陇东关山区域独活质量评价及成分测定

doi:10.11924/j.issn.1000-6850.casb2025-0362

中国农学通报 ›› 2025, Vol. 41 ›› Issue (29): 122-129.doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.casb2025-0362

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陇东关山区域独活质量评价及成分测定

任金萍¹^,²(), 白新明¹^,²(), 白小东¹^,², 陈燕玲¹^,², 冯文霞¹^,², 张继梅¹^,²

¹ 平凉市农产品质量安全与检验检测中心，甘肃平凉 744000
² 农业农村部农产品质量安全风险评估实验站，甘肃平凉 744000

收稿日期:2025-05-21 修回日期:2025-07-05 出版日期:2025-10-15 发布日期:2025-10-22
通讯作者:
白新明，男，1979年出生，甘肃静宁人，高级农艺师，研究生，硕士，主要从事农产品质量安全检测、中药材成分分析等方面的研究。通信地址：744000 甘肃省平凉市崆峒区广成路222号，Tel：0933-8222038，E-mail：1453406615@qq.com。
作者简介:
任金萍，女，1986年出生，甘肃靖远人，高级农艺师，本科，学士，主要从事农产品质量安全及色谱质谱相关分析方面的研究。通信地址：744000 甘肃省平凉市崆峒区广成路222号，Tel：0933-8222038，E-mail：84209489@qq.com。
基金资助:
甘肃省平凉市科技局重点研发科技项目“陇东关山区域中药材独活种质资源综合评价及技术集成示范推广”(PL-STK-2023A-032)

Quality Evaluation and Component Determination of Angelicae Pubescentis Radix in Guanshan Region of Eastern Gansu

REN Jinping¹^,²(), BAI Xinming¹^,²(), BAI Xiaodong¹^,², CHEN Yanling¹^,², FENG Wenxia¹^,², ZHANG Jimei¹^,²

¹ Pingliang Agricultural Products Quality Safety Inspection and Testing Center, Pingliang, Gansu 744000
² Agricultural Product Quality and Safety Inspection and Testing Station in Pingliang, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Pingliang, Gansu 744000

Received:2025-05-21 Revised:2025-07-05 Published:2025-10-15 Online:2025-10-22

摘要/Abstract

摘要：

本研究旨在对陇东关山区域中药材独活开展质量评价与成分测定，以期为今后独活种质资源研究利用提供参考。运用指纹图谱相似度评价软件建立陇东关山区域13批独活HPLC指纹图谱，采用系统聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对13批独活进行质量评价；同时测定独活主根和侧根中二氢欧山芹素、当归醇B、当归醇A、佛手柑内酯、二氢欧山芹醇醋酸酯、蛇床子素、二氢欧山芹醇当归酸酯8个成分的含量。13批独活共标定了18个共有峰，指认了8个成分，相似度为0.911~0.997，利用HCA将13批独活样品分为4类，PCA和HCA分析结果基本一致，OPLS-DA筛选出5个起主导作用的成分；指认的8个共有峰在独活主根和侧根中含量不同，侧根中蛇床子素、当归醇A的含量明显高于主根，而主根中二氢欧山芹素含量高于侧根，异欧前胡素则无显著差异。建立的HPLC指纹图谱、化学计量分析及多成分测定方法稳定可靠，能为本区域道地药材质量控制提供理论指导。

关键词: 独活, 指纹图谱, 系统聚类分析, 主成分分析, 正交偏最小二乘判别分析, 多成分测定

Abstract:

Quality evaluation and component determination of the Chinese herbal medicine Angelicae Pubescentis Radix (Duhuo) in Guanshan Region of Eastern Gansu were conducted to provide references for future research and utilization of Angelicae Pubescentis Radix germplasm resources. HPLC fingerprinting of 13 batches of Angelicae Pubescentis Radix from this region was established using similarity evaluation software, and quality assessment was performed through hierarchical cluster analysis (HCA), principal component analysis (PCA), and orthogonal partial least squares-discriminant analysis (OPLS-DA). The contents of eight components in both primary and lateral roots of Angelicae Pubescentis Radix were simultaneously determined, including columbianetin, angelol B, angelol A, bergapten, columbianetin acetate, osthole, and columbianadin. The 13 batches showed 18 common peaks (with 8 identified components) and similarity indices ranging from 0.911 to 0.997. HCA classified the samples into four categories, and the result was consistent with PCA findings. OPLS-DA screened five dominant components. The eight identified components exhibited differential distribution between primary and lateral roots: osthole and angelol A were significantly higher in lateral roots, whereas columbianetin was more abundant in primary roots. There was no significant difference for isoimperatorin. The developed analytical method integrating HPLC fingerprint profiling with chemometrics and multi-constituent determination proved to be robust and reproducible, offering scientific support for quality standardization of locally sourced Angelicae Pubescentis Radix.

