为筛选出适宜青藏高原高海拔恶劣环境(玛多地区)种植的优质高产燕麦品种,提升当地饲草生产水平,缓解高寒地区饲草短缺问题,选择8个在青海广泛种植的优良燕麦品种(裸燕麦2个、皮燕麦6个),在玛多县的黄河流域阿印村(海拔4500 m)开展随机区组引种试验。测定分析各品种的农艺性状(株高、茎粗、旗叶尺寸、分蘖数)、产量性状(鲜草产量、干草产量、茎叶比、根冠比、鲜干比)及营养品质(粗蛋白、粗脂肪、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维、相对饲用价值),采用TOPSIS多准则决策模型对不同燕麦品种的多项指标进行综合评价。结果表明,‘青海444’燕麦的干草产量最高(5514.67 kg/hm2),株高达到58.82 cm;‘青引3号’、‘青海甜燕麦’的粗蛋白含量比较高,分别为7.25%、6.21%;‘青引3号’的酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维含量都比较低,分别为38.42%、56.06%,但相对饲用价值较高(83.76%)。TOPSIS多准则决策模型分析表明,‘青海444’和‘青引1号’表现出较高的生产性能和营养品质,是适合在玛多地区大面积推广种植的理想燕麦品种。
本研究旨在建立一种高特异性、高灵敏度且快速的间接ELISA方法,用于临床非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的高效检测。以重组质粒pET-28a-P72为表达载体,经IPTG诱导(终浓度0.5 mmol/L,37℃诱导4 h)和镍亲和纯化,获得高纯度重组蛋白P72(纯度>90%),通过Western blot验证其与ASFV阳性血清的反应原性(条带清晰,分子量约35 kDa,与阴性血清无交叉反应)。将其作为包被抗原,通过各项条件优化,初步建立非洲猪瘟病毒P72蛋白抗体间接ELISA方法。以该重组P72蛋白为包被抗原,通过棋盘滴定法优化关键参数,初步建立ASFV抗体间接ELISA检测方法。结果显示,优化后的方法学参数为:抗原包被浓度5 μg/mL、4℃封闭12 h;血清稀释度1:160、37℃反应30 min;酶标二抗稀释度1:1000、37℃反应30 min;TMB底物37℃反应10 min。判定标准基于40份ASFV阴性血清(健康猪血清)检测结果确定:OD450值≥0.69为阳性,OD450值≤0.57为阴性,OD450值在两者之间则判定为可疑。方法学评估表明:该方法与猪瘟病毒(CSFV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)等6种病原阳性血清均无交叉反应(特异性100%);灵敏度可达1:1600;批内变异系数(CV)为3.2%~8.5%,批间CV为6.8%~12.3%,均小于15%,呈现出良好的准确度和可靠性。成功建立非洲猪瘟病毒P72蛋白抗体间接ELISA方法,可用于ASFV抗体的检测,并为疫情监测预警提供实用化技术支持。
为探究内蒙古草原植物提取物的抗氧化活性,本研究以达拉特旗及乌拉盖草原的16种植物为试验材料,采用福林酚法、三氯化铝比色法、浓硫酸-苯酚比色法及香草醛-高氯酸比色法,分别测定各提取物中总多酚、总黄酮、总多糖及总皂苷含量;同时以DPPH、ABTS自由基清除率和总抗氧化能力为指标,开展体外抗氧化活性评价。结果显示,16种植物提取物中,各组分含量及抗氧化活性差异明显,其中,地榆和叉分蓼中总多酚含量最高,达到33.22%和29.34%,叉分蓼中总黄酮含量最高,达到17.72%,且地榆和叉分蓼提取物的DPPH、ABTS自由基清除率和总抗氧化能力最强。本研究明确了内蒙古草原高抗氧化活性植物资源,为草原植物的抗氧化功能挖掘、医药及功能产品开发,以及草原植物资源的可持续利用提供了科学理论支撑。
