台湾香檬叶总黄酮提取工艺及抗氧化活性筛选

doi:10.11924/j.issn.1000-6850.casb2024-0534

中国农学通报 ›› 2025, Vol. 41 ›› Issue (8): 133-139.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb2024-0534

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台湾香檬叶总黄酮提取工艺及抗氧化活性筛选

王杰¹(), 余晓夏², 何建章¹(), 陈建土¹, 吴美芳¹

¹ 福建省亚热带植物研究所/福建省亚热带植物生理生化重点实验室，福建厦门 361006
² 福建中医药大学，福州 350122

收稿日期:2024-08-15 修回日期:2024-11-27 出版日期:2025-03-15 发布日期:2025-03-14
通讯作者:
何建章，男，1985年出生，福建漳州人，助理研究员，硕士，研究方向：植物经济作物研发。通信地址：361006 福建省厦门市湖里区嘉禾路800号中试基地二楼福建省亚热带植物研究所，E-mail：alltwo@qq.com。
作者简介:
王杰，男，1986年出生，河南南阳人，助理研究员，硕士，研究方向：植物经济作物研发。通信地址：361006 福建省厦门市湖里区嘉禾路800号中试基地二楼福建省亚热带植物研究所，E-mail：418667211@qq.com。
基金资助:
厦门市重大科技计划项目“活性筛选及药效物质基础研究”(3502Z2021005)

Extraction Process and Antioxidant Activities Screening of Total Flavonoids from Citrus depressa Hayat Leaves

WANG Jie¹(), YU Xiaoxia², HE Jianzhang¹(), CHEN Jiantu¹, WU Meifang¹

¹ Fujian Institute of Subtropical Botany, Fujian Key Laboratory of Physiology and Biochemistry for Subtropical Plant, Xiamen Fujian 361006
² Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350122

Received:2024-08-15 Revised:2024-11-27 Published:2025-03-15 Online:2025-03-14

摘要/Abstract

摘要： 为了优化台湾香檬叶总黄酮的提取工艺，并研究其抗氧化活性。本研究以总黄酮提取率为评价指标，单因素试验考察提取溶媒、料液比、提取时间及提取次数对台湾香檬叶总黄酮提取率的影响，通过正交试验进一步优化提取条件；并测定所得提取物对DPPH自由基、ABTS自由基和羟自由基的清除能力及其还原能力。结果表明：台湾香檬叶总黄酮最佳提取工艺为提取溶媒水、料液比1:25 g/mL、回流提取2次、每次提取1 h，得到的台湾香檬叶总黄酮得率为(32.60±2.16) mg/g。台湾香檬叶提取物对DPPH、羟自由基和ABTS的IC₅₀分别为12.03、105.79、1.10 μg/mL，还原能力较强。该提取工艺稳定、可靠，适用于台湾香檬叶总黄酮的提取，所得提取物可作为一种新型的天然抗氧化剂，应用于功能性食品领域。

关键词: 台湾香檬叶, 总黄酮, 提取工艺, 正交试验, 抗氧化

Abstract:

This study aimed to optimize the extraction process of total flavonoids from Citrus depressa Hayat leaves (CDHL), and investigate their antioxidant activities. Total flavonoids yield was used as evaluation index, the effects of extraction solvent, solid-liquid ratio, extraction time, and extraction frequency on the total flavonoids yield from CDHL were investigated by single-factor experiments. The extraction condition was optimized by orthogonal experiment. The antioxidant activity of total flavonoids was studied by measuring the removal capacity of DPPH, ABTS, hydroxyl radicals and the reducing capacity were investigated in vitro. The best extraction process conditions for total flavonoids from CDHL were distilled water reflux for 1 h and 2 times, with liquid ratio of 1:25 (g/mL). The mean extraction of total flavonoids under this condition was (32.60±2.16) mg/g. The IC₅₀ of DPPH, ABTS and hydroxyl radicals were 12.03, 105.79 and 1.10 μg/mL respectively, and its reducing ability was strong. This extraction process was stable and reliable for extracting total flavonoids from CDHL. The total flavonoids from CDHL can be used as a novel natural antioxidant in functional foods.

