中国农学通报 ›› 2025, Vol. 41 ›› Issue (3): 131-138.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb2024-0298
收稿日期:
2024-05-22
修回日期:
2024-08-16
出版日期:
2025-01-25
发布日期:
2025-01-20
通讯作者:
作者简介:
韩垚,男,1989年出生,山东淄博人,农艺师,硕士,主要从事植物生物技术等研究工作。通信地址:401329 重庆市高新区白市驿镇白欣路100号重庆农科院生物所,Tel:18996191773,E-mail:960640476@qq.com。
基金资助:
HAN Yao(), YANG Xiaoyan, XIE Shuzhang(
)
Received:
2024-05-22
Revised:
2024-08-16
Published:
2025-01-25
Online:
2025-01-20
摘要:
本研究旨在明确植物组培过程中常见污染杂菌的种类,评估抑菌剂对污染杂菌的抑菌效果,并筛选出有效的抑菌药剂。以6种组培室常见污染杂菌菌株为试材,分离纯化后通过16S rDNA或ITS序列同源性分析结合系统发育树分析进行分类鉴定。采用抑菌圈法测定评价5种抑菌剂对3种细菌的抑菌效果,采用生长速率法测定评价5种抑菌剂对3种真菌的抑菌效果。结果显示,3种污染细菌分别为副氧化微杆菌、抗辐射不动杆菌、鞘氨醇单胞菌,3种污染真菌分别为杂色曲霉、枝孢内生菌、聚多曲霉。抑菌试验结果表明0.5 g/L 1,2-苯并异噻唑啉-3-酮和0.5 g/L烯酰·锰锌对6种供试菌均有较好的抑制作用;0.5 mL/L异噻唑啉酮对抗辐射不动杆菌XJ-2、鞘氨醇单胞菌XJ-3、枝孢内生菌ZJ-2、聚多曲霉ZJ-3、杂色曲霉ZJ-1有较好抑制作用。0.05 g/L腐霉·福美双能有效抑制3种真菌生长,0.5 g/L腐霉·福美双对副氧化微杆菌XJ-1、鞘氨醇单胞菌XJ-3具有一定的抑菌作用。溴硝醇对细菌生长几乎没有抑制作用,0.5 g/L溴硝醇对真菌有一定的抑制作用。综上所述,1,2-苯并异噻唑啉-3-酮、烯酰·锰锌、异噻唑啉酮具有较强和广谱的抑菌作用,作为抑菌剂在控制植物组培污染方面有较好的应用前景。
韩垚, 杨小艳, 谢树章. 植物组培中污染微生物的分离鉴定及药剂筛选[J]. 中国农学通报, 2025, 41(3): 131-138.
HAN Yao, YANG Xiaoyan, XIE Shuzhang. Contaminated Microorganisms in Plant Tissue Culture: Isolation and Identification and Fungicides Screening[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2025, 41(3): 131-138.