Key words: Angelicae Pubescentis Radix (Duhuo), fingerprint, hierarchical cluster analysis (HCA), principal component analysis (PCA), orthogonal partial least squares-discriminant analysis (OPLS-DA), multi-component determination

任金萍, 白新明, 白小东, 陈燕玲, 冯文霞, 张继梅. 陇东关山区域独活质量评价及成分测定[J]. 中国农学通报, 2025, 41(29): 122-129.

REN Jinping, BAI Xinming, BAI Xiaodong, CHEN Yanling, FENG Wenxia, ZHANG Jimei. Quality Evaluation and Component Determination of Angelicae Pubescentis Radix in Guanshan Region of Eastern Gansu[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2025, 41(29): 122-129.

图/表 12

参考文献 18

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[3]	李亮, 卢志雁, 王政, 等. HPLC法同时测定独活中5个成分的含量[J]. 中药材, 2021, 44(3):654-657.
[4]	杨玉乔. 独活香豆素活性成分分离纯化工艺及其微波绿色提取方法研究[D]. 天津: 天津中医药大学, 2020.
[5]	贾萌, 赵华聪, 蔡淑慧, 等. HPLC指纹图谱及多成分定量的独活饮片质量评价研究[J]. 南京中医药大学学报, 2020, 36(1):88-93.
[6]	连赟芳. 基于HPLC指纹图谱与多元化统计法的黄芩质量评价研究[J]. 福建中医药, 2021, 52(10):23-26.
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[8]	张晴, 王云, 贾哲, 等. 基于热分析技术、指纹图谱及含量测定的不同产地酒黄芩质量评价[J]. 中国实验方剂学杂志, 2024, 30(19):170-179.
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[12]	张慧静, 陆胜民, 朱卫东, 等. 应用多成分定量结合化学计量学分析评价不同陈化时长椪柑陈皮质量[J]. 食品工业科技, 2023, 44(24):23-33.
[13]	陈瑞鑫, 蒋运斌, 陈文莉, 等. 不同产地独一味总黄酮的质量评价[J]. 中国药房, 2023, 34(4):419-422,428.
[14]	毕天琛, 杨国宁, 仝桂平, 等. 薏苡仁中药饮片指纹图谱的构建和识别模式研究[J]. 食品与药品, 2020, 22(2):85-90.
[15]	冯彦梅. 独活多指标质量分析方法研究[D]. 兰州: 甘肃农业大学, 2021.
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样品编号	采集地点	经度/E	纬度/N	海拔/m	土壤类型
S1	平凉市华亭市马峡镇寺沟村	106.50839	35.25425	1719.8	石灰性灰褐土
S2	平凉市华亭市马峡镇大岭村	106.49192	35.21889	1766.9	山地草甸土
S3	平凉市华亭市马峡镇赵庄村	106.51352	35.24292	1541.1	淋溶灰褐土
S4	平凉市华亭市西华镇新庄村	106.47608	35.25525	1630.2	黄绵土
S5	平凉市华亭市山寨回族乡东街村	106.47651	35.28721	1740.3	淋溶灰褐土
S6	平凉市华亭市山寨回族乡南阳洼村	106.50671	35.25228	1631.7	黄绵土
S7	平凉市华亭市策底镇大南峪村	106.55225	35.29915	1720.1	耕作淋溶灰褐土
S8	平凉市华亭市河西镇杨庄村	106.54936	35.32094	1566.3	红黏石灰性新积土
S9	平凉市庄浪县通化镇新集村	106.12613	35.35781	1857.8	红黏土
S10	平凉市庄浪县郑河乡下寨村	106.24069	35.26543	2119.1	黑垆土
S11	平凉市庄浪县永宁镇苏山村	106.28883	35.28128	2033.3	黄绵土
S12	平凉市庄浪县韩店镇刘咀村	106.19822	35.19362	1820.4	黑垆土
S13	平凉市庄浪县杨河乡张沟村	106.33969	35.33357	1800.6	黑垆土

