中国农学通报 ›› 2023, Vol. 39 ›› Issue (32): 150-157.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb2022-0884
收稿日期:
2022-10-25
修回日期:
2023-04-05
出版日期:
2023-11-15
发布日期:
2023-11-10
通讯作者:
王春强,男,1980年出生,山东聊城人,教授,博士,主要从事动物遗传繁育方面的研究。通信地址:121001 辽宁省锦州市古塔区人民街5段48号 锦州医科大学西校区,Tel:0416-2625901,E-mail:wcqworld@126.com。
作者简介:
马智勇,男,1998年出生,贵州遵义人,研究方向:动物科学。通信地址:121001 辽宁省锦州市古塔区人民街5段48号 锦州医科大学西校区,E-mail:2898173474@qq.com。
基金资助:
MA Zhiyong(), LI Meicheng, MA Wei, WANG Chunqiang(
)
Received:
2022-10-25
Revised:
2023-04-05
Published-:
2023-11-15
Online:
2023-11-10
摘要:
近年来,庄河大骨鸡个体产蛋数量出现较大差异。可变剪接(Alternative splicing,AS)是真核基因转录后调控的重要机制,但目前尚无关于AS与禽垂体和下丘脑产蛋量相关性的研究。本试验基于RNA-Seq技术对大骨鸡AS事件进行分析。结果表明:在垂体和下丘脑文库中分别检测到769和813个差异AS事件。2种文库(垂体、下丘脑)中均鉴定出5种类型的AS事件,其中外显子跳跃(SE)的比例最高,而替代5'剪接位点(A5SS)的比例最低;NRCAM,SLMAP和CIB1基因的AS发生频率较高;2种组织文库中分别筛选出644和680个差异剪接基因(DSGs),其中SE的比例最高,A5SS的比例最低。GO和KEGG富集分析分别对329个和337个DSG进行功能注释;RT-PCR检测发现,ESR1存在于不同的AS事件中;12个文库中共获得6758个新的转录本,优化了12486个基因。研究结果不仅扩展了对家禽垂体和下丘脑组织中AS事件的认识,且为研究生产中提高鸡的产蛋量提供新的思路。
马智勇, 李美成, 马巍, 王春强. 基于RNA-Seq技术分析不同产蛋量庄河大骨鸡垂体和下丘脑的可变剪接事件[J]. 中国农学通报, 2023, 39(32): 150-157.
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样品名称 | 原始读数 | 干净读数 | 总定位基因数目 | 外显子读数 | 映射正链读数 | 映射负链度数 |
---|---|---|---|---|---|---|
LP_1 | 68317482 | 66328810 | 57680205(86.96%) | 66.60% | 27816090(41.94%) | 27768078(41.86%) |
LP_2 | 72359294 | 69806998 | 60386063(86.5%) | 62.10% | 29087549(41.67%) | 29092824(41.68%) |
LP_3 | 63889132 | 62116040 | 5366 920(86.4%) | 64.40% | 25918157(41.73%) | 25814561(41.56%) |
NP_1 | 64341034 | 61029484 | 52964336(86.78%) | 64.10% | 25448135(41.7%) | 25489645(41.77%) |
NP_2 | 69054884 | 67531462 | 59190144(87.65%) | 65.20% | 28511031(42.22%) | 28463500(42.15%) |
NP_3 | 62110264 | 60924682 | 52608969(86.35%) | 64.60% | 25342586(41.6%) | 25363479(41.63%) |
LH_1 | 79744218 | 77900 688 | 68487901(87.92%) | 69.50% | 32899952(42.23%) | 32968715(42.32%) |
LH_2 | 65534460 | 62447384 | 54556009(87.36%) | 66.60% | 26194279(41.95%) | 26265470(42.06%) |
LH_3 | 79835258 | 78021862 | 67701041(86.77%) | 68.20% | 32517332(41.68%) | 32596024(41.78%) |
NH_1 | 76681332 | 74134976 | 64570880(87.1%) | 70.70% | 30962806(41.77%) | 31058491(41.89%) |
NH_2 | 49332078 | 46982632 | 41205550(87.7%) | 67.10% | 19804054(42.15%) | 19834071(42.22%) |
NH_3 | 73617140 | 71760796 | 61408353(85.57%) | 66.90% | 29489160(41.09%) | 29529056(41.15%) |
样品名称 | 原始读数 | 干净读数 | 总定位基因数目 | 外显子读数 | 映射正链读数 | 映射负链度数 |
---|---|---|---|---|---|---|
LP_1 | 68317482 | 66328810 | 57680205(86.96%) | 66.60% | 27816090(41.94%) | 27768078(41.86%) |
LP_2 | 72359294 | 69806998 | 60386063(86.5%) | 62.10% | 29087549(41.67%) | 29092824(41.68%) |
LP_3 | 63889132 | 62116040 | 5366 920(86.4%) | 64.40% | 25918157(41.73%) | 25814561(41.56%) |
NP_1 | 64341034 | 61029484 | 52964336(86.78%) | 64.10% | 25448135(41.7%) | 25489645(41.77%) |
