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中国农学通报 ›› 2010, Vol. 26 ›› Issue (20): 33-37.

所属专题： 园艺

• 生物技术科学 • 上一篇    下一篇

葡萄“5BB”品种SRAP-PCR反应体系影响因素

金美玉 修景润 廉美兰 朴炫春   

  • 收稿日期:2010-07-09 修回日期:2010-07-30 出版日期:2010-10-20 发布日期:2010-10-20
  • 基金资助:

    延边大学科技发展计划项目

Influence Factors of the SRAP-PCR Reaction System on Grape 5BB

  • Received:2010-07-09 Revised:2010-07-30 Online:2010-10-20 Published:2010-10-20

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摘要：

[研究目的] 建立适合葡萄“5BB”品种的 SRAP-PCR 反应体系。[方法] 利用正交设计对葡萄 SRAP-PCR 反应体系五种因素(Taq酶，Mg2+，模板DNA，dNTP，引物)的四个水平进行优化。[结果] 各因素水平变化对 PCR 反应的影响从大到小顺序为：Mg2+，引物，dNTP，Taq酶，模板DNA；筛选出各因素的最佳水平，建立了葡萄“5BB”品种SRAP-PCR 反应的最佳体系(20 μL)为：Taq酶 2 U，Mg2+ 2.0 mmol/L，模板DNA 60 ng，dNTP 0.25 mmol/L，引物0.10 μmol/L。[结论] 这一优化系统的建立为今后利用SRAP标记技术对葡萄进行相关研究提供了帮助。

关键词: 水产养殖, 水产养殖, 循环水养殖系统, pH值, 碱性试剂

Abstract:

To established a SRAP-PCR reaction system for the grape 5BB. In this paper, the orthogonal design was used to optimize SRAP-PCR amplification system on grape on four levels of five factors (Taq DNA polymerase, Mg2+, DNA template, dNTPs, and primer, respectively). The results showed the order of each factor in different levels affected on the result of PCR was Mg2 + , primer, dNTPs,Taq DNA polymerase and DNA template. A most suitable SRAP-PCR system for grape 5BB was established that was total 20 μL reaction system containing 2 UTaq DNA polymerase, 2.0 mmol/L Mg2+, 60 ng DNA template, 0.25 mmol/L dNTPs, and 0.10 μmol/L primer. This optimized system for SRAP marker would become one of the protocols for further research on grape.