	7.18	7.06	6.36
K_d3	8.05	7.45	6.67	6.99
R_d	0.74	0.53	0.13	0.26

源	因变量	III型平方和	df	均方	F	Sig.
校正模型	生长速度	8.035	8	1.004	0.000	0. 000
	茎段增殖系数	0.758	8	0.095	0.000	0.000
	萌发率	413.659	8	51.707	0.000	0.000
	芽增殖系数	1.470	8	0.184	0.000	0.000
截距	生长速度	68.614	1	68.614	0.000	0.000
	茎段增殖系数	29.703	1	29.703	0.000	0.000
	萌发率	15834.867	1	15834.867	0.000	0. 000
	芽增殖系数	46.649	1	46.649	0.000	0.000
6-BA	生长速度	3.351	2	1.675	0.000	0.000
	茎段增殖系数	0.181	2	0.091	0.000	0.000
	萌发率	22.794	2	11.397	0.000	0.000
	芽增殖系数	0.482	2	0.241	0.000	0.000
NAA	生长速度	0.459	2	0.230	0.000	0. 000
	茎段增殖系数	0.091	2	0.046	0.000	0.000
	萌发率	53.262	2	26.631	0.000	0.000
	芽增殖系数	0.263	2	0.131	0.000	0.000
活性炭	生长速度	1.780	2	0.890	0.000	0.000
	茎段增殖系数	0.187	2	0.094	0.000	0.000
	萌发率	131.589	2	65.794	0.000	0. 000
	芽增殖系数	0.104	2	0.052	0.000	0.000
香蕉泥	生长速度	2.445	2	1.223	0.000	0.000
	茎段增殖系数	0.298	2	0.149	0.000	0.000
	萌发率	206.014	2	103.007	0.000	0.000
	芽增殖系数	0.621	2	0.310	0.000	0.000
误差	生长速度	0.000	0	0.000
	茎段增殖系数	0.000	0	0.000
	萌发率	0.000	0	0.000
	芽增殖系数	0.000	0	0.000
总计	生长速度	76.649	9
	茎段增殖系数	30.461	9
	萌发率	16248.525	9
	芽增殖系数	48.119	9
校正的总计	生长速度	8.035	8
	茎段增殖系数	0.758	8
	萌发率	413.659	8
	芽增殖系数	1.470	8