NP_2 | 69054884 | 67531462 | 59190144(87.65%) | 65.20% | 28511031(42.22%) | 28463500(42.15%) |
NP_3 | 62110264 | 60924682 | 52608969(86.35%) | 64.60% | 25342586(41.6%) | 25363479(41.63%) |
LH_1 | 79744218 | 77900 688 | 68487901(87.92%) | 69.50% | 32899952(42.23%) | 32968715(42.32%) |
LH_2 | 65534460 | 62447384 | 54556009(87.36%) | 66.60% | 26194279(41.95%) | 26265470(42.06%) |
LH_3 | 79835258 | 78021862 | 67701041(86.77%) | 68.20% | 32517332(41.68%) | 32596024(41.78%) |
NH_1 | 76681332 | 74134976 | 64570880(87.1%) | 70.70% | 30962806(41.77%) | 31058491(41.89%) |
NH_2 | 49332078 | 46982632 | 41205550(87.7%) | 67.10% | 19804054(42.15%) | 19834071(42.22%) |
NH_3 | 73617140 | 71760796 | 61408353(85.57%) | 66.90% | 29489160(41.09%) | 29529056(41.15%) |
基因文库 | 基因 | AS事件类型 | AS事件总数 | 差异事件总数 | 差异剪接基因 |
---|---|---|---|---|---|
垂体 | 8720 | SE | 13804 | 549(264:285) | 548 |
MXE | 1464 | 159(91:68) | 159 | ||
RI | 512 | 32(15:17) | 32 | ||
A3SS | 397 | 18(7:11) | 18 | ||
A5SS | 281 | 11(7:4) | 11 | ||
下丘脑 | 9448 | SE | 15933 | 610(312:298) | 613 |
MXE | 1913 | 142(71:71) | 142 | ||
RI | 504 | 31(19:12) | 31 | ||
A3SS | 394 | 24(12:12) | 24 | ||
A5SS | 277 | 6(4:2) | 6 |
基因文库 | 基因 | AS事件类型 | AS事件总数 | 差异事件总数 | 差异剪接基因 |
---|---|---|---|---|---|
垂体 | 8720 | SE | 13804 | 549(264:285) | 548 |
MXE | 1464 | 159(91:68) | 159 | ||
RI | 512 | 32(15:17) | 32 | ||
A3SS | 397 | 18(7:11) | 18 | ||
A5SS | 281 | 11(7:4) | 11 | ||
下丘脑 | 9448 | SE | 15933 | 610(312:298) | 613 |
MXE | 1913 | 142(71:71) | 142 | ||
RI | 504 | 31(19:12) | 31 | ||
A3SS | 394 | 24(12:12) | 24 | ||
A5SS | 277 | 6(4:2) | 6 |
基因文库 | 基因 | SE | MXE | RI | A3SS | A5SS |
---|---|---|---|---|---|---|
垂体 | SLMAP | 25 | 14 | 0 | 0 | 0 |
CIB1 | 19 | 9 | 0 | 0 | 0 | |
NRCAM | 20 | 4 | 0 | 0 | 0 | |
CADM1 | 20 | 12 | 0 | 0 | 0 | |
CARMIL3 | 18 | 3 | 1 | 0 | 0 | |
下丘脑 | SLMAP | 23 | 10 | 0 | 0 | 0 |
CIB1 | 19 | 9 | 0 | 0 | 1 | |
NRCAM | 25 | 13 | 0 | 0 | 0 | |
EPB4IL3 | 22 | 6 | 0 | 1 | 0 | |
ABI3BP | 19 | 4 | 0 | 0 | 0 |
基因文库 | 基因 | SE | MXE | RI | A3SS | A5SS |
---|---|---|---|---|---|---|
垂体 | SLMAP | 25 | 14 | 0 | 0 | 0 |
CIB1 | 19 | 9 | 0 | 0 | 0 | |
NRCAM | 20 | 4 | 0 | 0 | 0 | |
CADM1 | 20 | 12 | 0 | 0 | 0 | |
CARMIL3 | 18 | 3 | 1 | 0 | 0 | |
下丘脑 | SLMAP | 23 | 10 | 0 | 0 | 0 |
CIB1 | 19 | 9 | 0 | 0 | 1 | |
NRCAM | 25 | 13 | 0 | 0 | 0 | |
EPB4IL3 | 22 | 6 | 0 | 1 | 0 | |
ABI3BP | 19 | 4 | 0 | 0 | 0 |
基因文库 | 途径 | 描述 | P值 | DSGs |
---|---|---|---|---|
垂体 | gga04010 | MAPK signaling pathway | 0.029472063 | 12 |
gga04260 | Cardiac muscle contraction | 0.081935761 | 5 | |
gga04261 | Adrenergic signaling in cardiomyocytes | 0.086900369 | 7 | |
下丘脑 | gga04520 | Adherens junction | 0.011715804 | 7 |
gga04530 | Tight junction | 0.062176625 | 6 | |
gga04020 | Calcium signaling pathway | 0.083233215 | 9 |
基因文库 | 途径 | 描述 | P值 | DSGs |
---|---|---|---|---|
垂体 | gga04010 | MAPK signaling pathway | 0.029472063 | 12 |