本研究评估榆林北部风沙草滩区不同紫花苜蓿品种的生产适应性与生产潜力,以期为该地区苜蓿产业发展与生态建设提供科学依据。选取20个紫花苜蓿品种,开展3茬田间试验,采用随机区组设计,结合近红外光谱技术与化学分析测定营养指标,最终通过灰色关联度法进行综合评价。采用近红外光谱技术快速测定苜蓿营养品质,结合化学分析验证数据准确性。该技术操作简便捷高效,可在短时间内提供多项关键营养指标。此外,运用灰色关联度分析法对不同品种的生产性能与营养品质进行综合排序。研究发现,不同品种的生产性能与营养品质存在显著差异。‘大银河’‘擎天柱’和‘三得利’在年干草产量方面表现最佳,分别为545.62、544.12、544.72 t/hm²。‘皇后’在第1茬的表现最佳,尤其是在中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、干物质和相对饲喂价值等指标上。灰色关联度分析显示,‘擎天柱’、‘普沃4.2’和‘皇后’在综合性状居前3位,具有较强的推广潜力。本研究表明,‘擎天柱’、‘普沃4.2’和‘皇后’在榆林风沙草滩区具有优良的生产性能与营养品质,适合在该地区种植。研究结果可为该地区的牧草选育及可持续农业发展提供科学依据,并为类似地区的牧草种植提供参考。
本研究旨在建立一种检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法。通过合成ASFV特异性引物和探针,优化退火温度、引物和探针浓度等反应条件,对方法的特异性、灵敏度和重复性进行综合评价,并根据优化后的条件进行初步临床应用。结果显示:建立的ddPCR方法最佳退火温度为61.4℃;最佳引物和探针终浓度分别为700 nmol/L和150 nmol/L;特异性试验显示该方法仅特异性扩增ASFV,与其他常见疫病病毒无交叉反应;最低检测限为1.37 copies/μL,比荧光定量PCR敏感性高10倍,浓度梯度线性分析显示良好线性关系(R2=0.9898);重复性试验中变异系数均低于10%。利用该方法检测80份不同来源的疑似ASFV临床样本,结果显示均为阴性,与荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)方法检测结果一致。综上,本研究建立的ddPCR方法敏感性高、特异性强、重复性好,可用于ASFV临床样本的精确检测分析。
本研究旨在比较4种市售天然植物提取物异绿原酸、单宁酸、姜黄素和β-胡萝卜素的体外抗氧化能力,明确其抗氧化活性和有效性。以4种天然提取物为试材,采用自由基清除试验、还原能力测定及红细胞氧化应激模型,测定其抗氧化相关指标。试验结果表明,天然植物提取物浓度为100 μg/mL时,DPPH清除率为异绿原酸60.91%、单宁酸82.87%、姜黄素65.11%、β-胡萝卜素6.23%。FRAP值异绿原酸最高达1096.89 μmol Fe2+/mL。在红细胞氧化应激模型中,与AAPH模型组相比,异绿原酸、单宁酸和姜黄素组,溶血率分别显著降低了42.66%(P<0.05)、68.48%(P<0.05)、和33.29%(P<0.05),MDA含量显著降低52.88%(P<0.05) 、60.90%(P<0.05)、47.28%(P<0.05)和4.01%(P<0.05)。单宁酸组SOD活力显著升高45.09%(P<0.05),而异绿原酸、姜黄素、β-胡萝卜素组分别升高8.41%(P>0.05)、3.98%(P>0.05)和6.65%(P>0.05),但无显著性差异。综上,4种天然植物提取物均表现出良好的体外抗氧化活性,其中抗氧化能力强弱为单宁酸>异绿原酸>姜黄素>β-胡萝卜素。