类型 | 菌株 | 最相似菌株 | 登录号 | 相似性/% |
---|---|---|---|---|
真菌 | ZJ-1 | Aspergillus versicolor isolate CA3 | OR354725.1 | 99.64 |
ZJ-2 | Cladosporium endophyticum MFLUCC 17-0599 | NR_158360.1 | 99.06 | |
ZJ-3 | Aspergillus sydowii isolate H2Pb | KP994297.1 | 99.46 | |
细菌 | XJ-1 | Microbacterium paraoxydans strain H396 | MH669308.1 | 99.72 |
XJ-2 | Acinetobacter radioresistens strain LJ16106 | KY767501.1 | 100 | |
XJ-3 | Sphingomonas yabuuchiae strain OsEp_A&N_30A3 | MT367848.1 | 97.67 |
类型 | 菌株 | 最相似菌株 | 登录号 | 相似性/% |
---|---|---|---|---|
真菌 | ZJ-1 | Aspergillus versicolor isolate CA3 | OR354725.1 | 99.64 |
ZJ-2 | Cladosporium endophyticum MFLUCC 17-0599 | NR_158360.1 | 99.06 | |
ZJ-3 | Aspergillus sydowii isolate H2Pb | KP994297.1 | 99.46 | |
细菌 | XJ-1 | Microbacterium paraoxydans strain H396 | MH669308.1 | 99.72 |
XJ-2 | Acinetobacter radioresistens strain LJ16106 | KY767501.1 | 100 | |
XJ-3 | Sphingomonas yabuuchiae strain OsEp_A&N_30A3 | MT367848.1 | 97.67 |
编号 | 抑菌剂 | 浓度 | 抑菌圈直径/mm | ||
---|---|---|---|---|---|
副氧化微杆菌XJ-1 | 抗辐射不动杆菌XJ-2 | 鞘氨醇单胞菌XJ-3 | |||
CK | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | ||
Y1 | 烯酰·锰锌 | 0.1 g/L | 13.88±0.38 | 9.40±0.61 | 7.17±0.25 |
0.25 g/L | 21.21±0.28 | 15.91±0.11 | 8.89±0.23 | ||
0.5 g/L | 22.93±0.08 | 18.49±0.14 | 9.44±0.37 | ||
Y6 | 腐霉·福美双 | 0.1 g/L | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 |
0.25 g/L | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | ||
0.5 g/L | 10.67±0.69 | 0.00±0.00 | 10.27±0.39 | ||
Y19 | 异噻唑啉酮 | 0.1 ml/L | 0.00±0.00 | 5.11±0.35 | 7.33±0.37 |
0.25 ml/L | 0.00±0.00 | 11.11±0.22 | 14.39±0.25 | ||
0.5 ml/L | 6.72±0.21 | 17.06±0.70 | 17.84±0.33 | ||
Y22 | 1,2-苯并异噻唑啉-3-酮 | 0.1 g/L | 13.60±0.18 | 15.50±0.39 | 7.38±0.00 |
0.25 g/L | 18.33±0.71 | 21.08±0.28 | 9.61±0.22 | ||
0.5 g/L | 27.56±0.87 | 27.44±0.28 | 18.67±0.32 | ||
Y32 | 溴硝醇 | 0.1 g/L | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 |
0.25 g/L | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | ||
0.5 g/L | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 |
编号 | 抑菌剂 | 浓度 | 抑菌圈直径/mm | ||
---|---|---|---|---|---|
副氧化微杆菌XJ-1 | 抗辐射不动杆菌XJ-2 | 鞘氨醇单胞菌XJ-3 | |||
CK | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | ||
Y1 | 烯酰·锰锌 | 0.1 g/L | 13.88±0.38 | 9.40±0.61 | 7.17±0.25 |
0.25 g/L | 21.21±0.28 | 15.91±0.11 | 8.89±0.23 | ||
0.5 g/L | 22.93±0.08 | 18.49±0.14 | 9.44±0.37 | ||