样品编号	采集地点	经度/E	纬度/N	海拔/m	土壤类型
S1	平凉市华亭市马峡镇寺沟村	106.50839	35.25425	1719.8	石灰性灰褐土
S2	平凉市华亭市马峡镇大岭村	106.49192	35.21889	1766.9	山地草甸土
S3	平凉市华亭市马峡镇赵庄村	106.51352	35.24292	1541.1	淋溶灰褐土
S4	平凉市华亭市西华镇新庄村	106.47608	35.25525	1630.2	黄绵土
S5	平凉市华亭市山寨回族乡东街村	106.47651	35.28721	1740.3	淋溶灰褐土
S6	平凉市华亭市山寨回族乡南阳洼村	106.50671	35.25228	1631.7	黄绵土
S7	平凉市华亭市策底镇大南峪村	106.55225	35.29915	1720.1	耕作淋溶灰褐土
S8	平凉市华亭市河西镇杨庄村	106.54936	35.32094	1566.3	红黏石灰性新积土
S9	平凉市庄浪县通化镇新集村	106.12613	35.35781	1857.8	红黏土
S10	平凉市庄浪县郑河乡下寨村	106.24069	35.26543	2119.1	黑垆土
S11	平凉市庄浪县永宁镇苏山村	106.28883	35.28128	2033.3	黄绵土
S12	平凉市庄浪县韩店镇刘咀村	106.19822	35.19362	1820.4	黑垆土
S13	平凉市庄浪县杨河乡张沟村	106.33969	35.33357	1800.6	黑垆土

序号	对照品		分子式		分子量		CAS号	批号	纯度/%		制造商
1	伞形花内酯		C₉H₆O₃		162.145		93-35-6	J07HB172384	≥99.4		上海源叶生物科技有限公司
2	佛手柑内酯		C₁₂H₈O₄		216.19		484-20-8	J11IB219879	≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
3	蛇床子素		C₁₅H₁₆O₃		244.29		484-12-8	T08M8B30733	≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
4	二氢欧山芹醇当归酸酯		C₁₉H₂₀O₅		328.36		5058-13-9	A12HB191658	≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
5	欧前胡素		C₁₆H₁₄O₄		270.28		482-44-0	D10GB170533	≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
6	异欧前胡素		C₁₆H₁₄O₄		270.284		482-45-1	SO2IB224676	≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
7	二氢欧山芹素	C₁₄H₁₄O₄		246.26		3804-70-4		F26O11X127827		≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
8	橙皮内酯	C₁₅H₁₆O₄		260.29		23971-42-8		W24D9Z78341		≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
9	二氢欧山芹醇醋酸酯	C₁₆H₁₆O₅		288.29		23180-65-6		S12IB225798		≥99.7		上海源叶生物科技有限公司
10	当归醇A	C₂₀H₂₄O₇		376.4		19625-17-3		P07J12F136755		≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
11	当归醇B	C₂₀H₂₄O₇		376.4		83156-04-1		JB245973		≥98.6		上海源叶生物科技有限公司
12	补骨脂素	C₁₁H₆O₃		186.16		66-97-7		D07IB234612		≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
13	邪蒿素	C₁₄H₁₂O₃		228.243		523-59-1		N03GB166576		≥99.9		上海源叶生物科技有限公司

序号	对照品		分子式		分子量		CAS号	批号	纯度/%		制造商
1	伞形花内酯		C₉H₆O₃		162.145		93-35-6	J07HB172384	≥99.4		上海源叶生物科技有限公司
2	佛手柑内酯		C₁₂H₈O₄		216.19		484-20-8	J11IB219879	≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
3	蛇床子素		C₁₅H₁₆O₃		244.29		484-12-8	T08M8B30733	≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
4	二氢欧山芹醇当归酸酯		C₁₉H₂₀O₅		328.36		5058-13-9	A12HB191658	≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
5	欧前胡素		C₁₆H₁₄O₄		270.28		482-44-0	D10GB170533	≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
6	异欧前胡素		C₁₆H₁₄O₄		270.284		482-45-1	SO2IB224676	≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
7	二氢欧山芹素	C₁₄H₁₄O₄		246.26		3804-70-4		F26O11X127827		≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
8	橙皮内酯	C₁₅H₁₆O₄		260.29		23971-42-8		W24D9Z78341		≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
9	二氢欧山芹醇醋酸酯	C₁₆H₁₆O₅		288.29		23180-65-6		S12IB225798		≥99.7		上海源叶生物科技有限公司
10	当归醇A	C₂₀H₂₄O₇		376.4		19625-17-3		P07J12F136755		≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
11	当归醇B	C₂₀H₂₄O₇		376.4		83156-04-1		JB245973		≥98.6		上海源叶生物科技有限公司
12	补骨脂素	C₁₁H₆O₃		186.16		66-97-7		D07IB234612		≥98.0		上海源叶生物科技有限公司
13	邪蒿素	C₁₄H₁₂O₃		228.243		523-59-1		N03GB166576		≥99.9		上海源叶生物科技有限公司

