不同产地林下三叶青多糖指纹图谱研究

doi:10.11924/j.issn.1000-6850.casb2021-0372

中国农学通报 ›› 2021, Vol. 37 ›› Issue (27): 139-145.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb2021-0372

所属专题：园艺

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不同产地林下三叶青多糖指纹图谱研究

訾豪然¹^,²(), 许海顺¹^,², 吴盛楠¹^,², 张单柠¹^,², 徐娟¹^,², 白岩¹^,², 王红珍¹^,², 吴学谦¹^,²()

¹浙江农林大学,杭州 311300
²浙江省特色中药资源保护与创新利用重点实验室,杭州 311300

收稿日期:2021-04-09 修回日期:2021-07-13 出版日期:2021-09-25 发布日期:2021-10-28
通讯作者: 吴学谦
作者简介:訾豪然,男,1995年出生,河南温县人,硕士研究生,研究方向：中药活性成分研究。通信地址：311300 浙江省杭州市临安区武肃街666号浙江农林大学,Tel：13756905956,E-mail： 2115973906@qq.com。
基金资助:
浙江省公益技术研究计划项目/工业“三叶青的抗炎物质基础分析及新型质量评价体系构建”(LGG21H280002);浙江省重点研发计划项目“金线莲等名贵药材种苗繁育及高效栽培技术研究”(2017C02012);浙江农林大学科研发展基金人才启动项目“浙产特色药材绿色发展关键技术及保健食品研发”(2016FR010);中央财政林业科技推广项目“抗病毒中药三叶青林下袋式高质量生产技术应用示范”(2019TS08)

Under-forest Tetrastigma hemsleyanum: Polysaccharide Fingerprint in Different Producing Areas

Zi Haoran¹^,²(), Xu Haishun¹^,², Wu Shengnan¹^,², Zhang Danning¹^,², Xu Juan¹^,², Bai Yan¹^,², Wang Hongzhen¹^,², Wu Xueqian¹^,²()

¹Zhejiang A&F University, Hangzhou 311300
²Zhejiang Provincial Key Laboratory of Resources Protection and Innovation of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou 311300

Received:2021-04-09 Revised:2021-07-13 Online:2021-09-25 Published:2021-10-28
Contact: Wu Xueqian

摘要/Abstract

摘要：

建立三叶青多糖指纹图谱评价体系,对三叶青进行来源鉴别和质量控制。以不同产地三叶青为材料,用PMP柱前衍生化-HPLC法和化学计量学分析,测定三叶青多糖图谱及其单糖含量和组成比例。建立了不同产地三叶青多糖图谱及其共有模式,并确定了葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖等8个单糖色谱峰。各批样品之间相似度较高,在0.934~0.997之间。根据主成分因子得分发现遂昌的多糖质量最好,温州的次之。经测定其单糖组成,得到甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖的含量较高,分别为9.094%、11.451%、56.695%和11.030%,其中半乳糖是三叶青多糖的主要组成成分。本研究建立了三叶青多糖指纹图谱并测定出其中单糖组成及其含量,该方法稳定可靠,可用于三叶青的来源鉴别和质量控制。

关键词: 三叶青, 多糖, 柱前衍生化, 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮, 指纹图谱

Abstract:

The evaluation system of polysaccharide fingerprint was established to identify the source and control the quality of Tetrastigma hemsleyanum. T. hemsleyanum from different areas were used as materials, the polysaccharide spectrum, monosaccharide content and composition of T. hemsleyanum from different areas were determined by PMP pre-column derivatization-HPLC and chemometric analysis. The polysaccharide fingerprint and its common pattern were established for different origins, and 8 monosaccharide chromatographic peaks such as glucose, rhamnose and arabinose were determined. The similarity of each batch of samples was high, ranging from 0.934 to 0.997. According to the score of principal component factor, the quality of polysaccharide from Suichang was the best, followed by that from Wenzhou. The composition of its monosaccharides was determined, and high content of mannose, glucose, galactose and arabinose were obtained, which was 9.094%, 11.451%, 56.695% and 11.030%, respectively, with galactose being the main component of the polysaccharide of T. hemsleyanum. In this study, we established the polysaccharides fingerprint of T. hemsleyanum and determined the composition and content of monosaccharides. The method is stable and reliable, and can be used for the source identification and quality control of T. hemsleyanum.

