中国农学通报 ›› 2026, Vol. 42 ›› Issue (11): 39-49.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb2025-0684
王姣姣1(
), 李静1, 王红丽1,2, 赵婧1, 孙坤1, 陈大为1(
)
收稿日期:2025-08-13
修回日期:2025-12-11
出版日期:2026-06-12
发布日期:2026-06-12
通讯作者:
作者简介:王姣姣,女,2003年出生,甘肃陇南人,研究生在读,研究方向:微生物学。通信地址:730070 甘肃省兰州市安宁区邱家湾27号 西北师范大学生命科学学院,Tel:0931-7971770,E-mail:18294578949@163.com。
基金资助:
WANG Jiaojiao1(
), LI Jing1, WANG Hongli1,2, ZHAO Jing1, SUN Kun1, CHEN Dawei1(
)
Received:2025-08-13
Revised:2025-12-11
Published:2026-06-12
Online:2026-06-12
摘要:
针对当前木霉菌剂产业化中液体发酵成本高、孢子产量低、固体发酵工艺粗放等问题,为实现具有促生抑菌活性的桔绿木霉(Trichoderma citrinoviride)HT-1分生孢子的低成本高效生产。本研究以农业废弃物为固体发酵基质,采用单因素试验、正交优化与响应面法(RSM),系统优化菌株HT-1的固体发酵基质配比与发酵条件,并通过盆栽试验验证其发酵产物对小麦、番茄幼苗的促生效果。结果表明:最优固体培养基质配比为玉米秸秆:麦麸:花生壳:棉籽壳=2:2:3:1;关键发酵参数为接种量14.22%,含水量48.89%,发酵时间13.27 d,此条件下菌株HT-1产孢量最高,达到了1.01×1011个/g;盆栽试验显示,发酵产物可显著提升小麦、番茄的株高、根长、鲜重与干重(P<0.05)。本研究建立了一套农业废弃物资源化、高产孢量、工艺稳定的桔绿木霉固体发酵技术,为桔绿木霉HT-1菌株的生物菌剂产业化开发与绿色农业应用提供了科学依据与技术支撑,后续可进一步开展制剂化、田间稳定性与促生机制研究。
中图分类号:
王姣姣, 李静, 王红丽, 赵婧, 孙坤, 陈大为. 桔绿木霉HT-1分生孢子固体发酵优化及其对2种作物幼苗生长的影响[J]. 中国农学通报, 2026, 42(11): 39-49.
WANG Jiaojiao, LI Jing, WANG Hongli, ZHAO Jing, SUN Kun, CHEN Dawei. Optimization of Solid-state Fermentation of Trichoderma citrinoviride HT-1 Conidia and Its Effect on Two Crop Seedlings Growth[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2026, 42(11): 39-49.
| 名称 | 配方 |
|---|---|
| 麦麸培养基 | 100 g麦麸,1000 mL蒸馏水 |
| 大米培养基 | 100 g大米,1000 mL蒸馏水 |
| 黄豆培养基 | 100 g黄豆,1000 mL蒸馏水 |
| 玉米培养基 | 100 g玉米,1000 mL蒸馏水 |
| 马铃薯葡糖糖培养基 | 200 g马铃薯,20 g葡萄糖,1000 mL蒸馏水 |
| 名称 | 配方 |
|---|---|
| 麦麸培养基 | 100 g麦麸,1000 mL蒸馏水 |
| 大米培养基 | 100 g大米,1000 mL蒸馏水 |
| 黄豆培养基 | 100 g黄豆,1000 mL蒸馏水 |
| 玉米培养基 | 100 g玉米,1000 mL蒸馏水 |
| 马铃薯葡糖糖培养基 | 200 g马铃薯,20 g葡萄糖,1000 mL蒸馏水 |
| 序号 | 因素 | 产孢量/(×1010个/g) | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 玉米秸秆 | 麦麸 | 花生壳 | 棉籽壳 | ||
| 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 7.45±0.23 b |
| 2 | 1 | 2 | 2 | 2 | 4.83±0.13 d |
| 3 | 1 | 3 | 3 | 3 | 4.83±0.28 d |
| 4 | 2 | 1 | 2 | 3 | 6.87±0.08 c |
| 5 | 2 | 2 | 3 | 1 | 8.57±0.32 a |
| 6 | 2 | 3 | 1 | 2 | 2.42±0.28 f |