Key words: Citrus depressa Hayat leaves, total flavonoids, extraction technology, orthogonal test, antioxidation

王杰, 余晓夏, 何建章, 陈建土, 吴美芳. 台湾香檬叶总黄酮提取工艺及抗氧化活性筛选[J]. 中国农学通报, 2025, 41(8): 133-139.

WANG Jie, YU Xiaoxia, HE Jianzhang, CHEN Jiantu, WU Meifang. Extraction Process and Antioxidant Activities Screening of Total Flavonoids from Citrus depressa Hayat Leaves[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2025, 41(8): 133-139.

图/表 11

水平	A时间/h	B次数/次	C料液比/(g/mL)
1	0.5	1	1:15
2	1	2	1:20
3	1.5	3	1:25

表1. 正交试验因素水平表

图1. 不同体积分数乙醇溶媒对台湾香檬叶总黄酮提取率的影响(n=3)

图2. 料液比对台湾香檬叶总黄酮提取率的影响(n=3)

图3. 提取时间对台湾香檬叶总黄酮提取率的影响(n=3)

图4. 提取次数对台湾香檬叶总黄酮提取率的影响(n=3)

试验号	因素				提取率/ (mg/g)
试验号	A提取时间/h	B提取次数/次	C料液比/ (g/mL)	D空白	提取率/ (mg/g)
1	1	1	1	1	23.64
2	1	2	2	2	30.28
3	1	3	3	3	30.01
4	2	1	2	3	26.76
5	2	2	3	1	31.62
6	2	3	1	2	29.49
7	3	1	3	2	26.94
8	3	2	1	3	28.89
9	3	3	2	1	30.87
K₁	27.98	25.79	27.34	28.71	—
K₂	29.29	30.26	29.30	28.90	—
K₃	28.90	30.12	29.52	28.55	—
R	1.31	4.48	2.18	0.35	—

表2. 正交试验结果及直观分析结果

方差来源	离差平方和	自由度	均方	F	P
A提取时间	2.73	2	1.36	14.83	>0.05
B提取次数	38.98	2	19.48	211.87	<0.05
C料液比	8.67	2	4.34	47.12	<0.05
误差	0.18	2	0.09	—	—