样品编号	S1		S2		S3		S4		S5		S6		S7		S8		S9		S10		S11		S12	S13	R
S1	1		0.964		0.928		0.983		0.987		0.924		0.992		0.956		0.898		0.927		0.981		0.969	0.902	0.984
S2	0.964		1		0.978		0.961		0.992		0.987		0.981		0.868		0.965		0.975		0.988		0.970	0.927	0.991
S3	0.928		0.978		1		0.942		0.971		0.981		0.962		0.828		0.975		0.975		0.963		0.935	0.914	0.974
S4	0.983		0.961		0.942		1		0.983		0.937		0.986		0.937		0.922		0.959		0.971		0.946	0.899	0.984
S5	0.987		0.992		0.971		0.983		1		0.970		0.997		0.914		0.946		0.968		0.990		0.970	0.917	0.997
S6	0.924		0.987		0.981		0.937		0.970		1		0.954		0.795		0.982		0.987		0.963		0.928	0.926	0.972
S7	0.992		0.981		0.962		0.986		0.997		0.954		1		0.933		0.934		0.956		0.988		0.965	0.910	0.994
S8	0.956		0.868		0.828		0.937		0.914		0.795		0.933		1		0.778		0.814		0.911		0.918	0.802	0.911
S9		0.898		0.965		0.975		0.922		0.946		0.982		0.934		0.778		1		0.969		0.955	0.914	0.955	0.961
S10		0.927		0.975		0.975		0.959		0.968		0.987		0.956		0.814		0.969		1		0.951	0.911	0.899	0.969
S11		0.981		0.988		0.963		0.971		0.990		0.963		0.988		0.911		0.955		0.951		1	0.986	0.954	0.996
S12		0.969		0.970		0.935		0.946		0.970		0.928		0.965		0.918		0.914		0.911		0.986	1	0.928	0.976
S13		0.902		0.927		0.914		0.899		0.917		0.926		0.910		0.802		0.955		0.899		0.954	0.928	1	0.942
R		0.984		0.991		0.974		0.984		0.997		0.972		0.994		0.911		0.961		0.969		0.996	0.976	0.942	1

陇东关山区域独活质量评价及成分测定

Quality Evaluation and Component Determination of Angelicae Pubescentis Radix in Guanshan Region of Eastern Gansu

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序号	对照品	线性范围/(μg/mL)	线性方程	r²	添加回收率/%
1	二氢欧山芹素	5~50	y=0.0479x-1.0426	0.9935	84.0~87.5
2	当归醇B	10~400	y=0.0818x+1.2855	0.9997	76.9~90.1
3	当归醇A	20~600	y=0.0351x+0.1130	0.9998	87.6~93.2
4	佛手柑内酯	5~200	y=0.0533x-1.3221	0.9985	88.9~96.7
5	二氢欧山芹醇醋酸酯	10~200	y=0.0332x-3.7685	0.9961	70.2~89.6
6	蛇床子素	50~1200	y=0.0499x-4.8139	0.9995	82.3~96.7
7	异欧前胡素	1~50	y=0.0952x-0.9982	0.9925	77.1~90.5
8	二氢欧山芹醇当归酸酯	20~400	y=0.0571x+9.1832	0.9971	86.6~94.3