Y6 | 腐霉·福美双 | 0.1 g/L | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 |
0.25 g/L | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | ||
0.5 g/L | 10.67±0.69 | 0.00±0.00 | 10.27±0.39 | ||
Y19 | 异噻唑啉酮 | 0.1 ml/L | 0.00±0.00 | 5.11±0.35 | 7.33±0.37 |
0.25 ml/L | 0.00±0.00 | 11.11±0.22 | 14.39±0.25 | ||
0.5 ml/L | 6.72±0.21 | 17.06±0.70 | 17.84±0.33 | ||
Y22 | 1,2-苯并异噻唑啉-3-酮 | 0.1 g/L | 13.60±0.18 | 15.50±0.39 | 7.38±0.00 |
0.25 g/L | 18.33±0.71 | 21.08±0.28 | 9.61±0.22 | ||
0.5 g/L | 27.56±0.87 | 27.44±0.28 | 18.67±0.32 | ||
Y32 | 溴硝醇 | 0.1 g/L | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 |
0.25 g/L | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | ||
0.5 g/L | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 | 0.00±0.00 |
编号 | 抑菌剂 | 浓度 | 杂色曲霉ZJ-1 | 枝孢内生菌ZJ-2 | 聚多曲霉ZJ-3 | ||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
菌落直径/mm | 抑菌率/% | 菌落直径/mm | 抑菌率/% | 菌落直径/mm | 抑菌率/% | ||||||||||
CK | 19.83 | 27.33 | 25.67 | ||||||||||||
Y1 | 烯酰·锰锌 | 0.01 g/L | 16.43 | 22.92 | 27.20 | 0.60 | 18.27 | 35.81 | |||||||
0.05 g/L | 12.97 | 46.29 | 22.07 | 23.58 | 15.90 | 47.26 | |||||||||
0.1 g/L | 11.77 | 54.38 | 19.83 | 33.58 | 15.17 | 50.81 | |||||||||
0.25 g/L | 9.67 | 68.54 | 14.07 | 59.40 | 13.17 | 60.48 | |||||||||
0.5 g/L | 7.23 | 84.94 | 5.53 | 97.61 | 12.00 | 66.13 | |||||||||
Y6 | 腐霉·福美双 | 0.01 g/L | 7.33 | 84.27 | 25.67 | 7.46 | 5.00 | 100.00 | |||||||
0.05 g/L | 5.00 | 100.00 | 7.33 | 89.55 | 5.00 | 100.00 | |||||||||
0.1 g/L | 5.00 | 100.00 | 5.67 | 97.01 | 5.00 | 100.00 | |||||||||
0.25 g/L | 5.00 | 100.00 | 5.00 | 100.00 | 5.00 | 100.00 | |||||||||
0.5 g/L | 5.00 | 100.00 | 5.00 | 100.00 | 5.00 | 100.00 | |||||||||
Y19 | 异噻唑啉酮 | 0.01 mL/L | 16.33 | 23.60 | 25.17 | 9.70 | 25.17 | 2.42 | |||||||
0.05 mL/L | 13.33 | 43.82 | 18.67 | 38.81 | 21.33 | 20.97 | |||||||||
0.1 mL/L | 10.17 | 65.17 | 16.50 | 48.51 | 16.30 | 45.32 | |||||||||
0.25 mL/L | 8.50 | 76.40 | 5.00 | 100.00 | 9.83 | 76.61 | |||||||||
0.5 mL/L | 8.33 | 77.53 | 5.00 | 100.00 | 5.17 | 99.19 | |||||||||
Y22 | 1,2-苯并异噻唑啉-3-酮 | 0.01 g/L | 16.20 | 24.49 | 16.27 | 49.55 | 17.67 | 38.71 | |||||||
0.05 g/L | 13.17 | 44.94 | 10.17 | 76.87 | 14.83 | 52.42 | |||||||||
0.1 g/L | 10.33 | 64.04 | 6.33 | 94.03 | 9.83 | 76.61 | |||||||||
0.25 g/L | 8.67 | 75.28 | 5.67 | 97.01 | 8.83 | 81.45 | |||||||||
0.5 g/L | 5.67 | 95.51 | 5.33 | 98.51 | 5.67 | 96.77 | |||||||||