表3. 正交试验结果方差分析

图5. 台湾香檬叶总黄酮对DPPH自由基的清除能力

图6. 台湾香檬叶总黄酮对ABTS自由基的清除能力

图7. 台湾香檬叶总黄酮对羟自由基的清除能力

图8. 台湾香檬叶总黄酮的总还原能力

参考文献 27

[1]	赖瑞云, 黄珺梅, 林建忠, 等. 台湾香檬在厦门地区的引种初报[J]. 亚热带植物科学, 2018, 47(3):289-291.
[2]	SALMAH Y, MOHD G H, SWEE K G. Naringin content in local citrus fruits[J]. Food chemistry, 1990, 37(2):113-121.
[3]	谷乐, 刘韶松, 何丽娟, 等. 台湾香檬果皮川陈皮素分离制备及其抗肿瘤活性研究[J]. 亚热带植物科学, 2021, 50(2):83-87.
[4]	CHIEN W, SAPUTRI D S, LIN H. Valorization of Taiwan's Citrus depressa Hayata peels as a source of nobiletin and tangeretin using simple ultrasonic-assisted extraction[J]. Current research in food science, 2022, 5:278-287.
[5]	YONATHAN A, GOKI M, HAJIME T, et al. Cultivation line and fruit ripening discriminations of Shiikuwasha (Citrus depressa Hayata) peel oils using aroma compositional, electronic nose, and antioxidant analyses[J]. Food research international, 2015, 67(Jan.): 108-110.
[6]	MINAGAWA A, OTANI Y, KUBOTA T, et al. The citrus flavonoid, nobiletin, inhibits peritoneal dissemination of human gastric carcinoma in SCID mice[J]. Japanese journal of cancer research: Gann, 2001, 92(12):1322-1328.
[7]	SHINICHI U, HIROFUMI Y, RYU M, et al. Synergistic antitumor effect of a combination of paclitaxel and carboplatin with nobiletin from Citrus depressa on non-small-cell lung cancer cell lines[J]. Planta medica, 2014, 80(6):452-457. doi: 10.1055/s-0034-1368321 pmid: 24687742
[8]	AKACHI T, SHIINA Y, OHISHI Y, et al. Hepatoprotective effects of flavonoids from Shekwasha (Citrus depressa) against D-galactosamine-induced liver injury in rats[J]. Journal of nutritional science and vitaminology, 2010, 56(1):60-67. pmid: 20354348
[9]	EUN Y L, SE H K, SUKKUM N C, et al. Efficacy of polymethoxylated flavonoids from citrus depressa extract on alcohol-induced liver injury in mice[J]. Biotechnology and bioprocess engineering, 2019, 24(6):907-914.
[10]	CHIEN W, SAPUTRI D S, LIN H Y. Valorization of Taiwan's Citrus depressa Hayata peels as a source of nobiletin and tangeretin using simple ultrasonic-assisted extraction[J]. Current research in food science, 2022,5:278-287.
[11]	YONATHAN A, IKUKO T, SAYURI I, et al. Volatile aroma components and antioxidant activities of the flavedo peel extract of unripe Shiikuwasha (Citrus depressa Hayata)[J]. Journal of food science, 2012, 77(4):445-469.
[12]	KAZUNA M, SHOKO W, TOMOKO F, et al. Quality improvement of Shiikuwasha (Citrus depressa Hayata) juice by combining anion exchange treatment and insoluble pulp addition[J]. Journal of the Japanese society for food science and technology-nippon Shokuhin Kagaku Kogaku Kaishi, 2009, 56(4):193-199.
[13]	KAZUNA M, TOMOKO F, NOBUYUKI K, et al. Effect of some extracting methods and storage temperature on quality stability of Shiikuwasha (Citrus depressa Hayata) fruit juice during storage: stability of polymethoxylated flavones and synephrine[J]. Food preservation science, 2009, 35(1):3-9.
[14]	王杰. 驯化台湾香檬中川陈皮素与辛弗林的鉴别与测定[J]. 海峡药学, 2022, 34(12):48-52.
[15]	孙国艳, 李华, 杨长花, 等. 响应面法优化淫羊藿总黄酮的提取工艺[J]. 化学与生物工程, 2022, 39(11):37-41.
[16]	刘威良, 蔡建, 高文荣, 等. 云南野生火棘叶甾醇提取工艺优化及体外活性研究[J]. 食品工业科技, 2024, 45(11):1-8.
[17]	郭瑛, 赵文惠, 李安林, 等. 疏花蔷薇花总多酚提取工艺优化及其抗氧化活性[J]. 食品研究与开发, 2024, 45(3):116-122.
[18]	王源, 宋梦楠, 刘忍阳, 等. 杜鹃兰叶总黄酮提取工艺的优化及抗氧化活性研究[J]. 湖北医药学院学报, 2023, 42(1):1-6.
[19]	陈桐, 侯林清, 覃凡倚, 等. 竹叶柴胡总黄酮提取及抗氧化作用研究[J]. 辽宁化工, 2023, 52(2):187-189.
[20]	夏雨弘, 刘颖, 周茗, 等. 小二仙草总黄酮提取工艺的优化及其抗氧化活性分析[J]. 食品工业科技, 2023, 44(18):244-250.
[21]	李东香, 关荣发, 黄海智, 等. 3种新疆沙棘黄酮的提取优化及抗氧化活性对比[J]. 中国食品学报, 2023, 23(4):157-167.
[22]	桂利利, 吴正坤, 余惠凡, 等. 黄药叶总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性研究[J]. 食品研究与开发, 2021, 42(19):100-108.
[23]	李金金, 孟琦, 崔馨燕, 等. 响应面法优化地参三萜酸提取工艺及抗氧化活性分析[J]. 南方农业学报, 2022, 53(8):2261-2271.
[24]	李兰, 段政, 汤有宏, 等. 金银花总黄酮的提取工艺及其抗氧化性研究[J]. 酿酒, 2022, 49(6):131-136.
[25]	贺敬霞, 牟倩倩, 杨滨, 等. 中药黄酮类成分提取工艺研究进展[J]. 亚太传统医药, 2017, 13(15):30-36. doi: 10.11954/ytctyy.201715013
[26]	王慧. 低共熔溶剂在黄芩有效成分提取及制备中的应用研究[D]. 太原: 山西大学, 2019.
[27]	李婷婷. 微波辅助低共熔溶剂提取黄芩中主要黄酮成分研究[D]. 哈尔滨: 东北林业大学, 2014.

