采后香梨梨火疫病菌检测及病原菌存活时间研究

doi:10.11924/j.issn.1000-6850.casb2023-0599

中国农学通报 ›› 2024, Vol. 40 ›› Issue (19): 120-125.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb2023-0599

采后香梨梨火疫病菌检测及病原菌存活时间研究

赵志强¹^,²(), 魏然², 郭庆元²()

¹ 新疆生产建设兵团第四师农业科学研究所，新疆可克达拉 835219
² 新疆农业大学农学院，乌鲁木齐 830052

收稿日期:2023-08-21 修回日期:2024-01-16 出版日期:2024-07-05 发布日期:2024-07-02
通讯作者:
郭庆元，男，1962年出生，四川乐山人，教授，博士，研究方向：作物病害及防治。通信地址：830052 乌鲁木齐市沙依巴克区南昌路新疆农业大学，E-mail：guoqingyuan3009@sina.com。
作者简介:
赵志强，男，1994年出生，新疆伊宁人，硕士，研究方向：植物细菌性病害。通信地址：835219 新疆可克达拉市第四师农业科学研究所，E-mail：1758385115@qq.com。
基金资助:
新疆维吾尔自治区科技计划重大专项“苹果枝枯病病原及流行成灾规律研究”子课题“苹果枝枯病生物传播及阻断技术研究”(2019A01001-2)

Detection and Survival Time of Erwinia amylovora in Mature Korla Fragrant Pear

ZHAO Zhiqiang¹^,²(), WEI Ran², GUO Qingyuan²()

¹ Institute of Agricultural Sciences, The Fourth Agricultural Production Division of Xinjiang Production and Construction Corps, Cocodala, Xinjiang 835219
² College of Agronomy, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 830052

Received:2023-08-21 Revised:2024-01-16 Published:2024-07-05 Online:2024-07-02

摘要/Abstract

摘要：

为明确在采后果实上是否携带梨火疫病菌以及在果实上的存活时间，采集库尔勒地区不同梨园的成熟果实，通过活菌定量检测方法，对采后香梨上的梨火疫病菌(Erwinia amylovora)进行动态检测，并对Zeller选择性培养基分离出的菌株进行致病力测定。结果表明，采集的果实上存在E. amylovora。E. amylovora在果实不同部位存活时间由长到短为果面(133 d)>果萼(83 d)/柄洼(83 d)>果柄(63 d)；在不同部位的活菌阳性检出率由大到小为果面(6.88%)>果萼(3.75%)>柄洼(2.19%)>果柄(1.57%)，且分离出的菌株仍具有致病力。由此可知，加强香梨检疫是防止该病害跨区传播的重要方法。同时，该结果对香梨作为E. amylovora传播源的风险性评估提供了理论依据。

关键词: 梨, 火疫病, 解淀粉欧文氏菌, 动态检测, 存活时间

Abstract:

To determine whether the Erwinia amylovora was on the mature pear and its survival time, mature fruits from different pear orchards in Korla region were collected. Through the quantitative detection method of living bacteria, the dynamic detection of E. amylovora on the stored pear was carried out, and the pathogenicity of the strains isolated from Zeller selective medium was determined. The survival time of E. amylovora in different parts of pear was as follows: surface (133 d)> calyx (83 d) / stalkhole (83 d)> peduncle (63 d). The viable cells of E. amylovora detection rates of different parts were as follows: fruit surface (6.88%)> calyx (3.75%)> stalkhole (2.19%)> peduncle (1.57%), and the isolated strains of E. amylovora had pathogenicity. In summary, strengthening the quarantine of Korla fragrant pear is an important method to prevent the disease from spreading across regions, and the results provide a theoretical basis for the risk assessment of pear as the vector of E. amylovora.

Key words: pear, fire blight, Erwinia amylovora, dynamic detection, survival time

赵志强, 魏然, 郭庆元. 采后香梨梨火疫病菌检测及病原菌存活时间研究[J]. 中国农学通报, 2024, 40(19): 120-125.

ZHAO Zhiqiang, WEI Ran, GUO Qingyuan. Detection and Survival Time of Erwinia amylovora in Mature Korla Fragrant Pear[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2024, 40(19): 120-125.