Key words: Tetrastigma hemsleyanum, polysaccharide, pre-column derivatization, PMP, fingerprints

中图分类号:

S567
R931.5

訾豪然, 许海顺, 吴盛楠, 张单柠, 徐娟, 白岩, 王红珍, 吴学谦. 不同产地林下三叶青多糖指纹图谱研究[J]. 中国农学通报, 2021, 37(27): 139-145.

Zi Haoran, Xu Haishun, Wu Shengnan, Zhang Danning, Xu Juan, Bai Yan, Wang Hongzhen, Wu Xueqian. Under-forest Tetrastigma hemsleyanum: Polysaccharide Fingerprint in Different Producing Areas[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2021, 37(27): 139-145.

图/表 13

参考文献 28

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编号	来源	编号	来源
S1	浙江临安	S6	浙江温州
S2	浙江遂昌	S7	贵州毕节
S3	浙江淳安	S8	贵州都匀
S4	浙江宁波	S9	广西桂林
S5	浙江台州	S10	广西河池

编号	来源	编号	来源
S1	浙江临安	S6	浙江温州
S2	浙江遂昌	S7	贵州毕节
S3	浙江淳安	S8	贵州都匀
S4	浙江宁波	S9	广西桂林
S5	浙江台州	S10	广西河池

样品	含量/(mg/g)	RSD/%	纯度/%	样品	含量/(mg/g)	RSD/%	纯度/%
S1	29.030	0.872	83.42	S6	32.926	0.561	74.05
S2	35.586	0.901	87.36	S7	19.021	1.105	82.67
S3	18.182	0.758	80.11	S8	22.528	0.678	80.42
S4	17.005	0.350	78.93	S9	15.081	0.395	86.13
S5	24.895	0.076	73.83	S10	20.015	0.797	75.28

样品	含量/(mg/g)	RSD/%	纯度/%	样品	含量/(mg/g)	RSD/%	纯度/%
S1	29.030	0.872	83.42	S6	32.926	0.561	74.05
S2	35.586	0.901	87.36	S7	19.021	1.105	82.67
S3	18.182	0.758	80.11	S8	22.528	0.678	80.42
S4	17.005	0.350	78.93	S9	15.081	0.395	86.13
S5	24.895	0.076	73.83	S10	20.015	0.797	75.28

主成分因子	特征值	方差贡献率/%	累积方差贡献率/%
1	3.476	43.452	43.452
2	2.893	36.166	79.618

不同产地林下三叶青多糖指纹图谱研究

Under-forest Tetrastigma hemsleyanum: Polysaccharide Fingerprint in Different Producing Areas

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单糖	主成分1	主成分2
甘露糖	0.037	0.951
氨基葡萄糖	0.656	0.226
鼠李糖	0.895	0.089
葡萄糖醛酸	0.383	0.857
半乳糖醛酸	0.878	0.175
葡萄糖	0.667	-0.676
半乳糖	0.050	0.903
阿拉伯糖	0.870	-0.117

编号	主成分因子1得分	排序	主成分因子2得分	排序	综合得分	排序
S1	1.220	3	-1.610	8	0.480	3
S2	3.530	1	1.210	2	0.750	1
S3	-0.800	7	0.360	6	-0.110	7
S4	-0.300	6	1.700	3	0.290	4
S5	1.950	2	-0.050	7	0.080	5
S6	0.060	5	2.190	1	0.650	2
S7	-2.130	9	-2.310	9	-0.990	10
S8	-2.430	10	0.370	5	-0.490	8
S9	-1.490	8	0.930	4	-0.090	6
S10	0.390	4	-2.800	10	-0.580	9