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[1]	符梅, 李桂花, 罗文龙, 骆善伟, 郭巨先. 基于广泛靶向代谢组学的芋头代谢物和抗氧化酶活性的差异分析[J]. 中国农学通报, 2025, 41(6): 118-125.
[2]	丛添玥, 邢翔宇, 尤梦瑶, 程丽, 郑春英. 基于黄酮类化合物生物合成的工业大麻内生真菌HMY07次生代谢产物研究[J]. 中国农学通报, 2025, 41(5): 56-62.
[3]	段永强, 刘洪岩, 王明华, 钟立强, 苏超凡, 刘炬, 陈校辉, 张世勇. 盐度胁迫对斑点叉尾鮰幼鱼生长及组织酶活性的影响[J]. 中国农学通报, 2025, 41(5): 143-150.
[4]	陈芬, 李恺, 张雪梅, 李应龙, 段柯帆, 曹恒茂, 高鑫, 张景华, 黄敏, 董瑜. 硼硅对烤烟马铃薯Y病毒病防效与抗氧化酶活性的影响[J]. 中国农学通报, 2025, 41(4): 108-113.
[5]	闫晓花, 曹甜, 张国斌. 水分胁迫对黄瓜幼苗根系生长及抗氧化酶系统的影响[J]. 中国农学通报, 2025, 41(4): 31-38.
[6]	洪自强, 王晓苹, 苏明, 苏丽, 白柳静, 张正珍, 杨涓, 吴宏亮, 康建宏. 地表覆盖对枸杞光合特性、抗氧化指标及产量的影响[J]. 中国农学通报, 2025, 41(1): 63-68.
[7]	李勇, 赖旭辉, 李春梅, 姚琼, 刘凯. 匙羹藤的应用及研究进展[J]. 中国农学通报, 2025, 41(1): 89-95.
[8]	薛彤彤, 谢萌蒙, 孙辉, 李冲伟. 外源添加苯甲酸对紫苏种子发芽和幼苗生长的影响[J]. 中国农学通报, 2024, 40(7): 72-77.
[9]	毛雪, 殷博, 张欣, 刘煜, 辛丽欣, 孔祥辉, 王佳龙. 破壁灵芝孢子粉多糖抗氧化活性及稳定性研究[J]. 中国农学通报, 2024, 40(35): 130-137.
[10]	徐建伟, 闫紫欣, 朱金成, 茹思博, 刘文红, 李志博. 抗坏血酸提高棉花种子萌发耐盐性及其生理机制[J]. 中国农学通报, 2024, 40(33): 53-60.
[11]	肖雯丽, 王含瑞, 王梦亮, 王俊红. 盐碱胁迫下植物响应机制的研究进展[J]. 中国农学通报, 2024, 40(33): 78-85.
[12]	张泰劼, 郭文磊, 田兴山, 张纯. 香豆素对白花鬼针种子萌发及生长的影响[J]. 中国农学通报, 2024, 40(31): 111-118.
[13]	张红磊, 邓欣, 姜艳芳, 李思琴, 刘泽发, 党建成, 王亚楠. 锑对甜瓜种子萌发及幼苗生理特征的影响[J]. 中国农学通报, 2024, 40(31): 23-29.
[14]	王化, 金欢欢, 于晓颖, 李梦莎, 何丹娆, 周丽萍. 基于均匀试验设计的3种浆果花色苷体外协同抗氧化研究[J]. 中国农学通报, 2024, 40(30): 141-148.
[15]	武奕彤, 吕陈生, 刘亚冬, 李开叶. 2种不同种衣剂对玉米‘黑糯100’生长状况和抗氧化防御系统的影响[J]. 中国农学通报, 2024, 40(3): 46-53.