针对中国畜牧业在“十五五”期间面临的重大动物疫病、人兽共患病、寄生虫病及细菌耐药性等多重挑战,为保障产业与公共卫生安全,本建议提出一套系统性的动物疫病综合防控科技创新战略。在分析中国动物疫病防控现状与瓶颈的基础上,聚焦病原致病机制、人兽共患病防控、寄生虫病防治、细菌耐药性控制及新兽药创制五大领域,规划了关键研究路径与目标,绘制了“十五五”科技攻关蓝图。该蓝图强调以基础研究为支撑,深入解析病原致病与免疫逃逸机制;以关键技术为突破口,重点布局新型疫苗、新兽药及智能化监测诊断体系的研发;并针对寄生虫病和细菌耐药性问题制定专项防控策略。实施本建议有望突破核心技术瓶颈,提升中国动物重大疫病综合防控能力,对保障养殖业可持续发展与公共卫生安全具有重大战略意义,为“十五五”动物防疫工作提供顶层设计指导。
本研究旨在系统综述国际肉鸡高效养殖理念与技术前沿,剖析美国规模养殖企业的典型案例,并结合中国肉鸡产业核心短板及山东省数智化与低碳养殖实践探索,为“十五五”期间中国肉鸡产业科技创新提供战略建议。研究发现,中国肉鸡产业在种业创新、精准环境控制、生产数据统计分析与利用、以及碳排放管理等方面与国际先进水平存在显著差距;山东省的实践表明,数智化与低碳化融合是提升产业效能的重要突破口。据此,本研究提出“十五五”期间中国肉鸡产业科技创新的主要目标、重点方向与具体任务清单,以推动肉鸡养殖产业向智能化、绿色化、可持续化方向发展。
为探究介壳虫(Coccoidea)领域的研究热点演变轨迹、知识结构特征及未来发展趋势,对中国知网(CNKI)和Web of Science(WOS)中,1994—2024年与介壳虫研究相关的文献进行系统梳理,共检索到中文文献806篇、英文文献2757篇,利用VOSviewer和CiteSpace软件对发文数量、国家、机构、作者合作网络、来源期刊,以及关键词的共现、聚类、时间演变和突现进行可视化分析。发文量总体呈波浪式上升趋势,伴随阶段性波动,其中发文量最多的国家依次为美国、中国、印度和巴西。中文文献主要聚焦于介壳虫的新种记述及其发生规律,而英文文献则更侧重于生物防治研究,特别是对天敌及寄主植物的深入探讨。寄主植物及药剂防治等为国内研究的前沿,而植物害虫、植物健康及害虫风险则为当前国际研究的热点。通过可视化图谱直观呈现了近30年来介壳虫研究领域的整体状况,表明该领域研究逐步深入且发展势头良好,但目前的研究主要集中于新种记述及化学和生物防治,亟需加强基础研究与应用的结合,特别是在气味受体靶向的行为调控剂设计与开发方面。
为筛选适宜图木舒克气候环境种植的优质紫花苜蓿品种,本研究以引进的‘WL366’、‘中苜1号’等8个紫花苜蓿品种为试验材料,通过小区栽培试验,对8个品种的株高、鲜茎叶比等9项指标数据进行采集与分析。结果表明:鲜草产量年度最高的为‘中苜1号’的19017.99 kg/hm2;干草产量年度最高的为‘公农1号’的6248.55 kg/hm2。‘中兰2号’的鲜茎叶比(0.94)和干茎叶比(0.91)均为最低,表明其含叶量高,适口性较好。供试品种的蛋白质含量介于20.05%~21.66%之间。综合得分显示,表现最好的品种为‘WL366’,其次为‘公农1号’,第三是‘大银河’。相关性分析表明,株高、生长速率和日生长量是干草产量的关键影响指标,三者数值越大,干草产量越高;鲜茎叶比与鲜草产量呈正相关,即鲜茎叶比越大,鲜草产量越高;茎叶比越小,叶片比例越高,蛋白质等营养成分含量越高。
