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中国农学通报 ›› 2010, Vol. 26 ›› Issue (11): 215-217.

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利用正交试验优化玫瑰SRAP-PCR反应体系

徐宗大,赵兰勇,杨志莹   

  • 收稿日期:2010-01-04 修回日期:2010-01-28 出版日期:2010-06-05 发布日期:2010-06-05
  • 基金资助:

    山东省良种产业化资助项目

Optimization for SRAP-PCR System of Rosa rugosa Based on Orthogonal Design

Xu Zongda, Zhao Lanyong,Yang Zhiying   

  • Received:2010-01-04 Revised:2010-01-28 Online:2010-06-05 Published:2010-06-05

PDF (PC)

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摘要：

采用L16(45)正交试验对玫瑰SRAP-PCR反应体系进行优化。结果表明，各因素对PCR反应的影响程度从大到小依次为：Taq酶，dNTPs，引物，Mg2+，模板；建立了玫瑰SRAP-PCR反应最佳体系（25μL）为Mg2+ 2.0 mmol/L，dNTPs 0.20 mmol/L，Taq酶1.5U，引物0.25 μmol/L，模板 1.0 ng/μl；采用不同的模板和引物对体系进行验证，表明该体系适合于玫瑰的SRAP-PCR反应

关键词: 玉米, 玉米, 小麦, 种子, 休眠性, QTL, 比较

Abstract:

The orthogonal design was employed to optimize SRAP-PCR amplification .The results showed that the order of factors which affect on the result of PCR are Taq polymerase ,primers ,dNTPs , Mg2+ and DNA . A suitable SRAP-PCR system for Rose rugosa is that total 25μL reaction system containing 2.0 mmol/L Mg2+ , 0.20 mmol/L dNTPs , 1.5U Taq polymerase , 0.25 μmol/L primers and 1.0 ng/μl DNA. Use other primers and DNAs to test the system , the results showed that the system can be used in Rose rugosa.