gga04260 | Cardiac muscle contraction | 0.081935761 | 5 | |
gga04261 | Adrenergic signaling in cardiomyocytes | 0.086900369 | 7 | |
下丘脑 | gga04520 | Adherens junction | 0.011715804 | 7 |
gga04530 | Tight junction | 0.062176625 | 6 | |
gga04020 | Calcium signaling pathway | 0.083233215 | 9 |
染色体编号 | 来源 | 长度 | 正负链 | 外显子数 | 功能预测 |
---|---|---|---|---|---|
4 | Novel Gene | 21214 | + | 1 | nucleic acid binding |
22 | Novel Gene | 11154 | - | 4 | histone acetyltransferase KAT2B isoform X2 |
2 | Novel Gene | 8241 | + | 6 | heat shock transcription factor, X-linked-like |
12 | Novel Gene | 1896 | - | 15 | hypothetical protein ENH_00063870 |
6 | Novel Gene | 34081 | + | 28 | purine ribonucleoside binding |
15 | Novel Gene | 7214 | - | 41 | nucleoside binding |
17 | Novel Gene | 5900 | + | 68 | extracellular matrix structural constituent |
染色体编号 | 来源 | 长度 | 正负链 | 外显子数 | 功能预测 |
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4 | Novel Gene | 21214 | + | 1 | nucleic acid binding |
22 | Novel Gene | 11154 | - | 4 | histone acetyltransferase KAT2B isoform X2 |
2 | Novel Gene | 8241 | + | 6 | heat shock transcription factor, X-linked-like |
12 | Novel Gene | 1896 | - | 15 | hypothetical protein ENH_00063870 |
6 | Novel Gene | 34081 | + | 28 | purine ribonucleoside binding |
15 | Novel Gene | 7214 | - | 41 | nucleoside binding |
17 | Novel Gene | 5900 | + | 68 | extracellular matrix structural constituent |
基因ID | 染色体编号 | 正负链 | 原始跨度 | 延伸跨度 |
---|---|---|---|---|
ENSGALG00000000003 | 1 | + | 20174067-20177667 | 20157937-20179163 |
ENSGALG00000000081 | 16 | - | 205312-210738 | 204525-211382 |
ENSGALG00000000129 | 11 | + | 19064511-19086448 | 19064481-19107184 |
ENSGALG00000000233 | 27 | - | 4203293-4208774 | 4201773-4212041 |
ENSGALG00000000309 | 26 | + | 789839-794797 | 787968-795597 |
ENSGALG00000000296 | 5 | - | 27201732-27283175 | 27195404-27283845 |
ENSGALG00000000853 | 17 | + | 10878731-10887869 | 10872754-10887869 |
ENSGALG00000000862 | 23 | - | 1766445-1795825 | 1765749-1795881 |
ENSGALG00000000978 | 21 | + | 905170-916809 | 898302-932294 |
ENSGALG00000001042 | 19 | - | 615601-657520 | 613509-657908 |
基因ID | 染色体编号 | 正负链 | 原始跨度 | 延伸跨度 |
---|---|---|---|---|
ENSGALG00000000003 | 1 | + | 20174067-20177667 | 20157937-20179163 |
ENSGALG00000000081 | 16 | - | 205312-210738 | 204525-211382 |
ENSGALG00000000129 | 11 | + | 19064511-19086448 | 19064481-19107184 |
ENSGALG00000000233 | 27 | - | 4203293-4208774 | 4201773-4212041 |
ENSGALG00000000309 | 26 | + | 789839-794797 | 787968-795597 |
ENSGALG00000000296 | 5 | - | 27201732-27283175 | 27195404-27283845 |
ENSGALG00000000853 | 17 | + | 10878731-10887869 | 10872754-10887869 |
ENSGALG00000000862 | 23 | - | 1766445-1795825 | 1765749-1795881 |
ENSGALG00000000978 | 21 | + | 905170-916809 | 898302-932294 |
ENSGALG00000001042 | 19 | - | 615601-657520 | 613509-657908 |
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