Y32 | 溴硝醇 | 0.01 g/L | 18.83 | 6.74 | 26.33 | 4.48 | 22.17 | 16.94 | |||||||
0.05 g/L | 17.17 | 17.98 | 21.67 | 25.37 | 20.83 | 23.39 | |||||||||
0.1 g/L | 16.27 | 24.04 | 21.60 | 25.67 | 16.07 | 46.45 | |||||||||
0.25 g/L | 16.13 | 24.94 | 18.00 | 41.79 | 10.67 | 72.58 | |||||||||
0.5 g/L | 12.33 | 50.56 | 13.67 | 61.19 | 7.33 | 88.71 |
编号 | 抑菌剂 | 浓度 | 杂色曲霉ZJ-1 | 枝孢内生菌ZJ-2 | 聚多曲霉ZJ-3 | ||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
菌落直径/mm | 抑菌率/% | 菌落直径/mm | 抑菌率/% | 菌落直径/mm | 抑菌率/% | ||||||||||
CK | 19.83 | 27.33 | 25.67 | ||||||||||||
Y1 | 烯酰·锰锌 | 0.01 g/L | 16.43 | 22.92 | 27.20 | 0.60 | 18.27 | 35.81 | |||||||
0.05 g/L | 12.97 | 46.29 | 22.07 | 23.58 | 15.90 | 47.26 | |||||||||
0.1 g/L | 11.77 | 54.38 | 19.83 | 33.58 | 15.17 | 50.81 | |||||||||
0.25 g/L | 9.67 | 68.54 | 14.07 | 59.40 | 13.17 | 60.48 | |||||||||
0.5 g/L | 7.23 | 84.94 | 5.53 | 97.61 | 12.00 | 66.13 | |||||||||
Y6 | 腐霉·福美双 | 0.01 g/L | 7.33 | 84.27 | 25.67 | 7.46 | 5.00 | 100.00 | |||||||
0.05 g/L | 5.00 | 100.00 | 7.33 | 89.55 | 5.00 | 100.00 | |||||||||
0.1 g/L | 5.00 | 100.00 | 5.67 | 97.01 | 5.00 | 100.00 | |||||||||
0.25 g/L | 5.00 | 100.00 | 5.00 | 100.00 | 5.00 | 100.00 | |||||||||
0.5 g/L | 5.00 | 100.00 | 5.00 | 100.00 | 5.00 | 100.00 | |||||||||
Y19 | 异噻唑啉酮 | 0.01 mL/L | 16.33 | 23.60 | 25.17 | 9.70 | 25.17 | 2.42 | |||||||
0.05 mL/L | 13.33 | 43.82 | 18.67 | 38.81 | 21.33 | 20.97 | |||||||||
0.1 mL/L | 10.17 | 65.17 | 16.50 | 48.51 | 16.30 | 45.32 | |||||||||
0.25 mL/L | 8.50 | 76.40 | 5.00 | 100.00 | 9.83 | 76.61 | |||||||||
0.5 mL/L | 8.33 | 77.53 | 5.00 | 100.00 | 5.17 | 99.19 | |||||||||
Y22 | 1,2-苯并异噻唑啉-3-酮 | 0.01 g/L | 16.20 | 24.49 | 16.27 | 49.55 | 17.67 | 38.71 | |||||||
0.05 g/L | 13.17 | 44.94 | 10.17 | 76.87 | 14.83 | 52.42 | |||||||||
0.1 g/L | 10.33 | 64.04 | 6.33 | 94.03 | 9.83 | 76.61 | |||||||||
0.25 g/L | 8.67 | 75.28 | 5.67 | 97.01 | 8.83 | 81.45 | |||||||||
0.5 g/L | 5.67 | 95.51 | 5.33 | 98.51 | 5.67 | 96.77 | |||||||||
Y32 | 溴硝醇 | 0.01 g/L | 18.83 | 6.74 | 26.33 | 4.48 | 22.17 | 16.94 | |||||||
0.05 g/L | 17.17 | 17.98 | 21.67 | 25.37 | 20.83 | 23.39 | |||||||||
0.1 g/L | 16.27 | 24.04 | 21.60 | 25.67 | 16.07 | 46.45 | |||||||||
0.25 g/L | 16.13 | 24.94 | 18.00 | 41.79 | 10.67 | 72.58 | |||||||||
0.5 g/L | 12.33 | 50.56 | 13.67 | 61.19 | 7.33 | 88.71 |
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