图/表 5

参考文献 26

[1]	张钊, 王野苹. 香梨品种种源问题的探讨[J]. 果树科学, 1993, 10(2):113-115.
[2]	张绍铃. 梨学[M]. 北京: 中国农业出版社, 2013:56-61.
[3]	高启明, 李疆, 李阳. 库尔勒香梨研究进展[J]. 经济林研究, 2005, 23(1):79-82.
[4]	刘玮. 库尔勒香梨研究进展[J]. 安徽农学通报(上半月刊), 2009, 15(11):163-164.
[5]	李晓妹, 韩丽丽, 何亚南, 等. 20个苹果品种(类型)对梨火疫病菌的抗病性评价[J]. 植物检疫, 2022, 36(4):6-12.
[6]	鲁晏宏, 郝金辉, 罗明, 等. 梨火疫病拮抗菌筛选及温室防效测定[J]. 微生物学通报, 2021, 48(10):3690-3699.
[7]	一类农作物病虫害名录[J]. 农技服务, 2020, 37(11):74.
[8]	黄伟, 盛强, 罗明, 等. 新疆库尔勒香梨火疫病的发生特点及防控建议[J]. 植物保护, 2022, 48(6):207-213,231.
[9]	SHTIENBERG D, MANULIS-SASSON S, ZILBERSTAINE M, et al. The incessant battle against fire blight in pears: 30 years of challenges and successes in managing the disease in Israel[J]. Plant disease, 2015, 99(8):1048-1058. doi: 10.1094/PDIS-01-15-0101-FE pmid: 30695934
[10]	CERONI P, MINARDI P, BABINI V, et al. Survival of Erwinia amylovora on pears and on fruit containers in cold storage and outdoors[J]. EPPO bulletin, 2004, 34:109-115.
[11]	ROBERTS R G, HALE C N, ZWET T V, et al. The potential for spread of Erwina amylovora and fire blight via commercial fruit: A critical review and risk assessment[J]. Crop protection, 1998, 17(1):19-28.
[12]	屈金亮. 河北省梨火疫病风险分析及管理对策[J]. 河北林业科技, 2005, 33(3):35-36.
[13]	DUECK J. Survival of Erwinia amylovora in association with mature apple fruit[J]. Canadian journal of plant science, 1974, 54(2):349-351.
[14]	ZWET T V. Population of Erwinia amylovora on external and internal apple fruit tissues[J]. Plant disease, 1990, 74(9):711-716.
[15]	尚琳琳, 周国梁, 仇书红, 等. 美国进境樱桃果实中梨火疫病菌的检测[J]. 植物保护学报, 2010, 37(5):441-446.
[16]	贾平乔, 周国梁, 吴杏霞, 等. 进境苹果果实中梨火疫病菌的套式PCR检测[J]. 植物病理学报, 2009, 39(5):1-9.
[17]	BERESWILL S, BUGERT P, BRUCHMÜLLER I, et al. Identification of the fire blight pathogen, Erwinia amylovora, by PCR assays with chromosomal DNA[J]. Applied & environmental microbiology, 1995, 61(7):636-2642.
[18]	卢玲. 梨火疫病菌的分子检测技术研究[D]. 南京: 南京农业大学, 2004:41-48.
[19]	钱国良, 胡白石, 卢玲, 等. 梨火疫病菌的实时荧光PCR检测[J]. 植物病理学报, 2006, 36(2):123-128.
[20]	袁英哲, 韩剑, 王岩, 等. 梨火疫病菌活菌快速定量检测方法的建立[J]. 果树学报, 2020, 37(9):1425-1433.
[21]	贾晓辉, 王文辉, 李世强, 等. 新疆库尔勒香梨贮藏保鲜情况调查[J]. 中国果树, 2014, 38(5):75-78.
[22]	李洪涛, 张静文, 盛强, 等. 我国20个梨品种(种质)对国外梨火疫病菌的抗病性评价[J]. 果树学报, 2019, 36(5):629-637.
[23]	ZWET T. The various means of dissemination of the fire blight bacterium Erwinia amylovora[J]. Eppo bulletin, 2010, 24(1):209-214.
[24]	AZZOUT B T. Plant health and the blight of the WTO SPS Agreement[J]. Environmental law review, 2004, 6(1):39-48.
[25]	ORDAX M, BIOSCA E G, WIMALAJEEWA S C, et al. Survival of Erwinia amylovora in mature apple fruit calyces through the viable but nonculturable (VBNC) state[J]. Journal of applied microbiology, 2010, 107(1):106-116.
[26]	SHOLBERG P L, GAUNCE A P, OWEN G R. Occurrence of Erwinia amylovora of pome fruit in British Columbia in 1985 and its elimination from the apple surface[J]. Canadian journal of plant pathology, 1988, 10(2):178-182.

