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中国农学通报 ›› 2013, Vol. 29 ›› Issue (13): 106-113.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.2012-3317

所属专题： 园艺

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叶用莴苣荧光定量PCR体系的优化

李婷 韩莹琰 范双喜 任月   

  • 收稿日期:2012-10-08 修回日期:2012-11-16 出版日期:2013-05-05 发布日期:2013-05-05

Optimization of Lactuca sativa L. Real-time PCR system

  • Received:2012-10-08 Revised:2012-11-16 Online:2013-05-05 Published:2013-05-05

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摘要： 为建立一套最适合叶用莴苣(Lactuca sativa L.)基因表达量研究的荧光定量PCR技术体系，以叶用莴苣S24为试材，采用SYBR GreenⅠ法，利用叶用莴苣内参基因的2对引物组合18SR1和18SR2，分别在10 μL和20 μL反应体系条件下进行扩增反应。结果表明，分别在10 μL和20 μL反应体系条件下内参基因引物组合18SR1的扩增曲线、标准曲线以及溶解曲线等指标都优于内参基因引物组合18SR2；2对内参基因引物组合18SR1和18SR2在10 μL反应体系中的扩增曲线、标准曲线以及溶解曲线等指标也均优于20 μL反应体系。因此叶用莴苣荧光定量PCR内参基因利用18SR1引物组合，反应体系采用10 μL比较合理。

关键词: 主成分分析, 主成分分析

Abstract: In order to establish a method Real-time PCR for gene expression quantity study of Lactuca sative L.,with leaves of Lactuca sativa L. (S24) as material, we used SYBR GreenⅠmethod, compared two pairs of primers 18SR1/18SR2 in 10μL and 20μL reaction system related index though the amplification of Real-time PCR，the standard curve of Real-time PCR and the melt curve of Real-time PCR.Choose the optimal Real-time PCR system and house keeping gene primers in Lactuca sativa L.