编号	产地	甘露糖	氨基葡萄糖	鼠李糖	葡萄糖醛酸	半乳糖醛酸	葡萄糖	半乳糖	阿拉伯糖
S1	临安	8.748	3.265	7.065	4.292	3.071	31.341	33.713	12.972
S2	遂昌	10.681	4.571	9.860	6.805	5.007	43.191	82.242	32.547
S3	淳安	12.072	2.057	5.291	8.156	4.034	11.493	89.838	11.390
S4	宁波	17.574	2.473	6.775	6.168	3.551	10.474	98.979	13.876
S5	台州	18.763	5.375	3.582	5.315	4.333	7.020	113.489	18.812
S6	温州	16.467	4.526	9.073	8.463	5.029	12.929	80.505	16.607
S7	毕节	6.410	2.399	3.595	3.136	3.042	8.994	52.198	9.872
编号	产地	甘露糖	氨基葡萄糖	鼠李糖	葡萄糖醛酸	半乳糖醛酸	葡萄糖	半乳糖	阿拉伯糖
S8	都匀	15.826	1.586	3.888	6.038	2.846	8.038	89.257	9.151
S9	桂林	17.093	1.846	4.620	3.852	2.690	6.705	112.205	12.698
S10	河池	12.549	3.019	7.433	7.544	4.136	13.786	79.082	13.383
平均值		13.618	3.112	6.118	5.977	3.774	15.397	83.151	15.131

编号	产地	甘露糖	氨基葡萄糖	鼠李糖	葡萄糖醛酸	半乳糖醛酸	葡萄糖	半乳糖	阿拉伯糖
S1	临安	6.305	3.164	4.922	3.218	2.388	34.861	31.323	13.819
S2	遂昌	5.787	2.030	4.622	4.153	2.637	22.889	40.198	17.683
S3	淳安	8.821	1.562	2.890	4.794	2.459	5.534	65.431	8.511
S4	宁波	10.790	1.663	3.275	3.290	1.916	6.997	61.812	10.257
S5	台州	10.101	3.119	2.747	4.083	2.018	4.677	63.154	10.102
S6	温州	10.634	3.190	4.598	4.616	2.844	7.842	53.408	12.868
S7	毕节	7.555	2.794	3.011	2.827	2.844	11.026	58.302	11.642
S8	都匀	11.541	1.286	2.266	3.786	1.851	5.756	67.361	6.153
S9	桂林	10.396	1.219	2.143	2.501	1.425	4.051	69.046	9.218
S10	河池	9.007	2.266	4.012	4.382	2.491	10.879	56.920	10.043
平均值		9.094	2.229	3.448	3.765	2.287	11.451	56.695	11.030

编号	产地	甘露糖	氨基葡萄糖	鼠李糖	葡萄糖醛酸	半乳糖醛酸	葡萄糖	半乳糖	阿拉伯糖
S1	临安	1.000	0.312	0.886	0.455	0.298	3.583	3.854	1.780
S2	遂昌	1.000	0.358	1.013	0.591	0.398	4.044	7.700	3.656
S3	淳安	1.000	0.142	0.481	0.627	0.284	0.952	7.442	1.132
S4	宁波	1.000	0.118	0.423	0.326	0.172	0.596	5.632	0.947
S5	台州	1.000	0.239	0.210	0.263	0.196	0.374	6.048	1.203
S6	温州	1.000	0.230	0.605	0.477	0.259	0.785	4.889	1.210
S7	毕节	1.000	0.313	0.615	0.454	0.403	1.403	8.143	1.848
S8	都匀	1.000	0.084	0.270	0.354	0.153	0.508	5.640	0.694
S9	桂林	1.000	0.090	0.297	0.209	0.134	0.392	6.564	0.891
S10	河池	1.000	0.201	0.650	0.558	0.280	1.099	6.302	1.280
平均值		1.000	0.209	0.545	0.431	0.258	1.374	6.221	1.464

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时间/min	A/%	B/%
0	17	83
9	20	80
18	22	78
26	25	75
40	37	63

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9	20	80
18	22	78
26	25	75
40	37	63