反应体系(25 μL)	qPCR反应程序
反应体系(25 μL)	预变性	变性	退火温度	延伸	循环数
TB Green^TMPremix Dimer Eraser 12.5 μL，浓度为10 μmol/L的上下游引物各0.75 μL， ROX为0.5 μL，模板2 μL，ddH₂O补足至25 μL	95℃，5 min	95℃，3 s	54℃，30 s	72，30 s	40

反应体系(25 μL)	qPCR反应程序
反应体系(25 μL)	预变性	变性	退火温度	延伸	循环数
TB Green^TMPremix Dimer Eraser 12.5 μL，浓度为10 μmol/L的上下游引物各0.75 μL， ROX为0.5 μL，模板2 μL，ddH₂O补足至25 μL	95℃，5 min	95℃，3 s	54℃，30 s	72，30 s	40

检测时间/d	检测数量/个	果柄				柄洼
检测时间/d	检测数量/个	阳性数量/ 个	检出率/ %	133 d内总检出率/ %	平均活菌数/ (CFU/样)	阳性数量/ 个	检出率/ %	133 d内总检出率/ %	平均活菌数/ (CFU/样)
3	40	1	2.5	1.57	7.0×10³	3	7.5	2.19	2.16×10⁴
23	40	0	-		-	0	-		-
43	40	0	-		-	0	-		-
63	40	4	10		8.45×10³	3	7.5		8.03×10³
83	40	0	-		-	1	2.5		9.54×10³
103	40	0	-		-	0	-		-
118	40	0	-		-	0	-		-
133	40	0	-		-	0	-		-
140	40	0	-	-	-	0	-	-	-
147	40	0	-	-	-	0	-	-	-
157	40	0	-	-	-	0	-	-	-
检测时间/d	检测数量/个	果萼				果面
检测时间/d	检测数量/个	阳性数量/ 个	检出率/ %	133 d内总检出率/ %	平均活菌数/ (CFU/样)	阳性数量/ 个	检出率/ %	133 d内总检出率/ %	平均活菌数/ (CFU/样)
3	40	8	20	3.75	1.49×10⁴	2	5	6.88	3.6×10⁴
23	40	1	2.5		8.67×10⁴	4	10		1.14×10⁴
43	40	1	2.5		2.4×10⁴	2	5		5.32×10⁴
63	40	0	-		-	2	5		6.17×10⁴
83	40	2	5		9.23×10³	5	12.5		1.11×10⁴
103	40	0	-		-	4	10		5.18×10³
118	40	0	-		-	1	2.5		1.1×10²
133	40	0	-		-	2	5		1.16×10²
140	40	0	-	-	-	0	-	-	-
147	40	0	-	-	-	0	-	-	-
157	40	0	-	-	-	0	-	-	-

检测时间/d	检测数量/个	果柄				柄洼
检测时间/d	检测数量/个	阳性数量/ 个	检出率/ %	133 d内总检出率/ %	平均活菌数/ (CFU/样)	阳性数量/ 个	检出率/ %	133 d内总检出率/ %	平均活菌数/ (CFU/样)
3	40	1	2.5	1.57	7.0×10³	3	7.5	2.19	2.16×10⁴
23	40	0	-		-	0	-		-
43	40	0	-		-	0	-		-
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83	40	0	-		-	1	2.5		9.54×10³
103	40	0	-		-	0	-		-
118	40	0	-		-	0	-		-
133	40	0	-		-	0	-		-
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检测时间/d	检测数量/个	果萼				果面
检测时间/d	检测数量/个	阳性数量/ 个	检出率/ %	133 d内总检出率/ %	平均活菌数/ (CFU/样)	阳性数量/ 个	检出率/ %	133 d内总检出率/ %	平均活菌数/ (CFU/样)
3	40	8	20	3.75	1.49×10⁴	2	5	6.88	3.6×10⁴
23	40	1	2.5		8.67×10⁴	4	10		1.14×10⁴
43	40	1	2.5		2.4×10⁴	2	5		5.32×10⁴
63	40	0	-		-	2	5		6.17×10⁴
83	40	2	5		9.23×10³	5	12.5		1.11×10⁴
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140	40	0	-	-	-	0	-	-	-
147	40	0	-	-	-	0	-	-	-
157	40	0	-	-	-	0	-	-	-