| 7 | 3 | 1 | 3 | 2 | 3.55±0.05 e |
| 8 | 3 | 2 | 1 | 3 | 3.90±0.22 e |
| 9 | 3 | 3 | 2 | 1 | 6.53±0.60 c |
| 序号 | 因素 | 产孢量/(×1010个/g) | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 玉米秸秆 | 麦麸 | 花生壳 | 棉籽壳 | ||
| 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 7.45±0.23 b |
| 2 | 1 | 2 | 2 | 2 | 4.83±0.13 d |
| 3 | 1 | 3 | 3 | 3 | 4.83±0.28 d |
| 4 | 2 | 1 | 2 | 3 | 6.87±0.08 c |
| 5 | 2 | 2 | 3 | 1 | 8.57±0.32 a |
| 6 | 2 | 3 | 1 | 2 | 2.42±0.28 f |
| 7 | 3 | 1 | 3 | 2 | 3.55±0.05 e |
| 8 | 3 | 2 | 1 | 3 | 3.90±0.22 e |
| 9 | 3 | 3 | 2 | 1 | 6.53±0.60 c |
| 编号 | A | B | C | D | E | F | G | 产孢量/(×1010个/g) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 1 | -1 | 1 | -1 | -1 | -1 | 1 | 1.77±0.11i |
| 2 | 1 | 1 | -1 | 1 | -1 | -1 | -1 | 4.43±0.10f |
| 3 | -1 | 1 | 1 | -1 | 1 | -1 | -1 | 6.80±0.05b |
| 4 | 1 | -1 | 1 | 1 | -1 | 1 | -1 | 3.68±0.09g |
| 5 | 1 | 1 | -1 | 1 | 1 | -1 | 1 | 2.05±0.03h |
| 6 | 1 | 1 | 1 | -1 | 1 | 1 | -1 | 6.53±0.12c |
| 7 | -1 | 1 | 1 | 1 | -1 | 1 | 1 | 9.78±0.14a |
| 8 | -1 | -1 | 1 | 1 | 1 | -1 | 1 | 6.12±0.02d |
| 9 | -1 | -1 | -1 | 1 | 1 | 1 | -1 | 5.17±0.02e |
| 10 | 1 | -1 | -1 | -1 | 1 | 1 | 1 | 1.05±0.03j |
| 11 | -1 | 1 | -1 | -1 | -1 | 1 | 1 | 4.20±0.08f |
| 12 | -1 | -1 | -1 | -1 | -1 | -1 | -1 | 1.00±0.10j |
| 编号 | A | B | C | D | E | F | G | 产孢量/(×1010个/g) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 1 | -1 | 1 | -1 | -1 | -1 | 1 | 1.77±0.11i |
| 2 | 1 | 1 | -1 | 1 | -1 | -1 | -1 | 4.43±0.10f |
| 3 | -1 | 1 | 1 | -1 | 1 | -1 | -1 | 6.80±0.05b |
| 4 | 1 | -1 | 1 | 1 | -1 | 1 | -1 | 3.68±0.09g |
| 5 | 1 | 1 | -1 | 1 | 1 | -1 | 1 | 2.05±0.03h |
| 6 | 1 | 1 | 1 | -1 | 1 | 1 | -1 | 6.53±0.12c |
| 7 | -1 | 1 | 1 | 1 | -1 | 1 | 1 | 9.78±0.14a |
| 8 | -1 | -1 | 1 | 1 | 1 | -1 | 1 | 6.12±0.02d |
| 9 | -1 | -1 | -1 | 1 | 1 | 1 | -1 | 5.17±0.02e |
| 10 | 1 | -1 | -1 | -1 | 1 | 1 | 1 | 1.05±0.03j |
| 11 | -1 | 1 | -1 | -1 | -1 | 1 | 1 | 4.20±0.08f |
| 12 | -1 | -1 | -1 | -1 | -1 | -1 | -1 | 1.00±0.10j |
| 因子 | 效应 | T值 | P值 | 重要性排序 |
|---|---|---|---|---|
| A | -2.258 | -2.74 | 0.034 | 3 |
| B | 2.503 | 3.04 | 0.023 | 2 |