样品编号	成分/(mg/g)
样品编号	二氢欧山芹素	当归醇B	当归醇A	佛手柑内酯	二氢欧山芹醇醋酸酯	蛇床子素	异欧前胡素	二氢欧山芹醇当归酸酯
S1	0.1649	1.3947	1.6858	ND	0.8859	10.5205	0.2233	0.8351
S2	0.5502	1.7205	1.7838	0.0476	1.3103	9.1600	0.2152	1.7047
S3	0.5887	1.3659	3.1463	0.4067	0.7891	10.9241	0.3217	1.1646
S4	0.2025	2.0150	4.3847	0.1589	0.7265	14.0969	0.3546	2.7399
S5	0.1109	1.3880	3.1630	0.0967	1.0291	11.3112	0.2366	1.4031
S6	0.3057	1.4350	3.5501	0.1995	0.8540	7.3490	0.1401	1.0943
S7	0.1715	1.2750	1.6149	0.0676	0.8618	11.2598	0.2149	1.1111
S8	0.1216	1.3765	1.3674	0.0348	0.9454	7.0070	0.1389	0.9547
S9	0.0772	0.9806	1.3024	0.0134	0.6426	4.7841	0.3432	2.0463
S10	0.2283	1.7790	3.3302	0.0837	0.2829	6.0439	0.1141	2.0856
S11	0.1345	1.3584	1.7605	ND	1.0433	7.7936	0.1550	0.6706
S12	0.2093	1.3381	1.4821	0.0484	1.9538	8.0663	0.2261	1.5334
S13	0.2291	2.3300	4.7668	0.1733	1.3369	9.6571	0.3566	1.6951

[1]	赵芳, 高运青, 高韶斌, 郑丽珍, 李姝彤, 尚启兵, 徐东旭, 关翔宇. 河北省绿豆种质资源主要农艺性状、经济性状遗传多样性分析及综合评价[J]. 中国农学通报, 2025, 41(5): 23-29.
[2]	曹军, 王茂森, 王国铸, 赵杰, 王建明, 郑思思, 陶弢, 赵怡宁, 张才喜, 纠松涛. 梨SSR指纹图谱身份证的研究进展与展望[J]. 中国农学通报, 2025, 41(4): 25-30.
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样品编号	成分/(mg/g)
样品编号	二氢欧山芹素	当归醇B	当归醇A	佛手柑内酯	二氢欧山芹醇醋酸酯	蛇床子素	异欧前胡素	二氢欧山芹醇当归酸酯
S1	0.0944	1.7846	3.5755	1.0975	1.0975	14.5131	0.2110	0.7923
S2	0.2702	2.2854	4.8396	0.0000	1.6048	15.0677	0.1994	1.6847
S3	0.2920	2.0233	4.4662	0.2735	0.8605	13.1823	0.3007	1.3619
S4	0.1058	2.3865	5.0731	ND	0.6501	16.7583	0.3903	4.4422
S5	0.1473	0.1861	4.0108	0.0360	1.0552	13.2306	0.1991	1.1367
S6	0.1762	2.2770	4.5149	0.0469	0.9473	12.6252	0.1732	1.2799
S7	0.1307	1.9488	4.3738	ND	1.0345	21.1879	0.2210	0.8885
S8	0.1411	1.5822	1.9716	0.0559	1.0468	16.9155	0.4236	1.9268
S9	0.0691	1.4165	3.4827	0.0166	0.6147	12.8950	0.2070	1.9968
S10	0.1755	2.3458	4.2116	0.0418	0.4433	8.6840	0.1622	2.2603
S11	0.1150	1.7649	3.8296	ND	1.3794	11.5806	0.2052	0.8427
S12	0.1575	1.3217	2.9594	0.0187	1.8289	12.5805	0.2212	1.8694
S13	0.1137	2.3676	5.0070	0.0485	1.4276	16.6816	0.3138	2.1018

样品编号	成分/(mg/g)
样品编号	二氢欧山芹素	当归醇B	当归醇A	佛手柑内酯	二氢欧山芹醇醋酸酯	蛇床子素	异欧前胡素	二氢欧山芹醇当归酸酯
S1	0.0944	1.7846	3.5755	1.0975	1.0975	14.5131	0.2110	0.7923
S2	0.2702	2.2854	4.8396	0.0000	1.6048	15.0677	0.1994	1.6847
S3	0.2920	2.0233	4.4662	0.2735	0.8605	13.1823	0.3007	1.3619
S4	0.1058	2.3865	5.0731	ND	0.6501	16.7583	0.3903	4.4422
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S10	0.1755	2.3458	4.2116	0.0418	0.4433	8.6840	0.1622	2.2603
S11	0.1150	1.7649	3.8296	ND	1.3794	11.5806	0.2052	0.8427
S12	0.1575	1.3217	2.9594	0.0187	1.8289	12.5805	0.2212	1.8694
S13	0.1137	2.3676	5.0070	0.0485	1.4276	16.6816	0.3138	2.1018