检测部位	阳性样品数量/个	检测结果/(CFU/样)
检测部位	阳性样品数量/个	PMA-qPCR	平板涂布计数
果柄	5	8.53×10³±1.33×10³	9.87×10³±2.39×10³
柄洼	7	1.41×10⁴±1.25×10⁴	1.63×10⁴±1.56×10⁴
果萼	12	1.42×10⁴±1.08×10⁴	1.64×10⁴±1.65×10⁴
果面	22	1.93×10⁴±1.18×10⁴	2.15×10⁴±2.38×10⁴

采后香梨梨火疫病菌检测及病原菌存活时间研究

Detection and Survival Time of Erwinia amylovora in Mature Korla Fragrant Pear

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[1]	伏芳, 武雅娟, 姜燕, 高同雨, 李晶, 王铭先, 苏本营. ‘京白梨’果形及果重差异影响因素分析[J]. 中国农学通报, 2024, 40(7): 39-43.
[2]	金武, 马学艳, 彭刚, 陈琬雯, 闻海波. 梨形环棱螺11个地理种群的几何形态学分析[J]. 中国农学通报, 2024, 40(2): 159-164.
[3]	钟存, 雷玉红, 魏鹏. 贵德地区梨树始花期预报模型研究[J]. 中国农学通报, 2024, 40(11): 97-102.
[4]	高美静, 沈燕, 卢莉娜, 仲建锋, 卢飞, 郑尊涛, 张志勇. 3种杀菌剂在梨和土壤中的残留及消解特征[J]. 中国农学通报, 2023, 39(7): 116-121.
[5]	武明雅, 陈俊强, 马海林, 刘方春, 刘丙花, 刘幸红, 司东霞. 印度梨形孢定殖策略和促生机制研究进展[J]. 中国农学通报, 2023, 39(3): 119-126.
[6]	吴悦菊, 张晓杰, 贾卓隆, 周伊鑫, 黄平, 王晓明, 彭建营. 梨果皮色素含量的测定方法研究[J]. 中国农学通报, 2023, 39(28): 119-125.
[7]	刘现, 陈峻生, 赵宇慧. 基于OpenCV的‘翠冠’梨多角度大小检测与分级[J]. 中国农学通报, 2023, 39(22): 152-157.
[8]	李艳萍, 徐晶莹, 魏浩, 吴书凤, 金晶, 彭启超, 周士龙, 邓祖科. 北京平谷梨园土壤环境和梨果品质调查[J]. 中国农学通报, 2023, 39(14): 54-59.
[9]	胡海燕, 张然然, 李晓莉. 樱桃园梨小食心虫迷向丝迷向效果初探[J]. 中国农学通报, 2023, 39(10): 113-116.
[10]	武雅娟, 苏本营, 李晶, 高同雨. 基于区块链技术的特色农产品质量供应链设计研究：以“门头沟京白梨”为例[J]. 中国农学通报, 2022, 38(33): 152-157.
[11]	李婷婷, 陈红. 刺梨叶片愈伤组织诱导及抗褐化研究[J]. 中国农学通报, 2022, 38(32): 12-21.
[12]	李佳欢, 王晓慧, 姜明国, 宋福强, 常伟. 基于响应面法优化印度梨形孢培养基[J]. 中国农学通报, 2022, 38(3): 102-109.
[13]	赵明新, 曹刚, 王玮, 曹素芳, 李红旭. 5个梨授粉品种与‘玉露香梨’授粉效应比较研究[J]. 中国农学通报, 2022, 38(28): 52-57.
[14]	马俊杰, 高有华, 阿布力孜, 郭庆元. 库尔勒地区梨木虱发生动态及黄板诱杀效果研究[J]. 中国农学通报, 2022, 38(24): 109-112.
[15]	荣华, 刘龙, 郭庆元. 茶叶活性成分对梨火疫病菌的抑制活性及稳定性研究[J]. 中国农学通报, 2022, 38(24): 118-123.