| C | 2.797 | 3.39 | 0.015 | 1 |
| E | 1.647 | 2.00 | 0.093 | 4 |
| F | 0.475 | 0.58 | 0.585 | 5 |
| 因子 | 效应 | T值 | P值 | 重要性排序 |
|---|---|---|---|---|
| A | -2.258 | -2.74 | 0.034 | 3 |
| B | 2.503 | 3.04 | 0.023 | 2 |
| C | 2.797 | 3.39 | 0.015 | 1 |
| E | 1.647 | 2.00 | 0.093 | 4 |
| F | 0.475 | 0.58 | 0.585 | 5 |
| 编号 | A:接种量/% | B:含水量/% | C:发酵时间/d | 产孢量/(×1010个/g) |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 15 | 20 | 7 | 3.87±0.06f |
| 2 | 12.5 | 30 | 10 | 5.23±0.19e |
| 3 | 10 | 40 | 14 | 9.90±0.10a |
| 4 | 7.5 | 50 | 17 | 6.58±0.04b |
| 5 | 5 | 60 | 21 | 6.18±0.09c |
| 6 | 2.5 | 70 | 24 | 5.60±0.16d |
| 编号 | A:接种量/% | B:含水量/% | C:发酵时间/d | 产孢量/(×1010个/g) |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 15 | 20 | 7 | 3.87±0.06f |
| 2 | 12.5 | 30 | 10 | 5.23±0.19e |
| 3 | 10 | 40 | 14 | 9.90±0.10a |
| 4 | 7.5 | 50 | 17 | 6.58±0.04b |
| 5 | 5 | 60 | 21 | 6.18±0.09c |
| 6 | 2.5 | 70 | 24 | 5.60±0.16d |
| 编号 | 接种量/% | 含水量/% | 发酵时间/d | 产孢量/(×1010个/g) |
|---|---|---|---|---|
| 1 | -1 | -1 | 0 | 6.48±0.04fg |
| 2 | 1 | -1 | 0 | 6.02±0.02h |
| 3 | -1 | 1 | 0 | 5.98±0.02h |
| 4 | 1 | 1 | 0 | 9.28±0.02c |
| 5 | -1 | 0 | -1 | 6.55±0.06f |
| 6 | 1 | 0 | -1 | 7.27±0.14e |
| 7 | -1 | 0 | 1 | 6.47±0.07fg |
| 8 | 1 | 0 | 1 | 6.65±0.08f |
| 9 | 0 | -1 | -1 | 6.30±0.09g |
| 10 | 0 | 1 | -1 | 8.28±0.06d |
| 11 | 0 | -1 | 1 | 5.60±0.00i |
| 12 | 0 | 1 | 1 | 7.38±0.10e |
| 13 | 0 | 0 | 0 | 10.63±0.03ab |
| 14 | 0 | 0 | 0 | 10.72±0.02ab |
| 15 | 0 | 0 | 0 | 10.87±0.04a |
| 编号 | 接种量/% | 含水量/% | 发酵时间/d | 产孢量/(×1010个/g) |
|---|---|---|---|---|
| 1 | -1 | -1 | 0 | 6.48±0.04fg |
| 2 | 1 | -1 | 0 | 6.02±0.02h |
| 3 | -1 | 1 | 0 | 5.98±0.02h |
| 4 | 1 | 1 | 0 | 9.28±0.02c |
| 5 | -1 | 0 | -1 | 6.55±0.06f |
| 6 | 1 | 0 | -1 | 7.27±0.14e |
| 7 | -1 | 0 | 1 | 6.47±0.07fg |
| 8 | 1 | 0 | 1 | 6.65±0.08f |
| 9 | 0 | -1 | -1 | 6.30±0.09g |
| 10 | 0 | 1 | -1 | 8.28±0.06d |
| 11 | 0 | -1 | 1 | 5.60±0.00i |
| 12 | 0 | 1 | 1 | 7.38±0.10e |
| 13 | 0 | 0 | 0 | 10.63±0.03ab |
| 14 | 0 | 0 | 0 | 10.72±0.02ab |
| 15 | 0 | 0 | 0 | 10.87±0.04a |