膜联蛋白(Anx)为一类钙依赖性磷脂结合蛋白,具有独特的结构域,在细胞生命活动中发挥调节作用,并与多种疾病相关。本研究主要综述了Anx的结构与分类,重点关注其在广州管圆线虫、猪囊尾蚴、细粒棘球蚴、多头绦虫和血吸虫等重要人兽共患蠕虫病感染中的免疫应答机制研究进展。这些研究揭示了蠕虫Anx通过抗凝血、调节免疫细胞凋亡、干扰宿主凝血系统等多种机制,参与免疫逃避,促进蠕虫在宿主体内的生存。深入理解Anx在人兽共患蠕虫病中的作用机制,为开发新型诊断靶标、治疗策略和疫苗设计提供理论基础,具有重要的生物学意义和应用价值。
研究木醋液浸种对牧草种子萌发的影响,为木醋液在牧草种子浸种的推广应用提供参考依据。以红豆草(Onobrychis viciifolia)、紫花苜蓿(Medicago sativa)、无芒雀麦(Bromus inermis)种子为试验材料,采用种子萌发试验方法,设置0%(蒸馏水对照)和木醋液稀释0、50、100、200、300、400、500、600倍9个处理,分析种子萌发和幼苗生长的情况。结果表明,红豆草根长在木醋液稀释300倍处理下增加9.5%、百苗干重显著增加20.9%(P<0.05);与对照相比,紫花苜蓿在木醋液稀释400倍处理下发芽率、发芽势分别显著提高22%、21%,发芽指数、活力指数、根长增加20%、22%、18%,百苗干鲜重增加30%(P<0.05);无芒雀麦在木醋液稀释500倍处理下,芽长显著增加8.4%(P<0.05)。木醋液浸种能有效提高芽长、根长、百苗干重等,改善牧草种子萌发与生长状况,红豆草、紫花苜蓿、无芒雀麦分别在稀释300、400、500倍木醋液浸种最佳。
为筛选适宜连翘(Forsythia suspensa)授粉的高效传粉昆虫,分别对地熊蜂(Bombus terrestris)、中华蜜蜂(Apis cerana cerana)的访花行为和授粉效果进行观测对比。在连翘开花期,通过标记花枝并记录花朵数量,统计座果率,并在收获期测量果实的果长、果宽、鲜重和干重等指标。结果显示,中华蜜蜂和地熊蜂的访花行为存在明显差异。中华蜜蜂单花访问时间较短[(9.77±0.16) s],访花频率较高[(9.18±0.32)朵/min],访花间隔时间较短[(3.50±0.60) s],出巢高峰期和回巢高峰期分别为上午10:00(322只)、下午14:00(237只)。地熊蜂的单花访问时间较长[(14.65±3.25) s],访花频率较低[(4.28±0.25)朵/min],访花间隔时间较长[(7.65±1.35) s],出巢和回巢高峰期分别为上午10:00(32只)和下午14:00(28只)。不同授粉处理对连翘座果率影响显著,中华蜜蜂授粉的座果率最高(79%),显著高于地熊蜂授粉座果率(58%)与对照组(50%)座果率,且均显著高于连翘的风传授粉座果率(17%)和自花授粉座果率(2%)。此外,中华蜜蜂授粉显著提升了连翘果实的果长、果宽、鲜重和干重等农艺性状。中华蜜蜂的有效放蜂距离为180 m。综上,中华蜜蜂的访花效率和授粉效果均优于地熊蜂,是连翘授粉的理想蜂种。
为评价阿尔巴斯山羊肉的营养品质,分析了阿尔巴斯山羊肉的营养成分特征。以39只1.5~4岁的阿尔巴斯山羊为试验对象,对羊肉中脂肪酸、氨基酸、常规营养素和矿物元素进行检测。结果表明,阿尔巴斯山羊肉股二头肌、背最长肌中EAA(必需氨基酸)/NEAA(非必需氨基酸)为67.4%和70.1%,且EAA/TAA(氨基酸总量)值在40%左右,谷氨酸、天冬氨酸、赖氨酸和亮氨酸含量最高;胆固醇含量低;棕榈酸和硬脂酸含量低于其他品种的羊肉;钙、铁、锰、锌含量高于其他品种的羊肉;股二头肌与背最长肌中水分、脂肪、棕榈酸和棕榈油酸含量存在显著差异(P<0.05),其他检测的营养成分含量差异不显著,背最长肌中脂肪、油酸含量明显高于股二头肌。研究发现,阿尔巴斯山羊肉氨基酸含量与组成特征不同于其他品种的羊,氨基酸组成平衡;油酸含量高,胆固醇含量较低;棕榈酸、硬脂酸含量低;钙、铁、锰、锌含量高;股二头肌与背最长肌在水分、脂肪、棕榈酸和棕榈油酸含量方面存在营养成分差别,而各种氨基酸和矿物元素含量差异不显著。试验结果可用于阿尔巴斯山羊肉营养品质评价、质量真实性保证及产品溯源研究。