| 来源 | 均方和 | 自由度 | 均方 | F值 | P值 | 显著性 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 模型 | 47.65 | 9 | 5.29 | 36.7 | 0.0005 | 显著 |
| A | 1.74 | 1 | 1.74 | 12.07 | 0.0178 | |
| B | 5.34 | 1 | 5.34 | 36.98 | 0.0017 | |
| C | 0.66 | 1 | 0.66 | 4.58 | 0.0852 | |
| AB | 3.55 | 1 | 3.55 | 24.58 | 0.0043 | |
| AC | 0.071 | 1 | 0.071 | 0.49 | 0.514 | |
| BC | 0.01 | 1 | 0.01 | 0.069 | 0.8029 | |
| A2 | 14.44 | 1 | 14.44 | 100.1 | 0.0002 | |
| B2 | 12.22 | 1 | 12.22 | 84.71 | 0.0003 | |
| C2 | 15.18 | 1 | 15.18 | 105.22 | 0.0002 | |
| 残差 | 0.72 | 5 | 0.14 | |||
| 失拟 | 0.69 | 3 | 0.23 | 16.53 | 0.0576 | 不显著 |
| 纯误差 | 0.028 | 2 | 0.014 | |||
| 合计 | 48.38 | 14 |
| 来源 | 均方和 | 自由度 | 均方 | F值 | P值 | 显著性 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 模型 | 47.65 | 9 | 5.29 | 36.7 | 0.0005 | 显著 |
| A | 1.74 | 1 | 1.74 | 12.07 | 0.0178 | |
| B | 5.34 | 1 | 5.34 | 36.98 | 0.0017 | |
| C | 0.66 | 1 | 0.66 | 4.58 | 0.0852 | |
| AB | 3.55 | 1 | 3.55 | 24.58 | 0.0043 | |
| AC | 0.071 | 1 | 0.071 | 0.49 | 0.514 | |
| BC | 0.01 | 1 | 0.01 | 0.069 | 0.8029 | |
| A2 | 14.44 | 1 | 14.44 | 100.1 | 0.0002 | |
| B2 | 12.22 | 1 | 12.22 | 84.71 | 0.0003 | |
| C2 | 15.18 | 1 | 15.18 | 105.22 | 0.0002 | |
| 残差 | 0.72 | 5 | 0.14 | |||
| 失拟 | 0.69 | 3 | 0.23 | 16.53 | 0.0576 | 不显著 |
| 纯误差 | 0.028 | 2 | 0.014 | |||
| 合计 | 48.38 | 14 |
| 作物 | 处理 | 株高/cm | 根长/cm | 整株鲜重/mg | 整株干重/mg |
|---|---|---|---|---|---|
| 小麦 | 菌肥 | 29.59±1.32 a | 16.14±1.22 a | 244.92±14.38 a | 36.09±1.11 a |
| CK | 20.38±1.04 b | 12.15±0.77 b | 176.66±9.74 b | 21.90±1.25 b | |
| 番茄 | 菌肥 | 18.56±0.75 a | 6.43±0.35 a | 1432.35±23.97 a | 134.88±7.62 a |
| CK | 12.31±0.94 b | 2.56±0.19 b | 1100.61±14.09 b | 108.83±1.86 b |
| 作物 | 处理 | 株高/cm | 根长/cm | 整株鲜重/mg | 整株干重/mg |
|---|---|---|---|---|---|
| 小麦 | 菌肥 | 29.59±1.32 a | 16.14±1.22 a | 244.92±14.38 a | 36.09±1.11 a |
| CK | 20.38±1.04 b | 12.15±0.77 b | 176.66±9.74 b | 21.90±1.25 b | |
| 番茄 | 菌肥 | 18.56±0.75 a | 6.43±0.35 a | 1432.35±23.97 a | 134.88±7.62 a |
| CK | 12.31±0.94 b | 2.56±0.19 b | 1100.61±14.09 b | 108.83±1.86 b |
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