为了获得旋毛虫(T1)14-3-3蛋白,并对其生物学特征鉴定评估。使用相关网站及软件对旋毛虫14-3-3(Ts14-3-3)蛋白生物学信息进行分析预测;利用基因克隆和原核表达技术将Ts14-3-3与pET-28a进行重组,并获得重组Ts14-3-3(rTs14-3-3)蛋白,经Western blot鉴定其抗原性后,制备rTs14-3-3蛋白免疫血清,并采用qPCR技术和间接免疫荧光技术鉴定其在不同虫期的表达及肌幼虫中的定位;通过动物实验评估rTs14-3-3蛋白对旋毛虫感染小鼠肌肉中幼虫的减虫效果。成功制备出可溶性的rTs14-3-3蛋白,大小约为33 kDa,并能够特异性识别猪旋毛虫阳性血清,制备的免疫血清效价高达1:512000,该蛋白在旋毛虫肌幼虫内部大量表达,基因在旋毛虫肠道感染期幼虫、成虫、肌幼虫中均有转录,对小鼠肌幼虫减虫率为55.2%。rTs14-3-3蛋白的反应原性和免疫原性良好,能够减少旋毛虫感染小鼠组织中的肌幼虫数量,具有作为血清学诊断和候选疫苗分子抗原的潜力。
研究旨在建立一种快速检测猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)gB蛋白间接CLIA抗体检测方法,以期为猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)的防控和规模化猪群疫苗免疫水平评估提供技术支持。本研究将羧基磁珠与重组gB蛋白进行偶联反应形成免疫磁珠,利用全自动化学发光仪对各项反应条件进行优化;选用6种不同浓度的标准品绘制标准曲线;通过绘制ROC曲线确定阴阳性判定标准;初步完成方法建立后分别对其特异性、敏感度、重复性、符合率进行评估。结果显示磁珠偶联最佳pH 6.0,蛋白偶联最佳浓度为40 μg/mL,10% BSA为最优封闭剂,酶标抗体最佳稀释度为1:20000,血清反应时间为5 min,酶标抗体反应时间为10 min,预激发液反应时间为5 min,最终绘制出一条R2=0.9987的标准曲线,同时将判定标准定为:≥16.78 U为阳性,<16.78 U则为阴性。方法学评估中与7种猪类病原的阳性血清均无交叉反应,敏感度略高于商业化试剂盒,批内批间系数均小于10%,与商业化ELISA试剂盒比对总符合率为98.9%。本研究建立的猪伪狂犬病毒gB蛋白间接化学发光抗体检测方法可用于PR流行病学调查及疫苗免疫水平评估,为后续试剂盒研发提供理论参考。
益生菌发酵中药可以充分发挥益生菌与中药的双重优势,应用在畜牧养殖上能够提高动物生长性能、减少疾病发生率、提高肉蛋品质以及增强动物的健康状况,具有广阔的应用前景,但中国益生菌发酵中药的研究和应用仍处于初级阶段。本研究从中药发酵益生菌种类、工艺类型、机理功效及其在反刍动物、单胃动物、水产动物养殖中的应用等方面分别进行了阐述。益生菌能够调节动物胃肠道菌群平衡,生成多种活性酶及其他代谢产物,可促进动物免疫系统器官的发育,参与机体的多种生理功能,如糖、氮质、脂类、无机盐代谢和维生素等物质的合成,增强机体抗病力。益生菌发酵中药技术具有提高药效、降解大分子活性物质、降低毒副作用、促进动物生长、提高免疫力等优点,且无抗、低残留、绿色安全,是饲料端禁抗后的理想饲料添加剂。针对目前发酵菌种性能不稳定、发酵工艺无标准等问题,提出了5个研究方向。通过开展综述,为益生菌发酵中药的进一步推广和应用提供理论支持和实践指导,助推畜牧养殖业的健康可持续发展。